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棉花新型锌指蛋白GhBCL功能鉴定

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-26页
    1.1 种子萌发第12-14页
        1.1.1 影响种子萌发的内在条件第12页
        1.1.2 影响种子萌发的外在条件第12-14页
            1.1.2.1 水分第12-13页
            1.1.2.2 温度第13页
            1.1.2.3 氧气第13页
            1.1.2.4 光照第13-14页
            1.1.2.5 盐浓度第14页
    1.2 激素调控的种子休眠与萌发第14-23页
        1.2.1 ABA调控种子休眠与萌发第14-16页
        1.2.2 GA调控种子休眠与萌发第16-19页
        1.2.3 其它激素调控种子休眠与萌发第19-20页
            1.2.3.1 乙烯调控种子休眠与萌发第19-20页
            1.2.3.2 茉莉酸调控种子休眠与萌发第20页
            1.2.3.3 生长素调控种子休眠与萌发第20页
        1.2.4 种子休眠与萌发过程中的激素调控网络第20-23页
    1.3 B-box和C4型锌指蛋白研究进展第23-25页
    1.4 本实验的目的与意义第25-26页
2 材料与方法第26-43页
    2.1 实验材料第26-28页
        2.1.1 植物材料第26页
        2.1.2 菌株和质粒第26页
        2.1.3 酶及生化试剂第26页
        2.1.4 实验相关引物第26-28页
    2.2 实验方法第28-43页
        2.2.1 拟南芥基因组DNA提取第28页
        2.2.2 棉花基因组DNA提取第28页
        2.2.3 植物总RNA提取和纯化第28-32页
            2.2.3.1 TRIzol法提取拟南芥RNA第28-29页
            2.2.3.2 试剂盒法提取植物总RNA第29-30页
            2.2.3.3 棉花总RNA的提取(大提法)第30-31页
            2.2.3.4 RNA质量检测第31页
            2.2.3.5 RNA的浓度测定及纯化第31页
            2.2.3.6 RNA的试剂盒法反转录第31-32页
        2.2.4 半定量RT-PCR第32页
        2.2.5 实时荧光定量PCR第32-33页
        2.2.6 超表达载体的构建第33-37页
            2.2.6.1 目的基因PCR扩增第33页
            2.2.6.2 琼脂糖凝胶电泳及回收第33-34页
            2.2.6.3 目的片段连接反应第34-35页
            2.2.6.4 大肠杆菌感受态制备及转化第35页
            2.2.6.5 大肠杆菌质粒提取第35-37页
            2.2.6.6 农杆菌感受态制备及转化第37页
        2.2.7 拟南芥转化及转基因鉴定第37-38页
            2.2.7.1 拟南芥的转化第37-38页
            2.2.7.2 转基因拟南芥的鉴定第38页
        2.2.8 烟草瞬时转化第38-39页
        2.2.9 双荧光素酶报告系统第39-40页
        2.2.10 酵母感受态制备与转化第40-41页
        2.2.11 同源性分析方法第41-43页
            2.2.11.1 用Clustal比对蛋白序列第41页
            2.2.11.2 用Mega4构建进化树第41-43页
3 结果与分析第43-57页
    3.1 棉花盐诱导基因的表达验证第43页
    3.2 GhBCL聚类分析第43-45页
    3.3 GhBCL表达模式分析第45-46页
    3.4 GhBCL亚细胞定位分析第46页
    3.5 GhBCL转录活性分析第46-47页
    3.6 非生物胁迫下GhBCL的功能鉴定第47-51页
        3.6.1 GhBCL超表达株系萌发期对盐胁迫的响应第47-49页
        3.6.2 GhBCL超表达株系萌发期对渗透胁迫的响应第49页
        3.6.3 GhBCL超表达株系萌发期对LiCl的响应第49-51页
    3.7 GhBCL调控拟南芥种子萌发的激素响应第51-55页
        3.7.1 GhBCL超表达株系萌发期对ABA的响应第51-52页
        3.7.2 GhBCL超表达株系萌发期对赤霉素合成抑制剂PAC的响应第52页
        3.7.3 GhBCL通过调控GA信号参与盐胁迫响应第52-54页
        3.7.4 ACC对盐胁迫下超表达株系的作用第54-55页
    3.8 GhBCL间接调控ABI4的表达第55-57页
4 讨论第57-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-69页
致谢第69-70页
攻读学位期间发表论文情况第70页

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