| 摘要 | 第2-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 一、实验材料和方法 | 第11-30页 |
| 1 实验材料 | 第11-15页 |
| 2 实验动物 | 第15-16页 |
| 3 实验方法 | 第16-30页 |
| 3.1 miRNA表达芯片 | 第16-21页 |
| 3.1.1 Ⅱ型糖尿病模型BKS-db/db小鼠三叉神经节标本的收集及标记 | 第16-17页 |
| 3.1.2 Total RNA的提取（Trizol法） | 第17页 |
| 3.1.3 Total RNA质控信息 | 第17页 |
| 3.1.4 Total RNA的纯化 | 第17-18页 |
| 3.1.5 cDNA合成 | 第18页 |
| 3.1.6 荧光标记cDNA合成 | 第18-19页 |
| 3.1.7 cDNA样品片断化和芯片杂交 | 第19页 |
| 3.1.8 芯片洗涤 | 第19-20页 |
| 3.1.9 芯片扫描 | 第20页 |
| 3.1.10 芯片生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 3.1.11 RT-PCR验证实验 | 第21页 |
| 3.2 三叉神经节细胞原代培养及处理 | 第21-25页 |
| 3.3 角膜神经染色 | 第25页 |
| 3.4 免疫荧光 | 第25-26页 |
| 3.5 western blot | 第26-29页 |
| 3.6 角膜损伤修复模型的建立 | 第29页 |
| 3.7 统计学分析 | 第29-30页 |
| 二、结果 | 第30-44页 |
| 1. Sirt1在BKS-db/db小鼠三叉神经节中表达下调 | 第30-31页 |
| 2. 高糖条件下Sirt1调节miRNA-182的表达 | 第31-34页 |
| 3. miRNA-182促进BKS-db/db小鼠三叉神经节神经元细胞的生长 | 第34页 |
| 4. miRNA-182在BKS-db/db小鼠三叉神经节神经元细胞内表达 | 第34-35页 |
| 5. miRNA-182促进BKS-db/db小鼠角膜上皮损伤修复及神经再生 | 第35-37页 |
| 6. miRNA-182直接调控其靶基因NOX4的表达 | 第37-39页 |
| 7. NOX4在BKS-db/db小鼠三叉神经节的神经元中表达上调 | 第39-41页 |
| 8. miRNA-182通过调节其靶基因NOX4在BKS-db/db小鼠角膜神经再生中发挥作用 | 第41-44页 |
| 三、讨论 | 第44-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 综述 | 第54-64页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
