| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分 TCF-4基因过表达及干扰载体的构建 | 第14-22页 |
| 1 材料 | 第14-15页 |
| 1.1 实验仪器设备 | 第14页 |
| 1.2 试验材料 | 第14-15页 |
| 1.3 主要试剂和耗材 | 第15页 |
| 2 方法 | 第15-20页 |
| 2.1 大肠干菌感受态细胞的制备 | 第15-16页 |
| 2.2 TCF-4基因的获取 | 第16页 |
| 2.3逆转录PCR (reverse transcription-PCR, RT-PCR) | 第16-17页 |
| 2.4 CMV启动子、polyA片段、CAG启动子的获得 | 第17页 |
| 2.5 TCF-4基因过表达载体组装 | 第17-18页 |
| 2.6 TCF-4干扰载体的设计与合成 | 第18-20页 |
| 3 结果 | 第20-22页 |
| 3.0 绒山羊毛乳头细胞总RNA提取 | 第20页 |
| 3.1 TCF-4基因的克隆 | 第20-21页 |
| 3.2 TCF-4基因过表达载体的构建与鉴定 | 第21-22页 |
| 第二部分 TCF-4基因过表达对初级、次级毛乳头细胞的影响 | 第22-31页 |
| 1 材料 | 第22-23页 |
| 1.1 实验仪器设备 | 第22页 |
| 1.2 试验材料 | 第22-23页 |
| 1.3 主要试剂和耗材 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-26页 |
| 2.1 质粒的提取 | 第23页 |
| 2.2 细胞的分离与培养 | 第23-24页 |
| 2.3 脂质体转染绒山羊初级、次级毛乳头细胞 | 第24页 |
| 2.4 Western blot检测TCF-4蛋白的表达 | 第24-25页 |
| 2.5 Real-time PCR检测基因过表达后初级、次级毛乳头细胞中TCF-4与毛囊发育相关基因的表达 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-31页 |
| 3.1 细胞的转染与观察 | 第26-28页 |
| 3.2 Western blot检测TCF-4蛋白的表达变化 | 第28-29页 |
| 3.3 TCF-4初级、次级过表达细胞中的毛囊发育相关基因的表达水平的检测 | 第29-31页 |
| 第三部分 TCF-4基因消减对初级、次级毛乳头细胞的影响 | 第31-38页 |
| 1 材料 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-32页 |
| 2.1 质粒的提取 | 第31-32页 |
| 2.2 细胞的分离与培养 | 第32页 |
| 2.3 脂质体转染绒山羊初级、次级毛乳头细胞 | 第32页 |
| 2.4 筛选高效干扰TCF-4表达的shRNA载体 | 第32页 |
| 2.5 Western blot检测TCF-4蛋白的表达 | 第32页 |
| 2.6 Real-time PCR检测基因干扰后初级、次级毛乳头细胞中毛囊发育相关基因的表达 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-38页 |
| 3.1 细胞的转染与观察 | 第32-34页 |
| 3.2 高效干扰载体的筛选 | 第34页 |
| 3.3 Western blot检测TCF-4蛋白的表达变化 | 第34-36页 |
| 3.4 TCF-4初级、次级干扰细胞中的毛囊发育相关基因的表达水平的检测 | 第36-38页 |
| 第四部分 讨论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 第五部分 结论 | 第47-48页 |
| 文献综述 | 第48-60页 |
| 1 Wnt家族 | 第48-51页 |
| 1.1 概述 | 第48-49页 |
| 1.2 Wnt信号分子通路 | 第49-51页 |
| 2 转化生长因子β超家族 | 第51页 |
| 3 T细胞因子4(TCF-4) | 第51-53页 |
| 3.1 TCF-4结构与功能 | 第51-52页 |
| 3.2 TCF-4与Wnt信号通路 | 第52页 |
| 3.3 TCF-4基因与肿瘤 | 第52-53页 |
| 4 展望 | 第53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 版图 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 硕士期间论文发表情况 | 第68页 |
