| 摘要 | 第3-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第18-36页 |
| 1.1 病理性心肌肥厚 | 第18-20页 |
| 1.1.1 心肌肥厚 | 第18页 |
| 1.1.2 生理性心肌肥厚和病理性心肌肥厚 | 第18-19页 |
| 1.1.3 病理性心肌肥厚与心衰 | 第19页 |
| 1.1.4 向心性病理肥厚和离心性病理肥厚 | 第19-20页 |
| 1.2 介导病理心肌肥大的信号通路 | 第20-26页 |
| 1.2.1 G蛋白信号通路 | 第21-22页 |
| 1.2.2 PI3K (p110γ)信号通路 | 第22页 |
| 1.2.3 有丝分裂激活蛋白激酶通路(MAPK) | 第22-24页 |
| 1.2.4 钙信号通路 | 第24-25页 |
| 1.2.5 Tgf-β信号通路 | 第25-26页 |
| 1.3 病理性心肌肥大中的一些正调控因子和负调控因子 | 第26-27页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 1.5 研究结果概述 | 第28页 |
| 1.6 参考文献 | 第28-36页 |
| 第二章 材料与方法 | 第36-48页 |
| 2.1 材料 | 第36-37页 |
| 2.1.1 生物信息学软件 | 第36页 |
| 2.1.2 质粒 | 第36页 |
| 2.1.3 细胞 | 第36页 |
| 2.1.4 引物 | 第36页 |
| 2.1.5 工具酶和试剂 | 第36页 |
| 2.1.6 实验动物 | 第36-37页 |
| 2.2 方法 | 第37-48页 |
| 2.2.1 DNA的提取和基因型鉴定 | 第37页 |
| 2.2.2 Southern Blot | 第37-38页 |
| 2.2.3 组织及细胞中总RNA的提取 | 第38页 |
| 2.2.4 Real-time PCR和RT-PCR | 第38-39页 |
| 2.2.5 Northern Blot杂交 | 第39-40页 |
| 2.2.6 石蜡包埋、切片及HE染色 | 第40页 |
| 2.2.7 Masson染色 | 第40-41页 |
| 2.2.8 免疫组织化学 | 第41页 |
| 2.2.9 腺病毒的构建与扩充 | 第41-42页 |
| 2.2.10 大鼠原代心肌细胞分离、培养及心肌细胞面积统计 | 第42-44页 |
| 2.2.11 Western Blot | 第44页 |
| 2.2.12 免疫共沉淀(Co-IP) | 第44-45页 |
| 2.2.13 GST PULL DOWN | 第45页 |
| 2.2.14 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第45-46页 |
| 2.2.15 凝胶阻滞实验(EMSA) | 第46-47页 |
| 2.2.16 荧光素酶报告基因活性分析实验(Luciferase) | 第47页 |
| 2.2.17 小鼠心脏的超声检测 | 第47-48页 |
| 第三章 POP1,一个心脏中天然的防卫心肌肥厚的膜蛋白分子 | 第48-66页 |
| 3.1 研究背景 | 第50-51页 |
| 3.2 目的和意义 | 第51页 |
| 3.3 实验结果 | 第51-61页 |
| 3.3.1 Pop1过表达腺病毒的研制 | 第51-52页 |
| 3.3.2 腺病毒介导Pop1在大鼠原代心肌细胞中过表达 | 第52-53页 |
| 3.3.3 原代心肌细胞中过表达Pop1抑制PE诱导的心肌肥厚 | 第53-54页 |
| 3.3.4 α-MHC-Pop1-hGH转基因载体的构建 | 第54-55页 |
| 3.3.5 转基因小鼠的基因型鉴定 | 第55-56页 |
| 3.3.6 Pop1在转基因小鼠心肌组织中检测到Pop1过表达 | 第56页 |
| 3.3.7 ISO诱导心肌肥大的小鼠模型 | 第56-59页 |
| 3.3.8 Pop1转基因小鼠抑制ISO诱导的的心肌肥厚 | 第59-60页 |
| 3.3.9 Pop1转基因小鼠抑制ISO诱导P-Akt分子的活化 | 第60-61页 |
| 3.3.10 建立在心脏中过表达Pop1剔除Geft的小鼠 | 第61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-64页 |
| 3.5 参考文献 | 第64-66页 |
| 第四章 GEFT,一个心脏中天然的防卫心肌肥厚的膜锚定蛋白分子 | 第66-93页 |
| 4.1 研究背景 | 第68-71页 |
| 4.2 目的和意义 | 第71页 |
| 4.3 实验结果 | 第71-87页 |
| 4.3.1 Geft在肥大的心肌细胞中表达下调 | 第71-72页 |
| 4.3.2 Geft基因的打靶策略 | 第72页 |
| 4.3.3 Geft基因打靶Southern探针设计和验证 | 第72-73页 |
| 4.3.4 利用Red重组系统构建Geft条件基因敲除载体 | 第73-77页 |
| 4.3.5 中靶ES细胞的筛选 | 第77-79页 |
| 4.3.6 Geft条件基因敲除嵌合体小鼠纯合子小鼠的获得 | 第79-81页 |
| 4.3.7 Geft在胚胎期心脏中表达 | 第81-82页 |
