摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第8-23页 |
1.1 DNA及G-四聚体(G-quadruplex)简介 | 第8-16页 |
1.1.1 DNA分子的一级结构 | 第8-9页 |
1.1.2 DNA分子的二级结构 | 第9-14页 |
1.1.3 DNA分子的高级结构 | 第14页 |
1.1.4 解旋酶简介 | 第14-16页 |
1.2 单分子技术简介 | 第16-21页 |
1.2.1 单分子操纵技术 | 第16-19页 |
1.2.2 单分子荧光技术 | 第19-21页 |
1.3 本文的主要工作 | 第21-23页 |
第二章 高精度磁镊的搭建及G4单分子系统的构建 | 第23-56页 |
2.1 前言 | 第23-26页 |
2.1.1 高分子的拉力拉伸 | 第23页 |
2.1.2 磁镊的研究进展 | 第23-26页 |
2.2 高精度磁镊装置的设计原理 | 第26-33页 |
2.2.1 全内反射的原理 | 第26-27页 |
2.2.2 全内反射荧光显微术的实现 | 第27-29页 |
2.2.3 磁镊装置简介 | 第29-31页 |
2.2.4 结合全内反射荧光显微术的高精度磁镊 | 第31-33页 |
2.3 高精度磁镊装置的搭建 | 第33-40页 |
2.3.1 全内反射照明和成像系统 | 第35-37页 |
2.3.2 磁镊照明系统及磁力的测量 | 第37页 |
2.3.3 反馈系统 | 第37-40页 |
2.4 单分子连接系统的构建 | 第40-53页 |
2.4.1 单分子连接原理 | 第40-43页 |
2.4.2 单分子连接系统的构建方法 | 第43-52页 |
2.4.3 单分子连接系统的实现 | 第52-53页 |
2.5 目标G4连接的确定 | 第53-54页 |
2.6 高精度磁镊系统的改进方案 | 第54页 |
2.7 小结 | 第54-56页 |
第三章 用磁镊研究BLM解旋G4的动力学过程 | 第56-71页 |
3.1 绪论 | 第56-64页 |
3.1.1 端粒G4结构简介 | 第56-58页 |
3.1.2 RecQ解旋酶简介 | 第58-59页 |
3.1.3 BLM解旋酶及其结构简介 | 第59-62页 |
3.1.4 单分子研究BLM解旋G4的结果简介 | 第62-64页 |
3.2 实验材料及方法 | 第64-66页 |
3.2.1 解旋酶及反应缓冲液 | 第64-65页 |
3.2.2 实验方法 | 第65页 |
3.2.3 数据采集与分析 | 第65-66页 |
3.3 结果和讨论 | 第66-69页 |
3.3.1 低浓度ATP下BLM分步解旋G4 | 第66-67页 |
3.3.2 高浓度ATP下BLM解旋G4的有两种反应现象 | 第67-69页 |
3.4 磁镊实验的其他结果 | 第69-70页 |
3.5 小结 | 第70-71页 |
第四章 单分子荧光共振能量转移研究BLM解旋G4 | 第71-89页 |
4.1 绪论 | 第71-77页 |
4.1.1 单分子荧光共振能量转移(smFRET)简介 | 第71-73页 |
4.1.2 主动解旋和被动解旋模型 | 第73-74页 |
4.1.3 BLM解旋双链的模型 | 第74-76页 |
4.1.4 HRDC在BLM解旋过程中作用的研究 | 第76-77页 |
4.2 实验材料和方法 | 第77-78页 |
4.2.1 实验材料 | 第77-78页 |
4.2.2 实验方法 | 第78页 |
4.3 结果和讨论 | 第78-86页 |
4.3.1 确定smFRET实验中G4的去折叠态 | 第78-79页 |
4.3.2 smFRET实验的结果与磁镊的结果一致,说明加载的外力对BLM解旋G4没有影响 | 第79-82页 |
4.3.3 G4阻挡了BLM向前移动(translocation) | 第82页 |
4.3.4 ATP水解是产生长时间过程的必要条件 | 第82-83页 |
4.3.5 HRDC是产生BLM解旋G4长时间过程的功能域 | 第83-84页 |
4.3.6 对BLM解旋G4机理的解释及意义 | 第84-86页 |
4.4 smFRET实验的其他结果 | 第86-88页 |
4.4.1 单分子实验中,G4的结构以K的构型为主。 | 第86-87页 |
4.4.2 低浓度ATP下,BLM解旋G4的驻留时间的意义 | 第87-88页 |
4.5 结论 | 第88-89页 |
第五章 结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-99页 |
附录 | 第99-100页 |
个人简历及发表文章目录 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |