| 摘要 | 第4-9页 |
| abstract | 第9-14页 |
| 英文缩略词表 | 第20-21页 |
| 第1章 文献综述三磷酸腺苷酶家族蛋白2（ATAD2）在结肠癌恶性进展中研究的潜在价值 | 第21-35页 |
| 1.1 结肠癌 | 第21-22页 |
| 1.2 细胞增殖与周期蛋白对肿瘤恶性增殖的意义 | 第22-25页 |
| 1.2.1 PI3K/Akt信号转导通路 | 第22-24页 |
| 1.2.2 细胞周期蛋白 | 第24-25页 |
| 1.3 上皮间质转化（EMT）对肿瘤侵袭转移的意义 | 第25-27页 |
| 1.3.1 EMT形成机制 | 第26页 |
| 1.3.2 EMT相关因子 | 第26-27页 |
| 1.4 ATAD2在肿瘤发生发展中的作用 | 第27-30页 |
| 1.4.1 ATAD2与肿瘤恶性表型 | 第28-29页 |
| 1.4.2 ATAD2与肿瘤临床预后 | 第29-30页 |
| 1.4.3 ATAD2作为肿瘤治疗靶标的可能性 | 第30页 |
| 1.5 基因治疗 | 第30-32页 |
| 1.6 本论文的研究目的、研究内容与展望 | 第32-35页 |
| 1.6.1 研究目的 | 第32页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第32-34页 |
| 1.6.3 研究展望 | 第34-35页 |
| 第2章 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞增殖及细胞周期的影响 | 第35-67页 |
| 前言 | 第35页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 2.1.1 主要仪器及设备 | 第35-36页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第36-38页 |
| 2.1.3 细胞株 | 第38页 |
| 2.1.4 载体质粒 | 第38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-52页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.2.2 p RNA-H1.1- sh ATAD2重组表达载体的构建 | 第39-41页 |
| 2.2.3 p RNA-H1.1- sh ATAD2重组表达载体稳定转染结肠癌细胞 | 第41-49页 |
| 2.2.4 CCK8检测细胞增殖情况 | 第49页 |
| 2.2.5 克隆形成实验检测细胞增殖能力变化 | 第49-50页 |
| 2.2.6 流式细胞术检测细胞周期情况 | 第50页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR检测ATAD2基因沉默对细胞增殖及周期相关基因表达变化的影响 | 第50-51页 |
| 2.2.8 Western Blot检测ATAD2基因沉默对细胞增殖及细胞周期相关基因表达变化的影响 | 第51-52页 |
| 2.3 实验结果 | 第52-62页 |
| 2.3.1 荧光定量PCR检测稳定转染p RNA-H1.1- sh ATAD2对结肠癌细胞ATAD2 m RNA表达的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.2 Western Blot检测稳定转染p RNA-H1.1- sh ATAD2对结肠癌细胞ATAD2蛋白表达的影响 | 第53-55页 |
| 2.3.3 CCK8法分析p RNA-H1.1- sh ATAD2稳定转染对结肠癌细胞增殖能力的影响 | 第55页 |
| 2.3.4 ATAD2基因沉默降低结肠癌细胞克隆形成能力 | 第55-57页 |
| 2.3.5 ATAD2基因沉默诱导结肠癌细胞周期发生阻滞 | 第57-58页 |
| 2.3.6 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞增殖相关基因表达的影响 | 第58-59页 |
| 2.3.7 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞增殖相关蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
| 2.3.8 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞周期相关基因表达的影响 | 第60-61页 |
| 2.3.9 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞周期相关蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
| 2.4 讨论 | 第62-67页 |
| 第3章 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞侵袭迁移的影响 | 第67-85页 |
| 前言 | 第67页 |
| 3.1 实验材料 | 第67-70页 |
| 3.1.1 主要仪器及设备 | 第67-68页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第68-70页 |
| 3.1.3 细胞来源 | 第70页 |
| 3.2 实验方法 | 第70-75页 |
| 3.2.1 细胞划痕实验 | 第70页 |
| 3.2.2 Transwell实验 | 第70-71页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR检测ATAD2基因沉默对结肠癌细胞侵袭转移及EMT相关基因表达的影响 | 第71-72页 |
| 3.2.4 Western Blot检测ATAD2基因沉默后结肠癌细胞侵袭转移及EMT相关蛋白表达水平的变化 | 第72-73页 |
| 3.2.5 明胶酶谱检测 | 第73-74页 |
| 3.2.6 免疫荧光检测 | 第74-75页 |
| 3.3 实验结果 | 第75-82页 |
| 3.3.1 细胞划痕实验检测ATAD2基因沉默对结肠癌细胞迁移能力的影响 | 第75-76页 |
| 3.3.2 Transwell实验检测ATAD2基因沉默后结肠癌细胞侵袭能力的变化 | 第76-77页 |
| 3.3.3 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞EMT相关基因表达的影响 | 第77-78页 |
| 3.3.4 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞EMT相关蛋白表达的影响 | 第78-79页 |
| 3.3.5 免疫荧光检测ATAD2基因沉默对结肠癌细胞E-cadherin、Vimentin表达的影响 | 第79-80页 |
| 3.3.6 ATAD2基因沉默对结肠癌细胞基质金属蛋白酶表达活性的影响 | 第80-82页 |
| 3.4 讨论 | 第82-85页 |
| 第4章 ATAD2沉默对结肠癌体内移植瘤形成的影响 | 第85-99页 |
| 前言 | 第85页 |
| 4.1 实验材料 | 第85-87页 |
| 4.1.1 主要仪器及设备 | 第85-86页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第86-87页 |
| 4.1.3 细胞株 | 第87页 |
| 4.1.4 实验动物 | 第87页 |
| 4.2 实验方法 | 第87-92页 |
| 4.2.1 裸鼠成瘤 | 第87-88页 |
| 4.2.2 绘制瘤体生长曲线 | 第88页 |
| 4.2.3 荧光定量PCR检测瘤体ATAD2及增殖相关基因m RNA表达情况 | 第88-89页 |
| 4.2.4 免疫组织化学检测ATAD2及增殖相关蛋白表达情况 | 第89-92页 |
| 4.3 实验结果 | 第92-96页 |
| 4.3.1 瘤体生长情况观察 | 第92-93页 |
| 4.3.2 瘤体生长曲线 | 第93-94页 |
| 4.3.3 荧光定量PCR检测瘤体ATAD2及增殖相关基因m RNA表达情况 | 第94-95页 |
| 4.3.4 免疫组织化学检测ATAD2及增殖相关蛋白表达情况 | 第95-96页 |
| 4.4 讨论 | 第96-99页 |
| 第5章 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-111页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第111-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
