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高羊茅Fa5GR基因克隆及其RNAi基因沉默体系的构建研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 绪论第10-18页
    1.1 高羊茅应用的研究进展第10-12页
        1.1.1 高羊茅应用上的优势第10页
        1.1.2 高羊茅研究进展第10-12页
        1.1.3 高羊茅在生产应用存在的问题第12页
    1.2 RNAi基因沉默研究进展第12-13页
    1.3 滞绿基因研究进展第13-16页
        1.3.1 滞绿突变体的发现及滞绿基因SGR的克隆第13-14页
        1.3.2 SGR蛋白保守性第14页
        1.3.3 滞绿基因SGR参与的叶绿素代谢途径第14-16页
    1.4 论文研究目的与意义第16-18页
第2章 实验材料与方法第18-26页
    2.0 实验材料第18页
    2.1 主要试剂和仪器第18页
    2.2 培养基及菌株等第18-19页
    2.3 生理生化实验测定指标方法第19-20页
    2.4 高羊茅FaSGR基因的克隆第20-21页
        2.4.1 引物设计第20页
        2.4.2 高羊茅FaSGR基因的克隆和测序第20-21页
        2.4.3 高羊茅FaSGR基因序列的分析第21页
    2.5 高羊茅FaSGR基因沉默载体的构建第21-24页
        2.5.1 引物设计第21-22页
        2.5.2 目的片段的克隆和测序第22-23页
        2.5.3 入门载体的构建第23页
        2.5.4 pANDA-SGR载体构建第23-24页
    2.6 高羊茅FaSGR-RNAi转基因体系的构建第24-25页
        2.6.1 农杆菌细胞活化第24页
        2.6.2 农杆菌感受态细胞的制备第24页
        2.6.3 RNAi-FaSGR表达载体转入农杆菌感受态细胞第24页
        2.6.4 根癌农杆菌转化条件的影响因素第24-25页
    2.7 数据统计处理方法第25-26页
第3章 结果与分析第26-38页
    3.1 高羊茅FaSGR基因的克隆与分析第26-29页
        3.1.1 高羊茅离体叶片黑暗处理实验第26-27页
        3.1.2 高羊茅FaSGR基因获得与验证第27-29页
    3.2 高羊茅FaSGR基因序列生物信息学分析第29-33页
    3.3 高羊茅FaSGR基因沉默载体构建第33-34页
        3.3.1 目的基因片段的获得第33页
        3.3.2 入门载体阳性克隆检测第33-34页
        3.3.3 表达载体的阳性克隆检测第34页
    3.4 高羊茅FaSGR-RNAi转基因体系的构建第34-38页
        3.4.1 平板培养基抗生素的浓度对农杆菌生长的影响第34-35页
        3.4.2 转化农杆菌及其验证第35-36页
        3.4.3 预培养培养基抗生素浓度的影响第36页
        3.4.4 抗性愈伤组织的筛选第36-38页
第4章 全文讨论第38-42页
    4.1 高羊茅离体叶片的黑暗处理第38页
    4.2 高羊茅FaSGR基因生物信息学分析第38-39页
        4.2.1 生物信息学第38-39页
        4.2.2 植物SGR基因生物学信息第39页
    4.3 高羊茅FaSGR基因RNAi表达载体的构建第39-41页
        4.3.1 RNAi载体构建方式第39-40页
        4.3.2 植物RNAi载体系列第40页
        4.3.3 构建SGR基因载体的启动子第40-41页
    4.4 高羊茅FaSGR-RNAi转基因体系的构建第41-42页
第5章 总结第42-43页
    5.1 本研究主要结论第42页
    5.2 本研究特色与创新之处第42页
    5.3 后续研究工作展望第42-43页
参考文献第43-50页
附录第50-51页
致谢第51-52页
作者简介第52页

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