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苹果矮化砧木M9根系IPT5b基因表达调控及其致矮机理的研究

摘要第4-5页
abstract第5页
缩略词第6-11页
第一章 引言第11-26页
    1.1 苹果矮化密植栽培的意义第11页
    1.2 苹果主要矮化砧木选育与应用第11-15页
        1.2.1 国外苹果主要矮化砧木第11-13页
        1.2.2 国内苹果主要矮化砧木第13-15页
    1.3 苹果矮化砧木致矮机理研究现状第15-19页
        1.3.1 苹果矮化砧木的解剖结构特点第15-16页
        1.3.2 苹果矮化砧木的物质运输特点第16页
        1.3.3 苹果矮化砧木的光合作用特点第16-17页
        1.3.4 苹果矮化砧木的激素代谢特点第17-18页
        1.3.5 苹果矮化砧木致矮性的遗传标记第18-19页
    1.4 CKs代谢调控通路与信号转导途径的研究进展第19-24页
        1.4.1 腺苷磷酸异戊烯基转移酶第20-22页
        1.4.2 tRNA-异戊烯基转移酶第22页
        1.4.3 细胞色素P450单氧酶第22页
        1.4.4 CKs激活酶第22-23页
        1.4.5 CKs的失活与降解第23页
        1.4.6 CKs的信号转导途径第23-24页
    1.5 研究的目的和意义第24-26页
第二章 材料与方法第26-43页
    2.1 试验材料第26-28页
        2.1.1 植物材料第26页
        2.1.2 菌株、载体与试剂第26-27页
        2.1.3 试验仪器第27-28页
    2.2 试验方法第28-43页
        2.2.1 玉米素含量的测定第28页
        2.2.2 核酸的提取、纯化与cNDA合成第28-30页
        2.2.3 基因片段的克隆与测序第30-31页
        2.2.4 qRT-PCR分析基因表达量第31-32页
        2.2.5 系统进化树的绘制与蛋白质三级结构的预测第32页
        2.2.6 植物表达载体的构建与转化第32-37页
        2.2.7 烟草的注射与GUS染色方法第37页
        2.2.8 拟南芥原生质体的制备与转化方法第37-39页
        2.2.9 拟南芥的浸花转化方法第39页
        2.2.10 砧木材料扦插生根与杂交群体表型调查第39页
        2.2.11 亚硫酸氢盐测序法检测DNA甲基化位点第39-40页
        2.2.12 酵母双杂交试验方法第40-43页
第三章 结果与分析第43-58页
    3.1 苹果矮化砧木M9致矮关键基因的筛选第43-46页
        3.1.1 不同苹果砧木根系玉米素的含量第43页
        3.1.2 苹果属植物CKs代谢通路基因家族成员的确定第43页
        3.1.3 不同苹果砧木根系IPT,CYP735A,LOG,CKX家族成员的基因表达量第43-45页
        3.1.4 IPT5b基因的系统进化树分析与蛋白质三级结构预测第45-46页
    3.2 IPT5b基因差异表达的原因分析第46-48页
        3.2.1 M9和八棱海棠IPT5b基因启动子活性分析第46页
        3.2.2 启动子序列分段删除确定启动子活性差异的区域第46-47页
        3.2.3 启动子序列定点突变确定启动子活性差异的功能位点第47-48页
    3.3 M9和八棱海棠IPT5b基因启动子Deletion变异的功能第48-52页
        3.3.1 Deletion变异在苹果砧木中检测方法的开发第48-49页
        3.3.2 Deletion变异在苹果砧木种质资源中与致矮性关系的验证第49-50页
        3.3.3 Deletion变异在八棱海棠×M9杂交群体中与致矮性关系的验证第50-51页
        3.3.4 Deletion变异影响根系玉米素合成的功能验证第51-52页
    3.4 M9和八棱海棠IPT5b基因启动子DNA甲基化差异与功能验证第52-55页
        3.4.1 亚硫酸氢盐测序法确定启动子甲基化位点差异第52-54页
        3.4.2 外施5-氮胞苷对IPT5b基因表达的影响第54-55页
    3.5 IPT5b基因上游调控机理初探第55-58页
        3.5.1 苹果属植物AUX/IAA基因家族成员的确定第55页
        3.5.2 M9和八棱海棠中AUX/IAA基因家族成员编码区Domain Ⅱ的序列比较第55-58页
第四章 讨论第58-62页
    4.1 苹果砧木根系玉米素的动态平衡第58页
    4.2 Deletion变异与M9砧木致矮性的关系第58-59页
    4.3 DNA甲基化与M9砧木致矮性的关系第59页
    4.4 IPT5b基因可能的上游调控机理第59-60页
    4.5 M9矮化自根砧的致矮机理第60-62页
第五章 结论第62-63页
参考文献第63-79页
致谢第79-80页
附录第80-83页
个人简介第83页

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