| 4.3.8 第二心域特异性剔除Geft小鼠的获得 | 第82-83页 |
| 4.3.9 Geft对于第二心域发育不是必须的 | 第83-84页 |
| 4.3.10 心脏特异性剔除Geft小鼠的获得 | 第84页 |
| 4.3.11 心脏特异性剔除Geft小鼠易于心肌肥厚 | 第84-87页 |
| 4.3.12 心脏特异性剔除Geft小鼠伴随着P-Akt分子的激活 | 第87页 |
| 4.4 讨论 | 第87-90页 |
| 4.5 参考文献 | 第90-93页 |
| 第五章 LRRC10,一个心脏中天然的防卫心肌肥厚的胞浆蛋白分子 | 第93-119页 |
| 5.1 研究背景 | 第95页 |
| 5.2 目的和意义 | 第95页 |
| 5.3 实验结果 | 第95-114页 |
| 5.3.1 Lrrc10在小鼠心肌肥厚模型中和人类心衰标本中表达下调 | 第95-97页 |
| 5.3.2 腺病毒介导Lrrc10在大鼠原代心肌细胞中过表达和敲低 | 第97-99页 |
| 5.3.3 体外实验证明Lrrc10抑制心肌肥大 | 第99-100页 |
| 5.3.4 α-MHC-Lrrc10-hGH转基因载体的构建 | 第100-101页 |
| 5.3.5 转基因小鼠的基因型鉴定 | 第101-102页 |
| 5.3.6 转基因小鼠中检测Lrrc10过表达以及表型分析 | 第102-103页 |
| 5.3.7 体内过表达Lrrc10抑制病理刺激导致的心肌肥大 | 第103-106页 |
| 5.3.8 Lrrc10与SRF发生相互作用并抑制其转录活性 | 第106-107页 |
| 5.3.9 体内外过表达Lrrc10下调SRF靶基因的表达 | 第107-109页 |
| 5.3.10 Lrrc10调节SRF的转位 | 第109-111页 |
| 5.3.11 SRF转录调控Lrrc10 | 第111-112页 |
| 5.3.12 体内注入Lrrc10腺病毒能抑制ISO刺激的心肌肥大 | 第112-113页 |
| 5.3.13 体内注入SRF腺病毒能逆转Lrrc10转基因小鼠对ISO刺激的心肌肥大的抑制作用 | 第113-114页 |
| 5.4 讨论 | 第114-117页 |
| 5.5 参考文献 | 第117-119页 |
| 第六章 讨论 | 第119-126页 |
| 6.1 细胞类型的转变在疾病发生当中发挥着重要作用 | 第119-120页 |
| 6.2 在心肌肥厚中胚胎基因重新激活是心肌细胞类型的转变的分子事件 | 第120页 |
| 6.3 在心肌肥厚中一类天然的防御分子在信号通过的各个环节扣押着一些胚胎基因的激活 | 第120-124页 |
| 6.4 在心肌肥厚的各个阶段是心脏在功能代偿中不同稳态的表现形式,伴随着不同的分子事件 | 第124-125页 |
| 6.5 参考文献 | 第125-126页 |
| 第七章 综述:抵抗心脏疾病的第一道防线 | 第126-143页 |
| 7.1 前言 | 第128-130页 |
| 7.2 心肌肥厚中的第一道防线 | 第130-137页 |
| 7.2.1 转录因子 | 第130-134页 |
| 7.2.2 Ca~(2+)处理蛋白 | 第134-135页 |
| 7.2.3 合成与代谢 | 第135页 |
| 7.2.4 氧化应激与凋亡 | 第135-136页 |
| 7.2.5 收缩蛋白装置 | 第136页 |
| 7.2.6 纤维化 | 第136-137页 |
| 7.2.7 血管生成 | 第137页 |
| 7.3 展望 | 第137-138页 |
| 7.4 参考文献 | 第138-143页 |
| 第八章 其他工作 | 第143-185页 |
| 8.1 材料 | 第143-144页 |
| 8.1.1 生物信息学软件 | 第143页 |
| 8.1.2 质粒 | 第143页 |
| 8.1.3 细胞 | 第143页 |
| 8.1.4 引物 | 第143-144页 |
| 8.1.5 工具酶和试剂 | 第144页 |
| 8.2 方法 | 第144-147页 |
| 8.2.1 载体构建 | 第144-146页 |
| 8.2.2 荧光素酶报告基因活性分析实验(Luciferase) | 第146-147页 |
| 8.3 RMND5A诱导心肌肥厚 | 第147-165页 |
| 8.3.1 研究背景 | 第149-150页 |
| 8.3.2 目的和意义 | 第150页 |
| 8.3.3 实验结果 | 第150-162页 |
| 8.3.4 讨论 | 第162-163页 |
| 8.3.5 参考文献 | 第163-165页 |
| 8.4 LRRC10启动子分析 | 第165-185页 |
| 8.4.1 前言 | 第167-168页 |
| 8.4.2 研究目的和意义 | 第168-169页 |
| 8.4.3 实验结果 | 第169-181页 |
| 8.4.4 讨论 | 第181-183页 |
| 8.4.5 参考文献 | 第183-185页 |
| 附录 | 第185-188页 |
| 一、论著及会议论文 | 第185-187页 |
| 1、已(拟)发表第一作者SCI论文: | 第185页 |
| 2、已发表中间作者SCI论文: | 第185-186页 |
| 3、已发表中文论文: | 第186-187页 |
| 二、常用缩略词 | 第187-188页 |
| 致谢 | 第188-191页 |
