摘要 | 第3-4页 |
Summary | 第4页 |
缩略词中英文对照表 | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1 鸡马立克病及其分类 | 第10页 |
2 马立克氏病毒引起的病理变化 | 第10-11页 |
3 MDV的流行病学特征 | 第11-13页 |
4 蛋白质组技术研究进展及在肿瘤研究中的应用 | 第13-17页 |
4.1 基因组 | 第13-14页 |
4.2 蛋白质组的挑战 | 第14-15页 |
4.3 常见的蛋白质组学研究方法 | 第15页 |
4.4 电喷雾离子化液相色谱串联质谱(ESI-LC-MS) | 第15-16页 |
4.5 无标记定量蛋白质组学技术(Label-Free) | 第16-17页 |
4.6 基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱 | 第17页 |
4.7 双向凝胶电泳(2-DE) | 第17页 |
5 蛋白质组学技术在肿瘤研究中进展 | 第17-18页 |
6 结论与未来展望 | 第18-20页 |
第二章 GX0101感染宿主后血液中meq和gB的表达量测定及组织病理学观察 | 第20-27页 |
1 材料与方法 | 第20-22页 |
1.1 药品和试剂 | 第20页 |
1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
1.3 试验动物和毒株 | 第21页 |
1.4 方法 | 第21-22页 |
1.4.1 毒株培养 | 第21页 |
1.4.2 攻毒试验 | 第21页 |
1.4.3 血液DNA提取 | 第21页 |
1.4.4 鸡病理组织学观察 | 第21页 |
1.4.5 引物设计与合成 | 第21-22页 |
1.4.6 meq和gB基因重组质粒构建 | 第22页 |
1.4.7 实时定量PCR | 第22页 |
1.4.8 数据分析 | 第22页 |
2 结果 | 第22-25页 |
2.1 马立克病鸡血液中meq和gB绝对定量标准曲线的建立 | 第22-23页 |
2.2 不同时间马立克病鸡血液中meq和gB表达量的变化 | 第23页 |
2.3 SPF肿瘤病变鸡剖检观察 | 第23-24页 |
2.4 SPF肿瘤病变鸡HE染色结果分析 | 第24-25页 |
3 讨论 | 第25-27页 |
第三章 GX0101感染鸡脾的蛋白质组研究 | 第27-35页 |
1 材料与方法 | 第27-28页 |
1.1 试剂 | 第27页 |
1.2 仪器设备 | 第27-28页 |
1.3 实验材料 | 第28页 |
2 方法 | 第28-31页 |
2.1 蛋白提取 | 第28页 |
2.2 Bradford蛋白定量 | 第28页 |
2.3 SDS-PAGE | 第28页 |
2.4 原烷基化及Trypsin酶解 | 第28-29页 |
2.5 质谱分析 | 第29-30页 |
2.5.1 毛细管高效液相色谱 | 第29页 |
2.5.2 质谱鉴定 | 第29页 |
2.5.3 原始质谱数据 | 第29-30页 |
2.5.4 搜库参数设置 | 第30页 |
2.6 数据分析 | 第30-31页 |
2.6.1 显著性差异蛋白质分析 | 第30页 |
2.6.2 显著性差异蛋白质的GO分析 | 第30页 |
2.6.3 显著性差异蛋白质的 KEGG 分析 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-33页 |
3.1 定量标准曲线及定量结果 | 第31页 |
3.2 SDS-PAGE结果分析 | 第31页 |
3.3 肽段长度分布 | 第31页 |
3.4 定量结果及差异蛋白 | 第31-32页 |
3.5 差异蛋白GO分析 | 第32-33页 |
3.6 差异蛋白KEGG分析 | 第33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
第四章 马立克病鸡各组织在不同时间点PRNP表达量研究 | 第35-40页 |
1 材料和方法 | 第35-37页 |
1.1 材料 | 第35-36页 |
1.1.1 组织样 | 第35页 |
1.1.2 试剂 | 第35页 |
1.1.3 仪器 | 第35-36页 |
1.1.4 引物的设计和合成 | 第36页 |
1.2 | 第36-37页 |
1.2.1 RNA提取 | 第36页 |
1.2.2 反转录 | 第36页 |
1.2.3 组织样品PRNP的mRNA表达量测定 | 第36-37页 |
1.2.4 数据处理 | 第37页 |
2 结果 | 第37-39页 |
2.1 各组织样品RNA提取 | 第37页 |
2.2 荧光定量引物的特异性检测 | 第37-38页 |
2.3 腺胃、胰腺、脑和脾脏PRNP相对表达量 | 第38页 |
2.4 肾、胸腺、心PRNP相对表达量 | 第38-39页 |
2.5 肝,肺PRNP相对表达量 | 第39页 |
3 讨论 | 第39-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51-52页 |
导师简介 | 第52-53页 |