中文摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第10-24页 |
1.1 病原 | 第11-14页 |
1.1.1 分类 | 第11页 |
1.1.2 形态和结构 | 第11-12页 |
1.1.3 理化特性 | 第12页 |
1.1.4 禽流感病毒的基因及其表达蛋白 | 第12-14页 |
1.2 禽流感病毒的流行状况 | 第14-15页 |
1.3 禽流感的临诊症状和病理变化 | 第15页 |
1.3.1 临诊症状 | 第15页 |
1.3.2 病理变化 | 第15页 |
1.4 禽流感的诊断 | 第15-17页 |
1.4.1 病原分离 | 第15-16页 |
1.4.2 血清学诊断 | 第16-17页 |
1.4.3 基因诊断 | 第17页 |
1.5 禽流感疫苗的研究进展 | 第17-20页 |
1.5.1 禽流感灭活苗 | 第18页 |
1.5.2 减毒活疫苗 | 第18-19页 |
1.5.3 基因重组活载体疫苗 | 第19页 |
1.5.4 DNA疫苗 | 第19页 |
1.5.5 反向遗传疫苗 | 第19-20页 |
1.5.6 基因工程亚单位疫苗 | 第20页 |
1.6 病毒样颗粒概述 | 第20-23页 |
1.6.1 VLPs的来源于发展 | 第21页 |
1.6.2 VLPs的表达系统 | 第21-22页 |
1.6.3 VLP的形成过程 | 第22-23页 |
1.6.4 VLP疫苗面临的挑战 | 第23页 |
1.7 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-34页 |
2.1 材料 | 第24-26页 |
2.1.1 病毒与细胞 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第24页 |
2.1.3 引物设计与合成 | 第24-25页 |
2.1.4 试剂配制 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-34页 |
2.2.1 HA、NA、M1基因的克隆 | 第26-30页 |
2.2.2 重组转移载体 pFBD-HA-NA-M1 的构建 | 第30-31页 |
2.2.3 重组杆状病毒穿梭质粒的构建 | 第31-33页 |
2.2.4 重组杆状病毒的包装 | 第33-34页 |
2.2.5 P3代病毒株的PCR鉴定 | 第34页 |
2.2.6 重组蛋白的Western-blot的检测 | 第34页 |
2.2.7 血凝试验 | 第34页 |
2.2.8 电镜观察 | 第34页 |
3 结果 | 第34-39页 |
3.1 重组质粒pFBD-HA-NA-M1的鉴定结果 | 第34-36页 |
3.1.1 HA、NA、M1基因的扩增结果 | 第34-35页 |
3.1.2 重组质粒p FBD-HA-NA-M1的酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
3.2 重组杆状病毒质粒的PCR鉴定结果 | 第36页 |
3.3 重组杆状病毒对Sf21细胞的作用 | 第36-37页 |
3.4 重组蛋白的血凝滴度 | 第37页 |
3.5 Western-blot检测结果 | 第37页 |
3.6 VLPs电镜观察 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第51页 |