| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略语中英文对照 | 第10-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-21页 |
| 1.1 鱼类色素细胞 | 第15-17页 |
| 1.2 鱼类体色变异的分子遗传学机制 | 第17-21页 |
| 1.2.1 黑色素合成通路 | 第17-18页 |
| 1.2.2 体色相关基因的研究进展 | 第18-21页 |
| 第二章 mitfa基因的cDNA克隆与组织表达定位 | 第21-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 黄河鲤材料 | 第21页 |
| 2.1.2 实验设计 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第23-25页 |
| 2.2.2 黄河鲤总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 黄河鲤第一链cDNA的合成及中间片段扩增 | 第26-28页 |
| 2.2.4 黄河鲤mitfa基因的 3' RACE | 第28-30页 |
| 2.2.5 黄河鲤mitfa基因的 5' RACE | 第30页 |
| 2.2.6 PCR扩增产物的回收与纯化 | 第30-31页 |
| 2.2.7 胶回收产物与pMD-19T载体连接 | 第31-32页 |
| 2.2.8 胶回收产物的转化和阳性克隆的检测 | 第32-33页 |
| 2.2.9 序列拼接和分析 | 第33页 |
| 2.2.10 黄河鲤Mitfa蛋白的表达定位 | 第33-34页 |
| 2.2.11 黄河鲤各组织mitfa基因的表达分析 | 第34-36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-44页 |
| 2.3.1 黄河鲤黑色皮肤RNA的提取 | 第36-37页 |
| 2.3.2 黄河鲤mitfa基因中间片段的克隆 | 第37页 |
| 2.3.3 黄河鲤mitfa基因 3' 端扩增 | 第37-38页 |
| 2.3.4 黄河鲤mitfa基因 5' 端扩增 | 第38页 |
| 2.3.5 黄河鲤mitfa基因的拼接及序列分析 | 第38-40页 |
| 2.3.6 黄河鲤Mitfa同源性和系统发生分析 | 第40-42页 |
| 2.3.7 黄河黑色皮肤和银色皮肤Mitfa蛋白的表达定位 | 第42-43页 |
| 2.3.8 黄河鲤mitfa基因组织特异性表达 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 黄河鲤tyr基因的cDNA克隆和组织表达定位 | 第47-61页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 黄河鲤材料 | 第47页 |
| 3.1.2 实验设计 | 第47-48页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第48页 |
| 3.1.4 实验试剂 | 第48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第48-49页 |
| 3.2.2 黄河鲤总RNA的提取 | 第49页 |
| 3.2.3 黄河鲤第一链cDNA的合成及中间片段扩增 | 第49页 |
| 3.2.4 黄河鲤tyr基因的 3' RACE | 第49-50页 |
| 3.2.5 黄河鲤tyr基因的 5' RACE | 第50页 |
| 3.2.6 PCR扩增产物的回收与纯化 | 第50页 |
| 3.2.7 胶回收产物与pMD-19T载体连接 | 第50页 |
| 3.2.8 胶回收产物的转化及阳性克隆的检测 | 第50页 |
| 3.2.9 序列拼接和分析 | 第50页 |
| 3.2.10 黄河鲤皮肤组织中Tyr的表达定位 | 第50-51页 |
| 3.2.11 黄河鲤各组织中tyr的表达分析 | 第51页 |
| 3.3 结果 | 第51-58页 |
| 3.3.1 黄河鲤黑色皮肤总RNA的提取 | 第51页 |
| 3.3.2 黄河鲤tyr基因中间片段的克隆 | 第51页 |
| 3.3.3 黄河鲤tyr基因 3' 端扩增 | 第51-52页 |
| 3.3.4 黄河鲤tyr基因 5' 端扩增 | 第52页 |
| 3.3.5 黄河鲤tyr基因的拼接及序列分析 | 第52-54页 |
| 3.3.6 黄河鲤Tyr的同源和系统发生分析 | 第54-56页 |
| 3.3.7 黄河皮肤组织Tyr蛋白的表达定位 | 第56-57页 |
| 3.3.8 黄河鲤tyr基因的组织特异性表达 | 第57-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-61页 |
| 第四章 mitfa及tyr在黄河鲤体色发生阶段中的表达分析 | 第61-69页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第61-62页 |
| 4.1.1 实验鱼 | 第61页 |
| 4.1.2 黄河鲤体色发生观察和样品采集 | 第61页 |
| 4.1.3 黄河鲤鳞片及鳍条色素细胞观察 | 第61页 |
| 4.1.4 黄河鲤体色发生阶段样品总RNA的提取 | 第61-62页 |
| 4.1.5 第一链cDNA的合成 | 第62页 |
| 4.1.6 黄河鲤胚胎发育时期mitfa、tyr表达差异分析 | 第62页 |
| 4.2 实验结果 | 第62-65页 |
| 4.2.1 黄河鲤体色发生观察 | 第62-63页 |
| 4.2.3 黄河鲤背部鳞片、腹部鳞片及鳍条色素细胞的观察 | 第63-64页 |
| 4.2.4 mitfa和tyr基因在黄河鲤体色形成中的表达 | 第64-65页 |
| 4.3 讨论 | 第65-69页 |
| 4.3.1 黄河鲤不同发育阶段的体色发生观察 | 第65-66页 |
| 4.3.2 mitfa和tyr基因在体色形成过程中的表达差异 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第77-79页 |
| 附录 1. 实验所用其他试剂的配置方法 | 第79-80页 |
