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东亚飞蝗Sex-lethal基因的克隆、表达及功能初步研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
1 绪论第11-17页
   ·研究背景与意义第11-15页
     ·东亚飞蝗第11页
     ·昆虫性别决定第11-13页
     ·昆虫 Sex-lethal 基因第13-15页
   ·研究目的和整体思路第15-16页
     ·研究目的第15页
     ·整体思路第15-16页
   ·本研究的创新性第16-17页
2 材料与方法第17-29页
   ·材料第17-18页
     ·供试昆虫第17页
     ·菌株第17页
     ·主要仪器设备第17-18页
     ·主要试剂第18页
   ·部分溶液配制第18-19页
   ·东亚飞蝗的饲养与日常管理第19页
     ·东亚飞蝗的饲养设备和饲料第19页
     ·蝗卵的孵化和保存第19页
     ·东亚飞蝗的室内环境控制以及环境卫生第19页
   ·东亚飞蝗性别决定基因的克隆第19页
   ·东亚飞蝗 Sxl 基因全长 cDNA 序列的克隆第19-24页
     ·总 RNA 的提取和 cDNA 的制备第19-20页
     ·3’RACE 法克隆 Sxl 的 3’端 cDNA 序列第20-21页
     ·5’RACE 法克隆 Sxl 的 5’端 cDNA 序列第21-23页
     ·PCR 产物的回收、克隆、检测和测序第23-24页
   ·东亚飞蝗 Sex-lethal 基因序列分析和多序列比对第24页
   ·东亚飞蝗 Sex-lethal 基因不同组织、不同发育时期表达分析第24-27页
     ·东亚飞蝗的不同组织、不同发育时期样品选取第25页
     ·东亚飞蝗不同发育时期不同组织 RNA 提取第25-26页
     ·东亚飞蝗胚胎时期 cDNA 的制备第26页
     ·东亚飞蝗 Sxl 基因特异引物的设计第26页
     ·内参基因的选择和引物的设计第26页
     ·实时荧光定量 PCR 的步骤第26-27页
     ·实时荧光定量 PCR 的结果分析第27页
   ·东亚飞蝗 Sxl 基因的功能探讨第27-29页
     ·dsRNA 的合成第27-28页
     ·RNAi 设计第28页
     ·RNAi 注射效果检测第28页
     ·RNAi 观察指标第28-29页
3 结果与分析第29-41页
   ·东亚飞蝗性别决定的鉴定第29-30页
   ·东亚飞蝗 Sxl 基因片段的分析第30页
   ·东亚飞蝗 Sxl 基因的全长 cDNA 的克隆第30-31页
   ·Sxl 基因的生物信息学分析第31-37页
   ·东亚飞蝗 Sxl 基因的表达分析第37-38页
     ·东亚飞蝗 Sxl 基因在不同组织的表达第37-38页
     ·东亚飞蝗 Sxl 基因在不同发育时期的表达第38页
   ·东亚飞蝗 Sxl 基因 RNAi 分析第38-41页
     ·Sxl 基因 RNAi 效果分析第38-39页
     ·东亚飞蝗 Sxl 基因 RNAi 结果分析第39-41页
4 讨论第41-45页
   ·东亚飞蝗 Sxl 基因结构特点第41-42页
   ·半定量 PCR 和荧光定量 PCR 技术在基因表达水平研究中的应用第42-43页
     ·荧光定量 PCR 技术在基因表达水平研究中的应用第42-43页
     ·Sex-lethal 基因在东亚飞蝗不同组织部位中的表达第43页
     ·Sex-lethal 家族基因在东亚飞蝗精巢不同发育时期中的表达第43页
   ·RNA 干扰技术进行初步的功能分析第43-45页
5 结论第45-46页
参考文献第46-52页
附录 A第52-53页
附录 B第53-57页
附录 C第57-59页
附录 D第59-60页
致谢第60页

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