摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略词表 | 第14-15页 |
前言 | 第15-18页 |
第一章 西瑞香素对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的增殖和凋亡的影响 | 第18-40页 |
1 实验仪器与试剂 | 第18-19页 |
1.1 实验试剂 | 第18-19页 |
1.2 实验仪器 | 第19页 |
1.3 实验细胞 | 第19页 |
2 溶液的配制 | 第19-21页 |
2.1 磷酸盐缓冲液(PBS)的配制 | 第19-20页 |
2.2 培养基的配制 | 第20页 |
2.3 细胞冻存液的配制 | 第20页 |
2.4 中强酸清洁液的配制 | 第20页 |
2.5 药物的配制 | 第20页 |
2.6 MTT的配制 | 第20-21页 |
3 实验方法 | 第21-28页 |
3.1 细胞培养技术 | 第21-22页 |
3.1.1 细胞的复苏 | 第21页 |
3.1.2 细胞的传代 | 第21页 |
3.1.3 细胞的冻存 | 第21-22页 |
3.1.4 细胞的计数 | 第22页 |
3.2 MTT法测西瑞香素对SH-SY5Y细胞的增殖抑制作用 | 第22-23页 |
3.2.1 MTT的基本原理 | 第22-23页 |
3.2.2 MTT法实验步骤 | 第23页 |
3.3 用Annexin V-FITC检测西瑞香素对SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞的凋亡作用 | 第23-24页 |
3.3.1 Annexin V-FITC检测细胞凋亡的基本原理 | 第23-24页 |
3.3.2 细胞凋亡试验实验方法 | 第24页 |
3.4 西瑞香素对SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞的周期影响 | 第24-26页 |
3.4.1 细胞周期试验基本原理 | 第24-25页 |
3.4.2 周期试验实验方法 | 第25-26页 |
3.5 JC-1 线粒体细胞膜电位的测定 | 第26-27页 |
3.5.1 基本原理 | 第26-27页 |
3.5.2 操作步骤: | 第27页 |
3.6 细胞划痕试验 | 第27-28页 |
3.6.1 划痕试验基本原理 | 第27-28页 |
3.6.2 实验步骤 | 第28页 |
4 数据分析 | 第28-29页 |
5 试验结果与讨论 | 第29-39页 |
5.1 西瑞香素对细胞形态的影响 | 第29页 |
5.2 MTT法检测西瑞香素对SH-SY5Y细胞的增殖抑制作用 | 第29-31页 |
5.3 西瑞香素对SH-SY5Y细胞的凋亡作用结果 | 第31-33页 |
5.4 细胞周期试验结果 | 第33-35页 |
5.5 JC-1 细胞膜电位检测结果 | 第35-37页 |
5.6 细胞划痕实验结果与讨论 | 第37-39页 |
6 本章小结 | 第39-40页 |
第二章 西瑞香素在细胞中的代谢过程的初步研究 | 第40-57页 |
1 仪器与材料 | 第40-41页 |
1.1 材料 | 第40-41页 |
1.2 仪器 | 第41页 |
2 溶液的配制 | 第41-42页 |
2.1 西瑞香素标准品储备液的配制 | 第41页 |
2.2 标准溶液的配制 | 第41-42页 |
3 实验方法 | 第42-50页 |
3.1 细胞培养 | 第42页 |
3.1.1 细胞的传代 | 第42页 |
3.1.2 细胞计数和铺板 | 第42页 |
3.2 色谱条件 | 第42-43页 |
3.3 BCA蛋白测定法 | 第43-44页 |
3.3.1 试验原理 | 第43页 |
3.3.2 试验步骤 | 第43-44页 |
3.4 细胞样品处理 | 第44页 |
3.4.1 细胞裂解方式的选择 | 第44页 |
3.4.2 细胞样品的处理 | 第44页 |
3.5 方法学的建立 | 第44-49页 |
3.5.1 专属性考察 | 第44-45页 |
3.5.2 标准曲线的绘制 | 第45-46页 |
3.5.3 精密度试验 | 第46-47页 |
3.5.4 准确度 | 第47-48页 |
3.5.5 稳定性试验 | 第48页 |
3.5.6 西瑞香素加样提取回收率的测定 | 第48-49页 |
3.6 培养基组成与摄取关系实验 | 第49页 |
3.7 西瑞香素的孵育时间与细胞摄取的关系 | 第49-50页 |
3.8 细胞中西瑞香素的消除情况 | 第50页 |
3.9 维拉帕米对西瑞香素在细胞中的摄取的影响 | 第50页 |
4 数据处理 | 第50-51页 |
5 实验结果与讨论 | 第51-55页 |
5.1 色谱条件的选择 | 第51页 |
5.2 细胞样品处理方法的选择 | 第51-52页 |
5.3 方法学 | 第52-53页 |
5.4 西瑞香素在细胞中的摄取与培养基组成的关系 | 第53页 |
5.5 西瑞香素的孵育时间与摄取的关系 | 第53-54页 |
5.6 细胞中西瑞香素的消除情况 | 第54-55页 |
5.7 维拉帕米对西瑞香素在细胞中的含量的影响 | 第55页 |
6 本章小结 | 第55-57页 |
全文总结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
个人简历 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |