转基因克隆兔的相关研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 1 绪论 | 第9-13页 |
| ·体细胞核移植技术的发展趋势 | 第9页 |
| ·影响体细胞核移植的效率的因素 | 第9页 |
| ·兔供体细胞代数对克隆效率的影响的研究 | 第9-10页 |
| ·转基因动物的前景 | 第10页 |
| ·转基因效率的影响因素 | 第10页 |
| ·为转基因克隆兔建立一个合适的供体细胞筛选体系 | 第10-11页 |
| ·传统的冷冻方法 | 第11页 |
| ·胚胎冷冻的研究进展 | 第11页 |
| ·玻璃化冷冻的出现 | 第11-12页 |
| ·玻璃化冷冻的进展 | 第12页 |
| ·玻璃化冷冻在兔胚胎冻存中的应用 | 第12-13页 |
| 2 体细胞核移植的研究 | 第13-20页 |
| ·材料与方法 | 第13-16页 |
| ·实验材料 | 第13-14页 |
| ·试剂 | 第13页 |
| ·实验动物 | 第13-14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-16页 |
| ·供体细胞准备 | 第14页 |
| ·MⅡ期卵母细胞准备 | 第14页 |
| ·核移植操作和重构胚的激活 | 第14-16页 |
| ·克隆胚胎的体外培养和观察 | 第16页 |
| ·胚胎移植、剖腹产及护理 | 第16页 |
| ·数据处理 | 第16页 |
| ·实验结果 | 第16-18页 |
| ·细胞的培养 | 第16页 |
| ·不同代数供体细胞克隆胚胎的体外发育 | 第16-17页 |
| ·不同代数供体细胞克隆胚胎的体内发育 | 第17-18页 |
| ·讨论 | 第18-19页 |
| ·本章小结 | 第19-20页 |
| 3 兔成纤维细胞基因转染的研究 | 第20-25页 |
| ·材料和方法 | 第20页 |
| ·细胞培养试剂 | 第20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·试验仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-22页 |
| ·质粒的提取 | 第20页 |
| ·DMEM/F12同化培养基的制备 | 第20-21页 |
| ·基因转染用细胞的准备 | 第21页 |
| ·原代细胞计数 | 第21页 |
| ·选择合适密度的细胞转染 | 第21页 |
| ·基因转染后细胞换液和梯度稀释 | 第21页 |
| ·转基因细胞系的PCR鉴定 | 第21-22页 |
| ·实验结果 | 第22-24页 |
| ·兔成纤维细胞基因转染后筛选的结果统计 | 第22-23页 |
| ·转基因单克隆PCR鉴定 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24页 |
| ·结论 | 第24-25页 |
| 4 转基因胚胎玻璃化冻存的研究 | 第25-32页 |
| ·材料和方法 | 第25页 |
| ·实验用试剂 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·供体的超排处理和胚胎的体外收集选择 | 第25-26页 |
| ·玻璃化冷冻的程序 | 第26页 |
| ·胚胎复苏 | 第26-27页 |
| ·复苏胚胎移植 | 第27页 |
| ·统计学分析 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-30页 |
| ·复苏胚胎的体外发育 | 第28页 |
| ·复苏胚胎的体内发育 | 第28-29页 |
| ·PCR及琼脂糖凝胶电泳结果 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-39页 |
| 附录 | 第39-41页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
