| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第14-27页 |
| 1.1 引言 | 第14页 |
| 1.2 Bt毒素及转Bt棉花种植情况 | 第14-16页 |
| 1.3 Bt毒素作用机理 | 第16页 |
| 1.4 昆虫对Bt毒素的抗性机制 | 第16-19页 |
| 1.4.1 中肠蛋白酶活化毒素的改变 | 第17页 |
| 1.4.2 酯酶或糖脂螯合毒素及免疫反应的增强 | 第17-18页 |
| 1.4.3 中肠受体蛋白的变异 | 第18-19页 |
| 1.5 ATP酶及其与Bt抗性的关系 | 第19-24页 |
| 1.5.1 定义，类型，分布和生理功能 | 第19-20页 |
| 1.5.2 V-ATP酶的结构和组装 | 第20-22页 |
| 1.5.3 活性调节机制 | 第22-24页 |
| 1.5.4 ATP酶与Bt抗性 | 第24页 |
| 1.6 iTRAQ技术的应用和研究进展 | 第24-26页 |
| 1.7 本实验的目的与意义 | 第26-27页 |
| 第二章 棉铃虫V-ATP酶A亚基的基因克隆 | 第27-37页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-31页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第27-28页 |
| 2.1.2 供试试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 供试仪器 | 第28页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第28-29页 |
| 2.1.5 技术路线 | 第29页 |
| 2.1.6 主要方法 | 第29-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-35页 |
| 2.2.1 棉铃虫V-ATP酶A亚基基因的克隆与序列分析 | 第31-33页 |
| 2.2.2 氨基酸序列同源性分析和系统进化树 | 第33-35页 |
| 2.3 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 棉铃虫V-ATP酶A亚基基因表达谱分析 | 第37-43页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-39页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第37页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第37页 |
| 3.1.3 供试试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.4 技术路线 | 第38页 |
| 3.1.5 主要方法 | 第38-39页 |
| 3.1.6 数据分析 | 第39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-41页 |
| 3.2.1 棉铃虫不同发育期V-ATP酶A亚基的表达量 | 第39-40页 |
| 3.2.2 棉铃虫幼虫不同组织中V-ATP酶A亚基的表达量 | 第40-41页 |
| 3.2.3 棉铃虫4龄幼虫取食不同浓度的Bt毒素后中肠V-ATP酶A亚基的表达量变化 | 第41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 棉铃虫V-ATP酶A亚基基因的原核表达及Ligant blot分析 | 第43-53页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43-48页 |
| 4.1.1 供试昆虫 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 4.1.4 试剂的配制 | 第44-45页 |
| 4.1.5 技术路线 | 第45-46页 |
| 4.1.6 主要方法 | 第46-48页 |
| 4.2 结果与分析 | 第48-52页 |
| 4.2.1 棉铃虫V-ATP酶A亚基的克隆与表达载体的构建 | 第48-50页 |
| 4.2.2 棉铃虫V-ATP酶A亚基的诱导表达 | 第50页 |
| 4.2.3 Western blot分析 | 第50-51页 |
| 4.2.4 棉铃虫中肠BBMV中V-ATP酶A亚基蛋白的表达 | 第51页 |
| 4.2.5 Ligand blot分析 | 第51-52页 |
| 4.3 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 V-ATP酶A亚基在抗感品系棉铃虫中的差异比较 | 第53-62页 |
| 5.1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 5.1.1 供试昆虫 | 第53页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第53页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第53-54页 |
| 5.1.4 技术路线 | 第54页 |
| 5.1.5 主要方法 | 第54页 |
| 5.1.6 数据分析 | 第54-55页 |
| 5.2 结果与分析 | 第55-61页 |
| 5.2.1 抗感品系棉铃虫中V-ATP酶A亚基基因核苷酸序列的差异 | 第55-58页 |
| 5.2.2 抗感品系棉铃虫中V-ATP酶A亚基氨基酸序列差异分析 | 第58-59页 |
| 5.2.3 抗感品系棉铃虫中V-ATP酶A亚基在mRNA水平上的表达量差异 | 第59-60页 |
| 5.2.4 抗感品系棉铃虫中V-ATP酶A亚基在蛋白水平上的表达量差异 | 第60-61页 |
| 5.3 讨论 | 第61-62页 |
| 第六章 RNAi介导的棉铃虫V-ATP酶A亚基基因沉默对Cry1Ac的影响 | 第62-69页 |
| 6.1 材料与方法 | 第62-65页 |
| 6.1.1 供试昆虫 | 第62-63页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第63页 |
| 6.1.3 主要仪器设备 | 第63页 |
| 6.1.4 技术路线 | 第63页 |
| 6.1.5 主要方法 | 第63-65页 |
| 6.1.7 数据处理与分析 | 第65页 |
| 6.2 结果与分析 | 第65-67页 |
| 6.2.1 RNAi基因沉默效率的检测 | 第65-66页 |
| 6.2.2 V-ATP酶A亚基基因沉默对Cry1Ac毒力的影响 | 第66-67页 |
| 6.3 讨论 | 第67-69页 |
| 第七章 全文结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简历 | 第82页 |
