PI3K/AKT/mTOR信号通路特异性抑制剂RAD001和LY294002对不同分子特征人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

【摘要】：目的：本研究通过使用P13K和mTOR的特异性抑制剂LY294002和RAD001,观察两药在体外单独及联合应用对于不同分子特征的人乳腺癌细胞增殖、周期阻滞与凋亡的影响,旨在探讨针对该通路不同靶点的联合抑制是否具有协同抗肿瘤效应,以及在不同亚型乳腺癌中此抗肿瘤效应是否存在差异。方法：体外常规培养人乳腺癌MCF-7、SK-BR-3和MDA-MB-231细胞,每株选取对数生长期细胞,分别设立空白对照组、LY294002组、RAD001组和两药联合组。采用MTT法和流式细胞术检测单药及联合用药对细胞增殖活性、周期阻滞和凋亡的影响。结果：(1)LY294002和RAD001单药均可显著抑制人乳腺癌MCF-7、SK-BR-3和MDA-MB-231细胞增殖,且呈现剂量依赖性(P0.05),其中MDA-MB-231细胞株对两药的抑制作用均敏感(P0.05)。联合用药后各细胞株抗肿瘤效应显著增加,均表现为相加效应。(2)LY294002和RAD001单药ICso均可将MCF-7、SK-BR-3和MDA-MB-231细胞阻滞在G1期(P0.05),且联合用药后各细胞株周期阻滞效果均较单药显著(P0.05),但不同细胞株间无显著差异。(3)LY294002和RAD001单药均可显著增加MCF-7、SK-BR-3和MDA-MB-231细胞的凋亡率(P0.05),但对不同细胞凋亡的影响无差异(P0.05)。联合用药后各细胞株的凋亡率较单药均显著升高,尤其是MDA-MB-231细胞株,依次为17.58%、44.28%和52.67%,并且不同细胞的凋亡率存在显著差异(P0.05)。结论：针对P13K/AKT/mTOR信号通路的靶向干预可显著抑制人乳腺癌细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导其凋亡,且通路中不同靶点联合干预的抗肿瘤效应更加显著,尤其是具有ER、PR和HER-2均阴性特征的MDA-MB-231细胞株。
【关键词】：三阴性乳腺癌 PI3K/AKT/mTOR信号通路 LY294002 RAD001 细胞增殖 细胞凋亡
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9