符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-26页 |
1.1 种子萌发 | 第12-14页 |
1.1.1 影响种子萌发的内在条件 | 第12页 |
1.1.2 影响种子萌发的外在条件 | 第12-14页 |
1.1.2.1 水分 | 第12-13页 |
1.1.2.2 温度 | 第13页 |
1.1.2.3 氧气 | 第13页 |
1.1.2.4 光照 | 第13-14页 |
1.1.2.5 盐浓度 | 第14页 |
1.2 激素调控的种子休眠与萌发 | 第14-23页 |
1.2.1 ABA调控种子休眠与萌发 | 第14-16页 |
1.2.2 GA调控种子休眠与萌发 | 第16-19页 |
1.2.3 其它激素调控种子休眠与萌发 | 第19-20页 |
1.2.3.1 乙烯调控种子休眠与萌发 | 第19-20页 |
1.2.3.2 茉莉酸调控种子休眠与萌发 | 第20页 |
1.2.3.3 生长素调控种子休眠与萌发 | 第20页 |
1.2.4 种子休眠与萌发过程中的激素调控网络 | 第20-23页 |
1.3 B-box和C4型锌指蛋白研究进展 | 第23-25页 |
1.4 本实验的目的与意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-43页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第26页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第26页 |
2.1.3 酶及生化试剂 | 第26页 |
2.1.4 实验相关引物 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-43页 |
2.2.1 拟南芥基因组DNA提取 | 第28页 |
2.2.2 棉花基因组DNA提取 | 第28页 |
2.2.3 植物总RNA提取和纯化 | 第28-32页 |
2.2.3.1 TRIzol法提取拟南芥RNA | 第28-29页 |
2.2.3.2 试剂盒法提取植物总RNA | 第29-30页 |
2.2.3.3 棉花总RNA的提取(大提法) | 第30-31页 |
2.2.3.4 RNA质量检测 | 第31页 |
2.2.3.5 RNA的浓度测定及纯化 | 第31页 |
2.2.3.6 RNA的试剂盒法反转录 | 第31-32页 |
2.2.4 半定量RT-PCR | 第32页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
2.2.6 超表达载体的构建 | 第33-37页 |
2.2.6.1 目的基因PCR扩增 | 第33页 |
2.2.6.2 琼脂糖凝胶电泳及回收 | 第33-34页 |
2.2.6.3 目的片段连接反应 | 第34-35页 |
2.2.6.4 大肠杆菌感受态制备及转化 | 第35页 |
2.2.6.5 大肠杆菌质粒提取 | 第35-37页 |
2.2.6.6 农杆菌感受态制备及转化 | 第37页 |
2.2.7 拟南芥转化及转基因鉴定 | 第37-38页 |
2.2.7.1 拟南芥的转化 | 第37-38页 |
2.2.7.2 转基因拟南芥的鉴定 | 第38页 |
2.2.8 烟草瞬时转化 | 第38-39页 |
2.2.9 双荧光素酶报告系统 | 第39-40页 |
2.2.10 酵母感受态制备与转化 | 第40-41页 |
2.2.11 同源性分析方法 | 第41-43页 |
2.2.11.1 用Clustal比对蛋白序列 | 第41页 |
2.2.11.2 用Mega4构建进化树 | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-57页 |
3.1 棉花盐诱导基因的表达验证 | 第43页 |
3.2 GhBCL聚类分析 | 第43-45页 |
3.3 GhBCL表达模式分析 | 第45-46页 |
3.4 GhBCL亚细胞定位分析 | 第46页 |
3.5 GhBCL转录活性分析 | 第46-47页 |
3.6 非生物胁迫下GhBCL的功能鉴定 | 第47-51页 |
3.6.1 GhBCL超表达株系萌发期对盐胁迫的响应 | 第47-49页 |
3.6.2 GhBCL超表达株系萌发期对渗透胁迫的响应 | 第49页 |
3.6.3 GhBCL超表达株系萌发期对LiCl的响应 | 第49-51页 |
3.7 GhBCL调控拟南芥种子萌发的激素响应 | 第51-55页 |
3.7.1 GhBCL超表达株系萌发期对ABA的响应 | 第51-52页 |
3.7.2 GhBCL超表达株系萌发期对赤霉素合成抑制剂PAC的响应 | 第52页 |
3.7.3 GhBCL通过调控GA信号参与盐胁迫响应 | 第52-54页 |
3.7.4 ACC对盐胁迫下超表达株系的作用 | 第54-55页 |
3.8 GhBCL间接调控ABI4的表达 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第70页 |