| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| ·稻瘟病与稻瘟菌 | 第10-12页 |
| ·稻瘟病的发生与危害 | 第10-11页 |
| ·稻瘟病菌研究与意义 | 第11页 |
| ·稻瘟病菌的侵染循环 | 第11-12页 |
| ·稻瘟病菌中脂肪酸相关基因的功能研究 | 第12-15页 |
| ·甘油的产生和黑色素的形成对附着胞膨压建立的作用 | 第12-13页 |
| ·诱导附着胞形成的信号 | 第13页 |
| ·ETF和ETFD在脂肪酸代谢和呼吸系统中扮演着重要角色 | 第13-14页 |
| ·ETF和ETFDH在高等动物中的功能研究 | 第14页 |
| ·ETF和ETFDH在真菌中的功能研究 | 第14-15页 |
| ·本课题研究的目的与意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-36页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·实验菌株、质粒载体、水稻和大麦品种 | 第17-18页 |
| ·实验室菌株 | 第17页 |
| ·常用质粒载体 | 第17页 |
| ·水稻和大麦的品种 | 第17-18页 |
| ·培养基、抗生素、试剂和溶液的配制 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·抗生素 | 第18-19页 |
| ·溶液 | 第19页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-24页 |
| ·菌株和培养条件 | 第20页 |
| ·载体的构建 | 第20-22页 |
| ·真菌的转化实验和验证 | 第22-23页 |
| ·致病性测定 | 第23页 |
| ·附着胞萌发实验 | 第23页 |
| ·透射电子显微镜(TEM)观察 | 第23-24页 |
| ·DAB着色 | 第24页 |
| ·总的脂肪酸和ATP含量的测定 | 第24页 |
| ·常规PCR反应 | 第24-27页 |
| ·PCR反应体系和程序 | 第24-25页 |
| ·菌落PCR反应体系和程序 | 第25-26页 |
| ·TAIL-PCR | 第26-27页 |
| ·引物的设计 | 第26页 |
| ·反应体系和程序 | 第26-27页 |
| ·质粒DNA、基因组DNA的制备 | 第27-30页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第27页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第27-29页 |
| ·基因组DNA小量快速提取方法 | 第27-28页 |
| ·基因组DNA的快速提取 | 第28-29页 |
| ·常规DNA酶切体系 | 第29页 |
| ·胶回收 | 第29页 |
| ·DNA片段的连接 | 第29-30页 |
| ·细菌和真菌转化 | 第30-32页 |
| ·农杆菌介导的T-DNA转化 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌的细菌转化 | 第31页 |
| ·稻瘟菌的原生质体的制备与转化 | 第31-32页 |
| ·基因组DNA Southern杂交实验 | 第32-36页 |
| ·模板DNA探针的标记和杂交液的制备 | 第32-33页 |
| ·基因组DNA消化、电泳和变性 | 第33-34页 |
| ·基因组DNA的转膜 | 第34页 |
| ·杂交 | 第34-35页 |
| ·显色反应 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-61页 |
| ·ETF和ETFDH突变体的获得与鉴定 | 第36-39页 |
| ·ETF和ETFDH突变体在营养生长和分生孢子形成上的缺陷 | 第39-42页 |
| ·ETF和ETFDH突变体在脂肪酸代谢方面的缺陷 | 第42-45页 |
| ·ETF和ETFDH突变体在致病性上的缺陷 | 第45-48页 |
| ·ETF和ETFDH突变体附着胞膨压的降低 | 第48-51页 |
| ·ETF和ETFDH突变体对寄主的氧化胁迫更敏感 | 第51-55页 |
| ·ETF和ETFDH在稻瘟菌中定位于细胞内线粒体 | 第55-58页 |
| ·ETF突变体ATP合成能力的降低 | 第58-59页 |
| ·ETF突变体有脂肪体大量积累 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| ·稻瘟菌中ETF和ETFDH基因对其脂肪酸代谢影响的分析 | 第61-62页 |
| ·突变体附着胞侵入失败原因的分析 | 第62页 |
| ·突变体失去侵染寄主细胞能力的分析 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 附录 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
