| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-36页 |
| ·膜联蛋白研究进展 | 第15-19页 |
| ·膜联蛋白发现、命名与分类 | 第15-17页 |
| ·膜联蛋白的基本结构和参与相关的生命活动 | 第17-19页 |
| ·植物膜联蛋白研究进展 | 第19-34页 |
| ·植物膜联蛋白的发现 | 第19-20页 |
| ·植物膜联蛋白家族 | 第20-21页 |
| ·植物膜联蛋白的结构 | 第21-23页 |
| ·植物膜联蛋白在植物体内的表达和亚细胞定位 | 第23-24页 |
| ·植物膜联蛋白基因的表达调控 | 第24-30页 |
| ·植物膜联蛋白的生物学功能 | 第30-34页 |
| ·立题依据和研究意义 | 第34-36页 |
| 第二章 棉花AnnGhs基因分离鉴定和蛋白亚细胞定位 | 第36-53页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·Annexin基因的cDNA | 第36页 |
| ·菌种和质粒 | 第36页 |
| ·工具酶 | 第36页 |
| ·化学试剂 | 第36-37页 |
| ·常用培养基 | 第37页 |
| ·棉花总RNA提取试剂 | 第37-38页 |
| ·PCR扩增引物及试剂 | 第38页 |
| ·实验器材 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-44页 |
| ·基因及其编码蛋白质序列分析 | 第38页 |
| ·棉花AnnGhs基因的组织表达分析 | 第38-41页 |
| ·棉花膜联蛋白亚细胞定位分析 | 第41-44页 |
| ·结果 | 第44-51页 |
| ·4个棉花AnnGhs基因cDNA的分离和鉴定 | 第44-45页 |
| ·AnnGhs蛋白系统进化分析 | 第45-47页 |
| ·AnnGhs蛋白序列比较及结构分析 | 第47-48页 |
| ·AnnGhs基因在棉花各组织的差异表达分析 | 第48-49页 |
| ·AnnGh蛋白的亚细胞定位 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第三章 棉花膜联蛋白基因在纤维发育中的表达调控 | 第53-66页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·菌种和质粒 | 第53页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第53页 |
| ·化学试剂 | 第53页 |
| ·常用缓冲液及培养基 | 第53页 |
| ·棉花总RNA提取试剂 | 第53页 |
| ·原位杂交所用试剂 | 第53-54页 |
| ·实验器材 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·棉花培养与棉花纤维各发育时期材料收集 | 第55页 |
| ·棉花纤维的各种激素处理 | 第55页 |
| ·棉花纤维的钙离子处理 | 第55-56页 |
| ·棉花纤维各发育时期的RNA提取 | 第56页 |
| ·实时定量RT-PCR分析 | 第56页 |
| ·原位杂交分析 | 第56-59页 |
| ·实验结果 | 第59-63页 |
| ·AnnGh基因在纤维发育的表达调控 | 第59-60页 |
| ·不同激素处理对AnnGh基因在纤维中表达的影响 | 第60-61页 |
| ·不同Ca~(2+)浓度对AnnGh基因在纤维中表达的影响 | 第61-62页 |
| ·RNA原位杂交分析AnnGh基因在纤维中的特异表达 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| 第四章 棉花AnnGh3启动子活性分析 | 第66-80页 |
| ·实验材料 | 第66-67页 |
| ·植物实验材料 | 第66页 |
| ·菌种和质粒 | 第66页 |
| ·常用储存液 | 第66页 |
| ·常用缓冲液 | 第66页 |
| ·工具酶 | 第66页 |
| ·GUS染液配方 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66-67页 |
| ·实验器材 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-74页 |
| ·棉花材料的培养与收集 | 第67页 |
| ·棉花基因组gDNA的提取 | 第67页 |
| ·启动子的分离 | 第67-69页 |
| ·启动子测序与序列分析 | 第69-70页 |
| ·AnnGh3p::GUS融合表达载体的构建 | 第70-71页 |
| ·AnnGh3p::GUS的转化及转基因拟南芥的筛选及GUS染色 | 第71-74页 |
| ·实验结果 | 第74-78页 |
