摘要 | 第7-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
第一部分 干扰CXCR7在抑制鼻咽癌转移侵袭的作用 | 第15-39页 |
前言 | 第15-17页 |
1 实验材料与仪器 | 第17-22页 |
1.1 临床标本 | 第17页 |
1.2 细胞株 | 第17页 |
1.3 慢病毒载体 | 第17-18页 |
1.4 实验仪器 | 第18页 |
1.5 主要试剂 | 第18-19页 |
1.6 抗体 | 第19-20页 |
1.7 试剂配置 | 第20-22页 |
2 实验方法 | 第22-29页 |
2.1 CXCR7在鼻咽癌组织中的表达及其与临床分期的相关性研究 | 第22页 |
2.2 CNE2细胞复苏、培养、传代和冻存 | 第22-23页 |
2.3 慢病毒载体的构建、感染与阳性细胞筛选 | 第23-25页 |
2.4 Western blot检测各组细胞中CXCR7蛋白的表达 | 第25-27页 |
2.5 MTT法检测各组细胞的增殖能力 | 第27页 |
2.6 Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力 | 第27-28页 |
2.7 Western blot检测各组细胞中AKT、P-AKT、MMP7蛋白的表达 | 第28页 |
2.8 统计学分析 | 第28-29页 |
3 实验结果 | 第29-35页 |
3.1 CXCR7高表达于鼻咽癌组织 | 第29页 |
3.2 CXCR7与鼻咽癌的临床分期及预后效果显著相关 | 第29-30页 |
3.3 慢病毒载体的测序鉴定 | 第30-31页 |
3.4 慢病毒载体感染人鼻咽癌CNE2细胞的鉴定 | 第31页 |
3.5 CXCR7-shRNA慢病毒载体对鼻咽癌细胞中CXCR7蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
3.6 CXCR7-shRNA对鼻咽癌生长的抑制作用 | 第32-33页 |
3.7 CXCR7-shRNA对鼻咽癌侵袭能力的影响 | 第33页 |
3.8 CXCR7-shRNA对鼻咽癌AKT、P-AKT以及MMP7蛋白的表达的影响 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
第二部分 白花丹醌通过ROS抑制鼻咽癌增殖的作用机制 | 第39-58页 |
前言 | 第39-41页 |
1 实验材料与仪器 | 第41-44页 |
1.1 细胞株 | 第41页 |
1.2 实验药物 | 第41页 |
1.3 实验仪器 | 第41-42页 |
1.4 主要试剂 | 第42-43页 |
1.5 抗体 | 第43页 |
1.6 试剂配置 | 第43-44页 |
2 实验方法 | 第44-48页 |
2.1 6-10B细胞的培养 | 第44页 |
2.2 MTT法检测白花丹醌对 6-10B细胞的增殖抑制作用 | 第44页 |
2.3 DCFH-DA探针法检测白花丹醌对 6-10B细胞ROS生成的影响 | 第44-45页 |
2.4 DCFH-DA探针法检测活性氧清除剂NAC对白花丹醌诱导 6-10B细胞ROS生成的影响 | 第45页 |
2.5 MTT法检测活性氧清除剂NAC在白花丹醌抑制鼻咽癌细胞增殖中的作用 | 第45页 |
2.6 流式细胞术检测白花丹醌、ROS对 6-10B细胞周期的影响 | 第45-46页 |
2.7 Western blot检测白花丹醌、ROS对 6-10B细胞周期相关蛋白、P-GSK3β(ser9)以及核内转录因子STAT3总蛋白及其磷酸化的表达的影响 | 第46-47页 |
2.8 统计学分析 | 第47-48页 |
3 实验结果 | 第48-54页 |
3.1 白花丹醌抑制鼻咽癌 6-10B细胞的增殖 | 第48页 |
3.2 白花丹醌使 6-10B细胞内ROS含量升高 | 第48-49页 |
3.3 NAC处理可降低白花丹醌对 6-10B细胞ROS的诱导作用 | 第49页 |
3.4 NAC削弱白花丹醌对鼻咽癌增殖的抑制作用 | 第49-50页 |
3.5 ROS在白花丹醌阻滞鼻咽癌细胞周期中具有重要的作用 | 第50-51页 |
3.6 白花丹醌通过ROS调控周期蛋白Aurora A、Confilin及其磷酸化 | 第51-52页 |
3.7 白花丹醌通过ROS调控GSK3β /STAT3信号 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
文献综述 | 第64-77页 |
参考文献 | 第73-77页 |
附录 | 第77-78页 |
攻读硕士期间的研究成果 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |