| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 上篇 文献综述 | 第14-44页 |
| 第一章 营养代谢在病原菌与寄主互作过程中的功能研究进展 | 第14-34页 |
| 1 植物与病原物互作简介 | 第14-18页 |
| 2 营养物质代谢在植物与病原微生物互作中的作用 | 第18-34页 |
| 2.1 营养代谢与植物抗病性 | 第19-26页 |
| 2.1.1 碳素物质代谢与植物抗病性 | 第19-21页 |
| 2.1.2 脂类代谢参与植物抗病性 | 第21-23页 |
| 2.1.3 植物氮素和氨基酸代谢相关基因在抗病中的作用 | 第23-26页 |
| 2.2 营养代谢与病原菌致病性 | 第26-34页 |
| 2.2.1 病原菌获取营养的方式 | 第26-29页 |
| 2.2.2 病原菌致病中营养相关基因的表达调控研究 | 第29-32页 |
| 2.2.3 病原菌营养代谢与其致病性的关系 | 第32-34页 |
| 第二章 拟南芥中AGO蛋白的功能研究进展 | 第34-44页 |
| 1 AGO蛋白的多样性 | 第34-35页 |
| 2 AGO蛋白的结构 | 第35-38页 |
| 2.1 PAZ功能域 | 第37页 |
| 2.2 MID和PIWI功能域 | 第37-38页 |
| 3 植物AGO蛋白的作用方式 | 第38-41页 |
| 3.1 核酸内切酶裂解和翻译抑制 | 第38-39页 |
| 3.2 隔离(Sequesration) | 第39页 |
| 3.3 DNA甲基化(DNAMethylation) | 第39-40页 |
| 3.4 DSB修复(DSB Repair) | 第40-41页 |
| 4 AGO蛋白在调控拟南芥免疫防卫反应中的功能 | 第41-43页 |
| 4.1 AGO1 | 第41-42页 |
| 4.2 AGO2 | 第42页 |
| 4.3 AGO4 | 第42-43页 |
| 4.4 AGO7 | 第43页 |
| 5 展望 | 第43-44页 |
| 下篇 研究内容 | 第44-118页 |
| 第一章 大豆疫霉中氮素代谢基因的鉴定与基本特征分析 | 第46-64页 |
| 1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 1.1 序列来源 | 第48页 |
| 1.2 基因鉴定及分析 | 第48-49页 |
| 1.3 大豆疫霉侵染样品的制备 | 第49页 |
| 1.4 RNA提取及qRT-PCR | 第49-50页 |
| 1.4.1 RNA提取 | 第49页 |
| 1.4.2 cDNA的制备 | 第49-50页 |
| 1.4.3 qRT-PCR分析 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-62页 |
| 2.1 大豆疫霉中氮素代谢相关基因的鉴定 | 第50-53页 |
| 2.2 疫霉中的氮素同化途径 | 第53-54页 |
| 2.3 疫霉中的氨基酸代谢途径 | 第54-62页 |
| 2.3.1 赖氨酸合成途径在大豆疫霉中是部分缺失的 | 第55-57页 |
| 2.3.2 大豆疫霉中特异的GABA代谢途径 | 第57-60页 |
| 2.3.3 大豆疫霉氨基酸代谢中复杂多变的双功能酶 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 第二章 大豆疫霉氮素营养吸收在其致病过程中具有重要功能 | 第64-92页 |
| 1 材料与方法 | 第66-71页 |
| 1.1 供试菌株以及植物材料的保存与培养 | 第66-67页 |
| 1.2 生物信息学分析 | 第67页 |
| 1.3 DNA提取、RNA提取及qRT-PCR | 第67-68页 |
| 1.3.1 大豆疫霉基因组DNA提取 | 第67页 |
| 1.3.2 大豆疫霉侵染样品制备 | 第67-68页 |
| 1.3.3 大豆疫霉RNA提取及qRT-PCR | 第68页 |
| 1.4 游离氨基酸的检测 | 第68页 |
| 1.5 氮素营养利用测试 | 第68页 |
| 1.6 无机氮盐诱导实验 | 第68页 |
| 1.7 转化载体构建 | 第68-69页 |
| 1.8 PEG介导的大豆疫霉原生质体转化 | 第69-70页 |
| 1.9 转化子生长测定 | 第70页 |
| 1.10 荧光观察 | 第70页 |
| 1.11 致病性检测 | 第70-71页 |
| 2 结果分析 | 第71-90页 |
| 2.1 大豆疫霉对硝酸盐的利用 | 第71-75页 |
