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表达鸭肝炎病毒VP0蛋白重组鸭瘟病毒的构建

摘要第2-3页
Abstract第3页
缩略词表第5-8页
第1章 绪论第8-15页
    1.1 鸭病毒性肝炎的概述第8-10页
        1.1.1 DHAV -1 流行特点第8页
        1.1.2 DHAV-1 的病原学特点第8-9页
        1.1.3 DHAV-1 结构蛋白及其功能第9-10页
        1.1.4 DHAV-1 疫苗的研究进展第10页
    1.2 鸭病毒性肠炎概述第10-13页
        1.2.1 病原学特性第10-11页
        1.2.2 鸭病毒性肠炎的流行病学第11页
        1.2.3 鸭病毒性肠炎的基因组结构第11-12页
        1.2.4 鸭病毒性肠炎的主要症状和病理变化第12页
        1.2.5 鸭病毒性肠炎的防治第12页
        1.2.6 鸭病毒性肠炎作为疫苗载体的研究进展第12-13页
    1.3 Gateway技术第13-14页
        1.3.1 Gateway技术原理第13页
        1.3.2 Gateway技术的优点第13-14页
        1.3.3 Gateway技术的应用第14页
    1.4 研究的目的及意义第14-15页
第2章 DHV-VP0蛋白原核表达载体的构建及血清的制备第15-26页
    2.1 实验材料第15页
        2.1.1 菌株、质粒和实验动物第15页
        2.1.2 材料和试剂第15页
    2.2 实验方法第15-21页
        2.2.1 载体的构建第15-17页
        2.2.2 pET30a-VP0质粒的提取第17-18页
        2.2.3 pET30a-VP0质粒的表达第18-19页
        2.2.4 多克隆抗体的制备第19-20页
        2.2.5 间接ELISA测定抗体效价第20页
        2.2.6 VP0多抗血清特异性检测第20-21页
        2.2.7 VP0多抗血清的纯化第21页
    2.3 实验结果第21-24页
        2.3.1 pET30a-VP0载体的鉴定第21-22页
        2.3.2 VP0蛋白的鉴定及纯化第22-23页
        2.3.3 多克隆抗体的鉴定第23-24页
    2.4 小结与讨论第24-26页
第3章 表达鸭肝炎病毒VP0蛋白重组鸭瘟病毒的构建第26-37页
    3.1 实验材料第26页
        3.1.1 菌株、质粒及细胞第26页
        3.1.2 主要试剂和培养基第26页
        3.1.3 主要仪器设备第26页
    3.2 实验方法第26-32页
        3.2.1 重组F粘粒的构建第26-28页
        3.2.2 电转化感受态的制备第28页
        3.2.3 电转化连接产物第28页
        3.2.4 鸡胚成纤维细胞的制作第28-29页
        3.2.5 F粘粒的提取及酶切后纯化第29-30页
        3.2.6 rDEV-VP0重组病毒的拯救第30页
        3.2.7 重组病毒的鉴定第30-31页
        3.2.8 重组病毒的遗传稳定性第31-32页
        3.2.9 重组病毒生长曲线的测定第32页
    3.3 结果第32-35页
        3.3.1 2-UL41-VP0重组载体鉴定第32页
        3.3.2 重组病毒鉴定结果第32-34页
        3.3.3 遗传稳定性检测第34页
        3.3.4 生长曲线测定结果第34-35页
    3.4 小结与讨论第35-37页
        3.4.1 疱疹病毒作为重组病毒载体的研究进展第35页
        3.4.2 重组病毒的鉴定第35-37页
第4章 表达鸭肝炎病毒VP0蛋白重组鸭瘟病毒在雏鸭体内的免疫学特性研究第37-45页
    4.1 材料和方法第37-39页
        4.1.1 细胞、疫苗及动物第37页
        4.1.2 实验动物分组第37页
        4.1.3 免疫攻毒实验第37页
        4.1.4 中和实验的测定第37-38页
        4.1.5 组织病毒基因组的提取第38-39页
        4.1.6 荧光定量PCR检测第39页
    4.2 结果第39-44页
        4.2.1 免疫攻毒实验结果第39-40页
        4.2.2 中和试验结果第40-41页
        4.2.3 荧光定量检测结果第41-44页
    4.3 小结与讨论第44-45页
第5章 全文结论第45-46页
参考文献第46-51页
致谢第51-52页
攻读硕士期间发表的学术论文第52-53页

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