摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
英文缩写及全称和中文对照表 | 第7-9页 |
第一章 引言 | 第9-11页 |
第二章 材料与方法 | 第11-23页 |
·主要材料及试剂 | 第11-12页 |
·实验主要仪器和设备 | 第12-13页 |
·主要试剂的配制 | 第13-14页 |
·方法 | 第14-22页 |
·靶向IKKα、IKKβ基因shRNA序列的设计合成 | 第14-16页 |
·靶向IKKα、IKKβ基因重组载体的构建和鉴定 | 第16-19页 |
·引物退火 | 第16页 |
·酶切和连接 | 第16-17页 |
·连接产物转化TOP10感受态细胞 | 第17页 |
·重组质粒的鉴定 | 第17-18页 |
·重组质粒的提取 | 第18页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第18-19页 |
·测序鉴定 | 第19页 |
·转染重组质粒对HUVECs中IKKα/β表达的影响 | 第19-21页 |
·HUVECs的培养 | 第19页 |
·重组质粒转染HUVECs | 第19-20页 |
·Western blot法检测HUVECs IKKα/β蛋白的表达 | 第20-21页 |
·IKKβ基因稳定表达细胞系的建立 | 第21-22页 |
·G418最佳筛选浓度的确定 | 第21-22页 |
·稳定转染 | 第22页 |
·稳定表达细胞系的鉴定 | 第22页 |
·数据处理 | 第22-23页 |
第三章 结果 | 第23-29页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第23页 |
·重组质粒测序鉴定 | 第23-24页 |
·细胞转染效率的检测 | 第24-25页 |
·shRNA对HUVECs中IKKα/β蛋白表达的影响 | 第25-27页 |
·稳定表达细胞系的筛选 | 第27页 |
·稳定表达细胞系的鉴定 | 第27-29页 |
第四章 讨论 | 第29-33页 |
第五章 结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
综述 | 第38-43页 |
参考文献 | 第41-43页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第43页 |