| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 实验材料 | 第13-20页 |
| 1.1 细胞株 | 第13页 |
| 1.2 组织样本来源 | 第13页 |
| 1.3 siRNA、质粒及shRNA慢病毒 | 第13页 |
| 1.4 主要试剂 | 第13-16页 |
| 1.5 主要设备 | 第16-17页 |
| 1.6 相关溶剂的配置 | 第17-20页 |
| 第二章 实验方法 | 第20-36页 |
| 2.1 细胞培养、冻存及复苏 | 第20页 |
| 2.2 qRT-PCR | 第20-22页 |
| 2.3 质粒转化 | 第22页 |
| 2.4 质粒扩增、抽提 | 第22-23页 |
| 2.5 组织包埋 | 第23-24页 |
| 2.6 免疫组织化学染色 | 第24页 |
| 2.7 HE染色实验 | 第24-25页 |
| 2.8 质粒( siRNA)转染 | 第25页 |
| 2.9 稳定表达细胞株的建立 | 第25-26页 |
| 2.10 双荧光素酶报告基因检测 | 第26页 |
| 2.11 流式细胞周期实验 | 第26-27页 |
| 2.12 蛋白提取、浓度测定 | 第27-28页 |
| 2.13 Western blot实验 | 第28-30页 |
| 2.14 EdU染色 | 第30-31页 |
| 2.15 细胞侵袭实验 | 第31页 |
| 2.16 细胞划痕实验 | 第31-32页 |
| 2.17 免疫荧光实验 | 第32页 |
| 2.18 免疫共沉淀实验 | 第32-33页 |
| 2.19 罗丹明鬼笔环肽染色 | 第33页 |
| 2.20 慢病毒感染细胞 | 第33-34页 |
| 2.21 动物实验 | 第34页 |
| 2.22 统计学分析 | 第34-36页 |
| 第三章 结果 | 第36-57页 |
| 3.1 Rufy3在大肠癌中的表达高于正常组织 | 第36-37页 |
| 3.2 Rufy3促进大肠癌相关癌基因的表达 | 第37-39页 |
| 3.3 Rufy3的表达与大肠癌病人的预后相关 | 第39-41页 |
| 3.4 敲低Rufy3可以阻滞大肠癌细胞周期 | 第41-43页 |
| 3.5 Rufy3可以促进大肠癌细胞的增殖 | 第43-44页 |
| 3.6 高表达Rufy3促进大肠癌细胞的侵袭转移 | 第44-45页 |
| 3.7 Rufy3促进大肠癌细胞的EMT并在淋巴结转移中起作用 | 第45-47页 |
| 3.8 在大肠癌中Rufy3促进TGF-β1介导的EMT、侵袭转移作用 | 第47-49页 |
| 3.9 在体内,Rufy3诱导大肠癌细胞转移 | 第49-50页 |
| 3.10 Rufy3和FOXK1在大肠癌中相互作用、协同影响预后 | 第50-52页 |
| 3.11 敲低FOXK1可以抑制Rufy3对大肠癌侵袭转移的影响 | 第52-54页 |
| 3.12 Rufy3和FOXK1协同促进大肠癌细胞的EMT作用 | 第54-56页 |
| 3.13 在体内,Rufy3和FOXK1协同促进大肠癌的侵袭转移 | 第56-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-64页 |
| 第五章 全文小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 在读期间撰写论文情况 | 第71-73页 |
