| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 课题的研究背景 | 第12-16页 |
| 1.2 研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 1.3 创新之处 | 第17-18页 |
| 第二章 双氯芬酸人工抗原合成 | 第18-25页 |
| 2.1 引言 | 第18-20页 |
| 2.1.1 半抗原、抗原概念 | 第18页 |
| 2.1.2 抗原特异性 | 第18页 |
| 2.1.3 抗原基本性质 | 第18-19页 |
| 2.1.4 抗原合成原理 | 第19-20页 |
| 2.1.5 半抗原-载体蛋白复合物制备方法 | 第20页 |
| 2.2 材料与方法 | 第20-21页 |
| 2.2.1 药品 | 第20-21页 |
| 2.2.2 试剂 | 第21页 |
| 2.2.3 仪器 | 第21页 |
| 2.3 试验方法与步骤 | 第21-23页 |
| 2.3.1 半抗原制备 | 第21-22页 |
| 2.3.2 人工抗原的合成 | 第22页 |
| 2.3.3 包被原的合成 | 第22页 |
| 2.3.4 产物的紫外分光鉴定 | 第22页 |
| 2.3.5 人工抗原和包被原的蛋白质含量测定 | 第22-23页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第23-24页 |
| 2.4.1 偶联物紫外光谱分析 | 第23页 |
| 2.4.2 偶联物蛋白质含量测定 | 第23-24页 |
| 2.5 本章小结 | 第24-25页 |
| 第三章 抗双氯芬酸多克隆抗体制备 | 第25-33页 |
| 3.1 引言 | 第25-27页 |
| 3.1.1 抗体结构 | 第25页 |
| 3.1.2 抗体分类 | 第25-26页 |
| 3.1.3 抗体产生机理及过程 | 第26-27页 |
| 3.1.4 抗血清效价的鉴定 | 第27页 |
| 3.1.8 抗体纯化 | 第27页 |
| 3.2 材料与方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 药品 | 第27-28页 |
| 3.2.2 试剂配制 | 第28页 |
| 3.2.3 仪器 | 第28-29页 |
| 3.3 试验方法与步骤 | 第29-31页 |
| 3.3.1 免疫方案 | 第29-30页 |
| 3.3.2 ELISA法测定抗体效价 | 第30页 |
| 3.3.3 抗体纯化 | 第30-31页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第31-32页 |
| 3.4.1 ELISA测定效价 | 第31页 |
| 3.4.2 抗体蛋白浓度 | 第31-32页 |
| 3.5 本章小结 | 第32-33页 |
| 第四章 间接竞争 ELISA（IC-ELISA）检测双氯芬酸 | 第33-44页 |
| 4.1 引言 | 第33-36页 |
| 4.1.1 ELISA的分类 | 第33-35页 |
| 4.1.2 ELISA的影响因素 | 第35页 |
| 4.1.3 ELISA的局限性 | 第35-36页 |
| 4.2 材料与方法 | 第36页 |
| 4.2.1 试剂 | 第36页 |
| 4.2.2 试剂配制 | 第36页 |
| 4.2.3 仪器 | 第36页 |
| 4.3 试验方法与步骤 | 第36-38页 |
| 4.3.1 ic-ELISA 的过程优化 | 第36-37页 |
| 4.3.2 间接竞争 ELISA 检测方法的标线建立 | 第37页 |
| 4.3.3 方法评价 | 第37-38页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第38-43页 |
| 4.4.1 ic-ELISA 的过程优化 | 第38-41页 |
| 4.4.2 间接竞争 ELISA 检测方法的标线建立 | 第41-42页 |
| 4.4.3 方法评价 | 第42-43页 |
| 4.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 第五章 生物素-亲和素系统标记 ELISA 法（BA-ELISA）检测双氯芬酸 | 第44-53页 |
| 5.1 引言 | 第44-46页 |
| 5.2 材料与方法 | 第46页 |
| 5.2.1 药品 | 第46页 |
| 5.2.2 试剂配制 | 第46页 |
| 5.2.3 仪器 | 第46页 |
| 5.3 试验方法与步骤 | 第46-48页 |
| 5.3.1 生物素化多克隆抗体的合成 | 第46-47页 |
| 5.3.3 BA- ELISA 方法的条件优化 | 第47页 |
| 5.3.4 BA- ELISA 方法标准曲线的建立 | 第47-48页 |
| 5.3.5 方法评价 | 第48页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第48-52页 |
| 5.4.1 BA-ELISA方法的条件优化 | 第48-51页 |
| 5.4.2 BA-ELISA方法的标准曲线建立 | 第51页 |
| 5.4.3 方法评价 | 第51-52页 |
| 5.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第六章 间接竞争实时免疫 PCR 法检测双氯芬酸 | 第53-63页 |
| 6.1 引言 | 第53-56页 |
| 6.1.1 PCR技术的原理、特点和在环境中的应用 | 第53-54页 |
| 6.1.2 免疫 PCR（IPCR）分析方法概述 | 第54页 |
| 6.1.3 实时荧光定量免疫 PCR（rt-IPCR）技术的特点与应用 | 第54-56页 |
| 6.2 材料与方法 | 第56-57页 |
| 6.2.1 药品 | 第56页 |
| 6.2.2 仪器 | 第56-57页 |
| 6.3 试验方法与步骤 | 第57-61页 |
| 6.3.1 间接竞争 rt-IPCR 法测定 DCF 的原理 | 第57页 |
| 6.3.2 生物素化 DNA 的合成与纯化 | 第57-60页 |
| 6.3.3 PCR管的戊二醛预处理 | 第60页 |
| 6.3.4 间接竞争 rt-IPCR 测定 DCF 方法的建立 | 第60-61页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第61-62页 |
| 6.4.1 生物素化 DNA 的合成与纯化 | 第61页 |
| 6.4.2 间接竞争 rt-IPCR 测定 DCF 方法的建立 | 第61-62页 |
| 6.5 本章小结 | 第62-63页 |
| 第七章 自来水样品中的双氯芬酸检测与三种免疫分析方法的方法评价 | 第63-69页 |
| 7.1 材料与方法 | 第63页 |
| 7.1.1 药品 | 第63页 |
| 7.1.2 仪器 | 第63页 |
| 7.2 试验方法与步骤 | 第63-65页 |
| 7.2.1 样品的采集 | 第63页 |
| 7.2.2 GC-MS检测样品中的双氯芬酸 | 第63-64页 |
| 7.2.3 ic-ELISA方法检测样品中的双氯芬酸 | 第64页 |
| 7.2.4 BA-ELISA方法检测样品中的双氯芬酸 | 第64页 |
| 7.2.5 rt-IPCR方法检测样品中的双氯芬酸 | 第64-65页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第65-68页 |
| 7.3.1 GC-MS检测样品中的双氯芬酸 | 第65-66页 |
| 7.3.2 ic-ELISA与 BA-ELISA 方法检测样品中的双氯芬酸及其加标回收率 | 第66-67页 |
| 7.3.3 rt-IPCR方法检测样品中的双氯芬酸及方法的重复性 | 第67-68页 |
| 7.4 本章小结 | 第68-69页 |
| 第八章 结论与展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第77页 |
