| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-23页 |
| 第一章 结核病的简介 | 第9-12页 |
| 1.1 结核病现状 | 第9页 |
| 1.2 结核分枝杆菌 | 第9-10页 |
| 1.3 结核分枝杆菌的感染机制 | 第10-11页 |
| 1.4 机体的免疫应答机制 | 第11-12页 |
| 第二章 结核病的实验室诊断方法 | 第12-17页 |
| 2.1 细菌学诊断 | 第12-13页 |
| 2.1.1 痰涂片镜检 | 第12页 |
| 2.1.2 痰样本培养 | 第12-13页 |
| 2.2 血清学诊断 | 第13-14页 |
| 2.3 结核菌素皮肤实验 | 第14页 |
| 2.4 IFN-γ释放试验 | 第14-15页 |
| 2.5 DNA水平的诊断 | 第15-16页 |
| 2.6 生物传感器诊断 | 第16-17页 |
| 第三章 六种结核分枝杆菌特异性抗原的研究进展 | 第17-23页 |
| 3.1 MPT64 | 第18页 |
| 3.2 16KD | 第18-19页 |
| 3.3 38KD | 第19-20页 |
| 3.4 CFP10 | 第20-21页 |
| 3.5 Rv3425 | 第21页 |
| 3.6 Ag85复合物 | 第21-23页 |
| 第二部分 研究内容 | 第23-62页 |
| 第一章 六种MTB特异性抗原的原核表达及纯化 | 第23-53页 |
| 1.1 材料 | 第23-27页 |
| 1.2 方法 | 第27-34页 |
| 1.2.1 原核表达重组菌的构建 | 第27-32页 |
| 1.2.1.1 目的基因的扩增 | 第27-29页 |
| 1.2.1.2 PCR产物的胶回收 | 第29页 |
| 1.2.1.3 pMD18-T和目的基因重组载体的构建 | 第29页 |
| 1.2.1.4 转化E.coli DH5α感受态细胞 | 第29页 |
| 1.2.1.5 转化产物的鉴定 | 第29-31页 |
| 1.2.1.6 pMD18-T重组质粒和pET-30a空载体的双酶切 | 第31页 |
| 1.2.1.7 目的基因和pET-30a空载体的连接 | 第31页 |
| 1.2.1.8 连接产物的转化 | 第31-32页 |
| 1.2.1.9 重组菌的鉴定 | 第32页 |
| 1.2.2 重组菌的诱导表达、表达条件的优化及表达产物的鉴定 | 第32-33页 |
| 1.2.2.1 重组菌的诱导表达和表达条件的优化 | 第32页 |
| 1.2.2.2 重组蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第32-33页 |
| 1.2.2.3 表达产物的定性分析 | 第33页 |
| 1.2.3 重组蛋白的纯化和复性 | 第33-34页 |
| 1.2.3.1 重组蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 1.2.3.2 重组蛋白的复性 | 第34页 |
| 1.3 结果 | 第34-48页 |
| 1.3.1 抗原MPT64原核表达实验结果 | 第34-37页 |
| 1.3.2 抗原16KD-38KD融合蛋白原核表达实验结果 | 第37-40页 |
| 1.3.3 抗原CFP10原核表达实验结果 | 第40-42页 |
| 1.3.4 抗原Rv3425原核表达实验结果 | 第42-44页 |
| 1.3.5 抗原Ag85A原核表达实验结果 | 第44-46页 |
| 1.3.6 抗原Ag85B原核表达实验结果 | 第46-48页 |
| 1.4 讨论 | 第48-52页 |
| 1.5 小结 | 第52-53页 |
| 第二章 Ag85A和16KD-38KD血清学诊断效果的研究 | 第53-62页 |
| 2.1 材料 | 第53-54页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第53页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第53页 |
| 2.1.3 ELISA反应相关溶液的制备 | 第53-54页 |
| 2.2 方法 | 第54-55页 |
| 2.2.1 棋盘滴定法确定最适的抗原包被浓度和酶标二抗的工作浓度 | 第54-55页 |
| 2.2.1.1 包被 | 第54页 |
| 2.2.1.2 封闭 | 第54页 |
| 2.2.1.3 加待检血清 | 第54-55页 |
| 2.2.1.4 加HRP标记的羊抗人IgG | 第55页 |
| 2.2.1.5 显色 | 第55页 |
| 2.2.1.6 终止 | 第55页 |
| 2.2.2 间接ELISA法评价重组蛋白的血清学诊断效果 | 第55页 |
| 2.2.3 统计学分析ELISA检测结果 | 第55页 |
| 2.3 实验结果 | 第55-58页 |
| 2.3.1 棋盘滴定法确定的最适抗原包被浓度和酶标二抗的工作浓度 | 第55-58页 |
| 2.3.2 Ag85A和16KD-38KD的血清学检测结果 | 第58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-61页 |
| 2.5 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
