| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 研究背景 | 第8-15页 |
| 1.1 手足口病 | 第8页 |
| 1.2 病毒 | 第8-9页 |
| 1.3 病毒侵入细胞的机理 | 第9-10页 |
| 1.4 EV71肠道病毒 | 第10页 |
| 1.5 人肠道病毒EV71受体 | 第10-12页 |
| 1.6 EGCG | 第12页 |
| 1.7 EV71药物的研究进展及其意义 | 第12-13页 |
| 1.8 本研究目的、意义及其技术路线 | 第13-15页 |
| 第二章 EGCG-p的抗病毒效果 | 第15-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第15页 |
| 2.1.1 主要仪器及试剂 | 第15页 |
| 2.1.2 溶液配置 | 第15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-18页 |
| 2.2.1 细胞毒性试验 | 第15-16页 |
| 2.2.2 EV71病毒对细胞半数感染量(TCID50)测定 | 第16页 |
| 2.2.3 细胞和病毒的培养 | 第16页 |
| 2.2.4 RNA的提取 | 第16页 |
| 2.2.5 逆转录以获得EV71病毒cDNA | 第16-17页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR检测EV71 mRNA | 第17-18页 |
| 2.3 结果 | 第18-22页 |
| 2.3.1 细胞毒性试验分析 | 第18-19页 |
| 2.3.2 EV71病毒滴度 | 第19页 |
| 2.3.3 EGCG-p的抗病毒效果 | 第19-22页 |
| 2.4 讨论 | 第22-23页 |
| 第三章 目的蛋白的表达与纯化 | 第23-31页 |
| 3.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 3.1.1 主要仪器及试剂 | 第23页 |
| 3.1.2 溶液配置 | 第23-24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-31页 |
| 3.2.1 目的基因SCARB2的扩增 | 第24-25页 |
| 3.2.1.1 人RD细胞总RNA的提取 | 第24页 |
| 3.2.1.2 逆转录以获得cDNA | 第24-25页 |
| 3.2.1.3 聚合酶链式反应(PCR)反应体系,SCARB2的PCR扩增 | 第25页 |
| 3.2.1.4 DNA的片段电泳回收 | 第25页 |
| 3.2.2 pET28a-SCARB2质粒的构建 | 第25-27页 |
| 3.2.3 SCARB2的过表达 | 第27页 |
| 3.2.4 SCARB2蛋白纯化 | 第27-28页 |
| 3.2.5 SCARB2蛋白表达纯化实验结果 | 第28-29页 |
| 3.2.6 蛋白浓度的测定 | 第29-31页 |
| 第四章 SCARB2与EGCG-p、VP1的分子相互作用研究 | 第31-38页 |
| 4.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 4.1.1 试剂溶液 | 第31页 |
| 4.1.2 溶液 | 第31-32页 |
| 4.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 4.2.1 SCARB2受体与VP1亲和力测定 | 第32-33页 |
| 4.2.2 SCARB2受体与EGCG-p亲和力测定 | 第33页 |
| 4.2.3 SCARB2+EGCG-p与VP1亲和力测定 | 第33-35页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第35-38页 |
| 4.3.1 SCARB2受体与VP1的相互作用 | 第35-36页 |
| 4.3.2 SCARB2受体与EGCG-p相互作用 | 第36-37页 |
| 4.3.3 SCARB2+EGCG-p与VP1的相互作用 | 第37-38页 |
| 第五章 讨论与总结 | 第38-40页 |
| 5.1 讨论 | 第38页 |
| 5.2 主要结论 | 第38-39页 |
| 5.3 创新点 | 第39页 |
| 5.4 不足与展望 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 附图 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
