摘要 | 第6-7页 |
第一部分 微生物菌种资源库的建立 | 第7-15页 |
1 文献综述 | 第7-10页 |
1.1 极端环境微生物的研究 | 第7-8页 |
1.1.1 高温环境中的微生物 | 第7-8页 |
1.1.2 低温环境中的微生物 | 第8页 |
1.1.3 盐碱环境中的微生物 | 第8页 |
1.2 土壤中微生物的研究 | 第8-9页 |
1.2.1 土壤中植物病原菌的分离 | 第9页 |
1.2.2 发病植株田间土壤生防菌株的分离 | 第9页 |
1.3 目的和意义 | 第9-10页 |
2 材料与方法 | 第10-12页 |
2.1 试验材料 | 第10页 |
2.2 培养基 | 第10页 |
2.3 试验方法 | 第10-12页 |
2.3.1 高温堆料中高温菌种的分离 | 第10-11页 |
2.3.2 低温冻土中微生物菌株的分离 | 第11页 |
2.3.3 植物病害土壤微生物分离 | 第11页 |
2.3.4 细菌和放线菌基因组DNA提取 | 第11页 |
2.3.5 真菌基因组DNA提取 | 第11页 |
2.3.6 PCR(细菌,放线菌16s rRNA,真菌ITS均为通用引物) | 第11-12页 |
2.3.7 16S rRNA,ITS测序 | 第12页 |
3 实验结果及讨论 | 第12-14页 |
3.1 高温堆料分离菌株 | 第12页 |
3.2 盐碱地分离得到的菌株 | 第12-13页 |
3.3 从祁连山冻土中分离得到菌株 | 第13页 |
3.4 从病株根际土分离得到的菌株 | 第13-14页 |
4 结论 | 第14-15页 |
第二部分 生防链霉菌W68监测体系的构建 | 第15-43页 |
1 文献综述 | 第15-21页 |
1.1 植物病原真菌及其危害 | 第15-16页 |
1.1.1 植物真菌病害以及病原真菌 | 第15页 |
1.1.2 病原真菌致病机制 | 第15-16页 |
1.1.3 小麦根腐病菌 | 第16页 |
1.2 植物病害的防治 | 第16-19页 |
1.2.1 传统的防治措施 | 第16-17页 |
1.2.2 生物防治 | 第17页 |
1.2.3 生防制剂 | 第17-18页 |
1.2.4 链霉菌与生物防治 | 第18-19页 |
1.3 增强型绿色荧光蛋白(EGFP)研究现状 | 第19-20页 |
1.3.1 GFP,EGFP简介 | 第19-20页 |
1.3.2 GFP在微生物中的应用 | 第20页 |
1.4 土壤中微生物检测方法 | 第20-21页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第21页 |
2 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 试验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 供试菌株 | 第21-22页 |
2.1.2 培养基 | 第22页 |
2.1.3 试剂 | 第22页 |
2.1.4 仪器 | 第22-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-31页 |
2.2.1 分离纯化,链霉菌基因组DNA提取,16s rRNA鉴定 | 第24-25页 |
2.2.2 PDR4-EGFP的构建及结合转移 | 第25-28页 |
2.2.3 W68-EGFP验证 | 第28-29页 |
2.2.4 链霉菌对植物的侵染及检测 | 第29-31页 |
3 技术路线 | 第31页 |
4 实验结果 | 第31-40页 |
4.1 W68的分离与形态观察 | 第31-32页 |
4.2 W68-EGFP菌株的构建 | 第32-35页 |
4.2.1 PDR4-EGFP质粒的构建及验证 | 第32-34页 |
4.2.2 W68-EGFP的构建以及验证 | 第34-35页 |
4.3 W68-EGFP荧光观察及遗传稳定性 | 第35-37页 |
4.4 W68-EGFP与W68的理化性质分析 | 第37-38页 |
4.5 W68-EGFP与W68抑菌活性比较 | 第38-39页 |
4.6 W68-EGFP在植物中的动态 | 第39-40页 |
5 讨论 | 第40-42页 |
6 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
ABSTRACT | 第47页 |
致谢 | 第49页 |