| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 激发子概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 过敏蛋白 | 第13-14页 |
| 1.1.2 几丁质 | 第14页 |
| 1.1.3 鞭毛蛋白 | 第14页 |
| 1.2 植物的免疫系统 | 第14-15页 |
| 1.3 激发子受体的研究现状 | 第15-17页 |
| 1.3.1 细菌鞭毛蛋白受体FLS2 | 第16页 |
| 1.3.2 细菌转录延伸因子受体EFR | 第16页 |
| 1.3.3 其它受体 | 第16-17页 |
| 1.4 研究蛋白互作方法 | 第17-18页 |
| 1.4.1 体内蛋白互作 | 第17页 |
| 1.4.2 体外蛋白互作 | 第17-18页 |
| 1.5 Hrip1研究背景 | 第18页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 Hrip1的真核表达与纯化 | 第19-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物、菌株和质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂和仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 Hrip1真核表达载体的构建 | 第19-21页 |
| 2.2.2 毕赤酵母感受态的制备、转化 | 第21-22页 |
| 2.2.3 Hrip1的真核表达 | 第22页 |
| 2.2.4 Hrip1的纯化 | 第22页 |
| 2.2.5 蛋白浓度的测定 | 第22-23页 |
| 2.2.6 Hrip1的Western-blotting鉴定 | 第23页 |
| 2.2.7 真核表达Hrip1的活性检测 | 第23页 |
| 2.3 实验结果 | 第23-27页 |
| 2.3.1 Hrip1真核表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.3.2 重组蛋白的表达和纯化 | 第25-26页 |
| 2.3.3 重组蛋白的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.4 重组蛋白的生物活性检测 | 第27页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 Hrip1诱导水稻抗病性 | 第29-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.1.1 植物和菌株 | 第29页 |
| 3.1.2 实验试剂和仪器 | 第29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 3.2.1 稻瘟菌孢子制作 | 第29页 |
| 3.2.2 Hrip1诱导水稻抗病性 | 第29-30页 |
| 3.2.3 Hrip1处理后水稻水杨酸含量测定 | 第30页 |
| 3.2.4 Hrip1处理后水稻防御酶活性测定 | 第30-31页 |
| 3.3 实验结果 | 第31-35页 |
| 3.3.1 Hrip1诱导水稻抗病性 | 第31-32页 |
| 3.3.2 水杨酸含量的测定 | 第32-33页 |
| 3.3.3 防御相关酶活性的测定 | 第33-35页 |
| 3.4 小结与分析 | 第35-36页 |
| 第四章 Hrip1水稻互作蛋白的筛选 | 第36-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第36页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第36页 |
| 4.1.2 实验试剂和耗材 | 第36页 |
| 4.1.3 培养基与试剂配方 | 第36页 |
| 4.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 4.2.1 诱饵载体的构建 | 第36-38页 |
| 4.2.2 诱饵载体转化酵母细胞 | 第38页 |
| 4.2.3 诱饵载体自激活鉴定 | 第38-39页 |
| 4.2.4 水稻文库筛选 | 第39页 |
| 4.2.5 阳性克隆的确定 | 第39页 |
| 4.3 实验结果 | 第39-42页 |
| 4.3.1 诱饵载体pDBleu-Hrip的构建 | 第39-40页 |
| 4.3.2 诱饵载体的自激活检测 | 第40-41页 |
| 4.3.3 水稻cDNA文库的筛选 | 第41-42页 |
| 4.4 小结与分析 | 第42-43页 |
| 第五章 互作蛋白的基因克隆、原核表达和体外互作验证 | 第43-51页 |
| 5.1 实验材料 | 第43页 |
| 5.1.1 菌株、质粒和植物 | 第43页 |
| 5.1.2 实验试剂和仪器 | 第43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 5.2.1 互作蛋白的基因克隆 | 第43-45页 |
| 5.2.2 互作蛋白原核表达载体的构建 | 第45页 |
| 5.2.3 互作蛋白的原核表达 | 第45-46页 |
| 5.2.4 GST pull-down实验 | 第46页 |
| 5.3 实验结果 | 第46-50页 |
| 5.3.1 互作蛋白基因的克隆 | 第46-47页 |
| 5.3.2 互作蛋白原核表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 5.3.3 互作蛋白的原核表达与纯化 | 第48-49页 |
| 5.3.4 GST pull-down体外验证蛋白互作 | 第49-50页 |
| 5.4 小结与分析 | 第50-51页 |
| 第六章 互作蛋白水稻突变体植株的获得 | 第51-61页 |
| 6.1 实验材料 | 第51页 |
| 6.1.1 植物、菌株和载体 | 第51页 |
| 6.1.2 试剂和仪器 | 第51页 |
| 6.1.3 培养基与试剂配制 | 第51页 |
| 6.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 6.2.1 靶位点的选择 | 第51-52页 |
| 6.2.2 CRISPR/Cas9载体的构建 | 第52-53页 |
| 6.2.3 水稻的遗传转化 | 第53-54页 |
| 6.2.4 转基因植株的检测 | 第54-55页 |
| 6.3 实验结果 | 第55-59页 |
| 6.3.1 靶位点的设计 | 第55-56页 |
| 6.3.2 CRISPR/Cas9重组载体的构建 | 第56-57页 |
| 6.3.3 水稻的遗传转化和鉴定 | 第57-58页 |
| 6.3.4 转基因水稻的基因编辑分析 | 第58-59页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第七章 全文结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
