| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第17-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-43页 |
| 1.1 引言 | 第19-20页 |
| 1.2 抗体 | 第20-22页 |
| 1.3 单克隆抗体的分离纯化 | 第22-28页 |
| 1.3.1 层析法 | 第22-26页 |
| 1.3.2 非层析法 | 第26-28页 |
| 1.4 蛋白A替代配基 | 第28-32页 |
| 1.4.1 亲硫配基 | 第28页 |
| 1.4.2 疏水电荷诱导配基 | 第28-29页 |
| 1.4.3 混合模式配基 | 第29-30页 |
| 1.4.4 仿生配基 | 第30-32页 |
| 1.5 短肽仿生配基的设计和筛选 | 第32-40页 |
| 1.5.1 组合化学技术 | 第32-34页 |
| 1.5.2 噬菌体展示技术 | 第34-35页 |
| 1.5.3 mRNA展示技术 | 第35-36页 |
| 1.5.4 计算模拟辅助技术 | 第36-40页 |
| 1.6 本文研究思路 | 第40-43页 |
| 第二章 混合模式层析分离抗体 | 第43-71页 |
| 2.1 引言 | 第43页 |
| 2.2 材料和方法 | 第43-47页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第43-44页 |
| 2.2.2 静态吸附容量测定 | 第44页 |
| 2.2.3 pH梯度洗脱层析 | 第44-45页 |
| 2.2.4 pH阶跃洗脱层析 | 第45页 |
| 2.2.5 盐梯度洗脱层析 | 第45-46页 |
| 2.2.6 高盐上样淋洗层析 | 第46页 |
| 2.2.7 SEC-HPLC分析 | 第46页 |
| 2.2.8 非还原SDS-PAGE分析 | 第46-47页 |
| 2.2.9 ζ电位测定 | 第47页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第47-68页 |
| 2.3.1 pH调控 | 第47-61页 |
| 2.3.2 盐浓度调控 | 第61-68页 |
| 2.4 本章小结 | 第68-71页 |
| 第三章 DAAG配基-抗体相互作用的机制分析 | 第71-97页 |
| 3.1 引言 | 第71页 |
| 3.2 计算模拟方法 | 第71-75页 |
| 3.2.1 分子建模 | 第71-73页 |
| 3.2.2 分子对接 | 第73-74页 |
| 3.2.3 分子动力学模拟 | 第74-75页 |
| 3.2.4 相互作用能计算 | 第75页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第75-96页 |
| 3.3.1 混合模式配基与短肽配基的比较分析 | 第75-80页 |
| 3.3.2 DAAG结合位点的确定 | 第80-82页 |
| 3.3.3 DAAG结合机制分析 | 第82-90页 |
| 3.3.4 DAAG解离机制分析 | 第90-94页 |
| 3.3.5 配基作用模式分析 | 第94-96页 |
| 3.4 本章小结 | 第96-97页 |
| 第四章 四肽配基的理性设计与初步评价 | 第97-121页 |
| 4.1 引言 | 第97-98页 |
| 4.2 四肽配基库建立与筛选方法 | 第98-99页 |
| 4.2.1 四肽配基库建立 | 第98页 |
| 4.2.2 初步筛选 | 第98-99页 |
| 4.2.3 二次筛选 | 第99页 |
| 4.2.4 相互作用能分析 | 第99页 |
| 4.3 材料与方法 | 第99-104页 |
| 4.3.1 试剂与仪器 | 第99-100页 |
| 4.3.2 Bestarose 4FF氨基活化和氨基密度测定 | 第100-101页 |
| 4.3.3 短肽偶联和短肽密度测定 | 第101-103页 |
| 4.3.4 吸附等温线测定 | 第103页 |
| 4.3.5 蛋白混合物中分离IgG | 第103页 |
| 4.3.6 SEC-HPLC分析 | 第103页 |
| 4.3.7 非还原SDS-PAGE分析 | 第103-104页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第104-120页 |
| 4.4.1 四肽配基库的建立 | 第104-106页 |
| 4.4.2 初步筛选——柔性对接 | 第106-107页 |
| 4.4.3 二次筛选——分子动力学模拟 | 第107-109页 |
| 4.4.4 Fc片段与四肽配基的相互作用分析 | 第109-110页 |
| 4.4.5 四肽介质制备 | 第110-115页 |
| 4.4.6 吸附等温线 | 第115-118页 |
| 4.4.7 蛋白混合液中分离hIgG | 第118-120页 |
| 4.5 本章小结 | 第120-121页 |
| 第五章 新型四肽介质的抗体吸附和分离性能 | 第121-143页 |
| 5.1 引言 | 第121页 |
| 5.2 材料与方法 | 第121-125页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第121-122页 |
| 5.2.2 Bestarose 4FF氨基活化和氨基密度测定 | 第122页 |
| 5.2.3 四肽偶联和四肽密度测定 | 第122页 |
| 5.2.4 吸附等温线测定 | 第122-123页 |
| 5.2.5 吸附动力学测定 | 第123页 |
| 5.2.6 动态载量测定 | 第123-124页 |
| 5.2.7 牛乳清中分离IgG | 第124页 |
| 5.2.8 细胞培养上清液中分离单抗 | 第124页 |
| 5.2.9 抗体纯度和收率分析 | 第124-125页 |
| 5.2.10 非还原SDS-PAGE与还原SDS-PAGE分析 | 第125页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第125-140页 |
| 5.3.1 吸附等温线 | 第125-127页 |
| 5.3.2 吸附动力学 | 第127-130页 |
| 5.3.3 10%穿透的动态载量 | 第130-134页 |
| 5.3.4 牛乳清中分离IgG | 第134-137页 |
| 5.3.5 CHO细胞培养上清液中分离单抗 | 第137-140页 |
| 5.4 本章小结 | 第140-143页 |
| 第六章 总结和展望 | 第143-147页 |
| 6.1 总结 | 第143-145页 |
| 6.2 展望 | 第145-147页 |
| 参考文献 | 第147-161页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第161-162页 |
| 作者简介 | 第162页 |