| 2.1.1 大豆疫霉中显著扩张的硝酸盐/肽转运子 | 第71-73页 |
| 2.1.2 硝酸盐/肽转运子的表达分析 | 第73-74页 |
| 2.1.3 大豆疫霉可以利用硝酸盐作为氮源 | 第74-75页 |
| 2.2 卵菌中特异的铵盐转运子Rhs对于大豆疫霉的致病力是需要的 | 第75-82页 |
| 2.2.1 卵菌中特异的Rh型铵盐转运子 | 第75-77页 |
| 2.2.2 大豆疫霉中铵盐转运子的表达发生了分化 | 第77-78页 |
| 2.2.3 大豆疫霉中PsRh1定位在细胞膜并且是受无机氮盐诱导表达的 | 第78-80页 |
| 2.2.4 铵盐转运子PsRhs对于大豆疫霉的致病力是需要的 | 第80-82页 |
| 2.3 氨基酸转运子在大豆疫霉侵染阶段具有重要作用 | 第82-90页 |
| 2.3.1 氨基酸转运子在卵菌中是选择性表达的 | 第82-83页 |
| 2.3.2 大部分的氨基酸转运子基因在大豆疫霉侵染过程中是上调表达的 | 第83-85页 |
| 2.3.3 大豆疫霉侵染时改变了寄主中游离氨基酸的含量 | 第85-86页 |
| 2.3.4 大豆疫霉对不同氨基酸的利用存在差异 | 第86-88页 |
| 2.3.5 半胱氨酸对大豆疫霉生长有抑制作用 | 第88-89页 |
| 2.3.6 氨基酸转运子PsCAT3在大豆疫霉侵染过程中发挥重要功能 | 第89-90页 |
| 3 讨论 | 第90-92页 |
| 第三章 卵菌特异的天冬氨酸转氨酶PSAAT3在大豆疫霉致病中的功能分析 | 第92-104页 |
| 1 材料与方法 | 第93-94页 |
| 1.1 供试菌株以及植物材料的保存与培养 | 第93-94页 |
| 1.2 生物信息学分析 | 第94页 |
| 1.3 表达模式样品制备及qRT-PCR检测 | 第94页 |
| 1.4 载体构建及大豆疫霉原生质体转化 | 第94页 |
| 1.5 转化子致病性检测 | 第94页 |
| 1.6 转化子氮素利用实验 | 第94页 |
| 2 结果分析 | 第94-102页 |
| 2.1 在卵菌病原菌中鉴定了特异的天冬氨酸转氨酶 | 第94-97页 |
| 2.2 PsAAT3在大豆疫霉侵染过程中是上调表达的 | 第97-98页 |
| 2.3 获得了大豆疫霉PsAAT3的沉默菌株 | 第98-99页 |
| 2.4 PsAAT3对于大豆疫霉的致病性是需要的 | 第99-101页 |
| 2.5 沉默PsAAT3后改变了大豆疫霉在不含氮素的人工培养基上的生长 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-104页 |
| 第四章 ARGONAUTE4以不同的方式参与拟南芥对辣椒疫霉和棉花黄萎菌的抗性 | 第104-118页 |
| 1 材料与方法 | 第106-109页 |
| 1.1 植物材料和实验菌株的保存与培养 | 第106-107页 |
| 1.2 游动孢子及分生孢子的制备 | 第107页 |
| 1.2.1 辣椒疫霉游动孢子的制备 | 第107页 |
| 1.2.2 棉花黄萎菌分生孢子的制备 | 第107页 |
| 1.3 病原菌接种实验 | 第107页 |
| 1.3.1 离体叶片接种 | 第107页 |
| 1.3.2 蘸根法接种 | 第107页 |
| 1.4 黄萎菌发病等级 | 第107-108页 |
| 1.5 细胞学观察 | 第108页 |
| 1.5.1 胼胝质染色观察 | 第108页 |
| 1.5.2 过氧化氢染色观察 | 第108页 |
| 1.6 核酸提取及荧光定量分析 | 第108页 |
| 1.7 侵染菌丝荧光显微镜观察 | 第108-109页 |
| 2 结果与分析 | 第109-116页 |
| 2.1 拟南芥ago突变体对辣椒疫霉和黄萎菌抗性差异筛选 | 第109-110页 |
| 2.2 拟南芥ago4-2突变体对辣椒疫霉和黄萎菌的敏感性不同 | 第110-112页 |
| 2.3 拟南芥ago4-2突变体的防卫反应发生改变 | 第112-113页 |
| 2.4 拟南芥中ARGONAUTE4基因在辣椒疫霉和棉花黄萎菌侵染时表达模式不同 | 第113-114页 |
| 2.5 AGO4通过不同的途径调控拟南芥对辣椒疫霉和棉花黄萎菌的抗性 | 第114-116页 |
| 3 讨论 | 第116-118页 |
| 全文参考文献 | 第118-140页 |
| 附录 | 第140-142页 |
| 本论文总结与创新点 | 第142-144页 |
| 攻读博士期间发表或待发表的论文 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