| ·AnnGh3基因的启动子的分离与序列分析 | 第74-76页 |
| ·AnnGh3p::GUS融合表达载体的构建和阳性植株的鉴定 | 第76页 |
| ·AnnGh3基因启动子的表达模式分析 | 第76-77页 |
| ·IAA、H_2O_2和黑暗处理能够增强AnnGh3基因启动子表达活性 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| 第五章 棉花AnnGh3蛋白与Ca~(2+)的结合活性研究 | 第80-93页 |
| ·实验材料 | 第80-81页 |
| ·菌株和载体 | 第80页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第80页 |
| ·常用储液 | 第80页 |
| ·常用缓冲液 | 第80-81页 |
| ·培养基 | 第81页 |
| ·其他试剂 | 第81页 |
| ·实验仪器 | 第81-82页 |
| ·实验方法 | 第82-86页 |
| ·AnnGh3蛋白序列分析 | 第82页 |
| ·pMal-AnnGh3融合表达载体的构建 | 第82-83页 |
| ·AnnGh3蛋白的预表达 | 第83-84页 |
| ·上清蛋白样品的制备 | 第84页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第84-85页 |
| ·纯化MBP-AnnGh3和MBP蛋白 | 第85-86页 |
| ·MBP-AnnGh3融合蛋白与Ca~(2+)结合胶迁移实验 | 第86页 |
| ·AnnGh3蛋白与Ca~(2+)结合胶迁移实验 | 第86页 |
| ·MBP-AnnGh3融合蛋白加入Ca~(2+)的荧光猝灭实验 | 第86页 |
| ·实验结果 | 第86-91页 |
| ·AnnGh3蛋白序列分析 | 第86页 |
| ·重组质粒pMal-AnnGh3载体构建及鉴定 | 第86-87页 |
| ·AnnGh3蛋白的预表达 | 第87-88页 |
| ·MBP-AnnGh3的纯化 | 第88-89页 |
| ·Ca~(2+)结合胶迁移实验 | 第89-90页 |
| ·MBP-AnnGh3蛋白与Ca~(2+)的荧光猝灭实验 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| 第六章 AnnGh3在转基因拟南芥中的功能研究 | 第93-102页 |
| ·实验材料 | 第93-94页 |
| ·植物材料 | 第93页 |
| ·菌种和质粒 | 第93页 |
| ·工具酶 | 第93页 |
| ·常用储存液 | 第93页 |
| ·常用缓冲液 | 第93页 |
| ·培养基 | 第93页 |
| ·拟南芥总RNA提取试剂 | 第93页 |
| ·拟南芥gDNA提取试剂 | 第93-94页 |
| ·PCR扩增分析试剂 | 第94页 |
| ·仪器设备 | 第94页 |
| ·实验方法 | 第94-97页 |
| ·AnnGh3过量表达载体构建 | 第94页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第94页 |
| ·过量表达AnnGh3转基因拟南芥在基因组水平的鉴定 | 第94-95页 |
| ·过量表达AnnGh3转基因拟南芥在mRNA表达水平的鉴定 | 第95-96页 |
| ·拟南芥莲座叶表皮毛表型观察及数量统计 | 第96-97页 |
| ·拟南芥莲座叶表皮毛长度测量 | 第97页 |
| ·结果与分析 | 第97-100页 |
| ·过量表达AnnGh3转基因拟南芥鉴定 | 第97页 |
| ·AnnGh3基因对于拟南芥莲座叶表皮毛表型的影响 | 第97-100页 |
| ·讨论 | 第100-102页 |
| 第七章 植物树脂半薄切片染色方法的改进 | 第102-110页 |
| ·引言 | 第102-103页 |
| ·实验材料 | 第103页 |
| ·植物材料 | 第103页 |
| ·化学试剂 | 第103页 |
| ·培养基 | 第103页 |
| ·实验仪器 | 第103-104页 |
| ·实验方法 | 第104-105页 |
| ·实验结果 | 第105-108页 |
| ·植物树脂半薄切片相关方法的改进 | 第105页 |
| ·双子叶植物棉花组织的树脂半薄切片观察 | 第105-107页 |
| ·单子叶植物玉米茎树脂半薄切片观察 | 第107-108页 |
| ·讨论 | 第108-110页 |
| 结论 | 第110-111页 |
| 本论文的主要创新点 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-126页 |
| 氨基酸的中英文名称及简写符号 | 第126-127页 |
| 縮写词表 | 第127-129页 |
| 博士期间撰写和发表的学术论文 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130页 |
