摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
1 绪论 | 第11-17页 |
·研究背景与意义 | 第11-15页 |
·东亚飞蝗 | 第11页 |
·昆虫性别决定 | 第11-13页 |
·昆虫 Sex-lethal 基因 | 第13-15页 |
·研究目的和整体思路 | 第15-16页 |
·研究目的 | 第15页 |
·整体思路 | 第15-16页 |
·本研究的创新性 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-29页 |
·材料 | 第17-18页 |
·供试昆虫 | 第17页 |
·菌株 | 第17页 |
·主要仪器设备 | 第17-18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·部分溶液配制 | 第18-19页 |
·东亚飞蝗的饲养与日常管理 | 第19页 |
·东亚飞蝗的饲养设备和饲料 | 第19页 |
·蝗卵的孵化和保存 | 第19页 |
·东亚飞蝗的室内环境控制以及环境卫生 | 第19页 |
·东亚飞蝗性别决定基因的克隆 | 第19页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因全长 cDNA 序列的克隆 | 第19-24页 |
·总 RNA 的提取和 cDNA 的制备 | 第19-20页 |
·3’RACE 法克隆 Sxl 的 3’端 cDNA 序列 | 第20-21页 |
·5’RACE 法克隆 Sxl 的 5’端 cDNA 序列 | 第21-23页 |
·PCR 产物的回收、克隆、检测和测序 | 第23-24页 |
·东亚飞蝗 Sex-lethal 基因序列分析和多序列比对 | 第24页 |
·东亚飞蝗 Sex-lethal 基因不同组织、不同发育时期表达分析 | 第24-27页 |
·东亚飞蝗的不同组织、不同发育时期样品选取 | 第25页 |
·东亚飞蝗不同发育时期不同组织 RNA 提取 | 第25-26页 |
·东亚飞蝗胚胎时期 cDNA 的制备 | 第26页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因特异引物的设计 | 第26页 |
·内参基因的选择和引物的设计 | 第26页 |
·实时荧光定量 PCR 的步骤 | 第26-27页 |
·实时荧光定量 PCR 的结果分析 | 第27页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因的功能探讨 | 第27-29页 |
·dsRNA 的合成 | 第27-28页 |
·RNAi 设计 | 第28页 |
·RNAi 注射效果检测 | 第28页 |
·RNAi 观察指标 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-41页 |
·东亚飞蝗性别决定的鉴定 | 第29-30页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因片段的分析 | 第30页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因的全长 cDNA 的克隆 | 第30-31页 |
·Sxl 基因的生物信息学分析 | 第31-37页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因的表达分析 | 第37-38页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因在不同组织的表达 | 第37-38页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因在不同发育时期的表达 | 第38页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因 RNAi 分析 | 第38-41页 |
·Sxl 基因 RNAi 效果分析 | 第38-39页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因 RNAi 结果分析 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-45页 |
·东亚飞蝗 Sxl 基因结构特点 | 第41-42页 |
·半定量 PCR 和荧光定量 PCR 技术在基因表达水平研究中的应用 | 第42-43页 |
·荧光定量 PCR 技术在基因表达水平研究中的应用 | 第42-43页 |
·Sex-lethal 基因在东亚飞蝗不同组织部位中的表达 | 第43页 |
·Sex-lethal 家族基因在东亚飞蝗精巢不同发育时期中的表达 | 第43页 |
·RNA 干扰技术进行初步的功能分析 | 第43-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
附录 A | 第52-53页 |
附录 B | 第53-57页 |
附录 C | 第57-59页 |
附录 D | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |