摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
缩略词表 | 第5-8页 |
第1章 绪论 | 第8-15页 |
1.1 鸭病毒性肝炎的概述 | 第8-10页 |
1.1.1 DHAV -1 流行特点 | 第8页 |
1.1.2 DHAV-1 的病原学特点 | 第8-9页 |
1.1.3 DHAV-1 结构蛋白及其功能 | 第9-10页 |
1.1.4 DHAV-1 疫苗的研究进展 | 第10页 |
1.2 鸭病毒性肠炎概述 | 第10-13页 |
1.2.1 病原学特性 | 第10-11页 |
1.2.2 鸭病毒性肠炎的流行病学 | 第11页 |
1.2.3 鸭病毒性肠炎的基因组结构 | 第11-12页 |
1.2.4 鸭病毒性肠炎的主要症状和病理变化 | 第12页 |
1.2.5 鸭病毒性肠炎的防治 | 第12页 |
1.2.6 鸭病毒性肠炎作为疫苗载体的研究进展 | 第12-13页 |
1.3 Gateway技术 | 第13-14页 |
1.3.1 Gateway技术原理 | 第13页 |
1.3.2 Gateway技术的优点 | 第13-14页 |
1.3.3 Gateway技术的应用 | 第14页 |
1.4 研究的目的及意义 | 第14-15页 |
第2章 DHV-VP0蛋白原核表达载体的构建及血清的制备 | 第15-26页 |
2.1 实验材料 | 第15页 |
2.1.1 菌株、质粒和实验动物 | 第15页 |
2.1.2 材料和试剂 | 第15页 |
2.2 实验方法 | 第15-21页 |
2.2.1 载体的构建 | 第15-17页 |
2.2.2 pET30a-VP0质粒的提取 | 第17-18页 |
2.2.3 pET30a-VP0质粒的表达 | 第18-19页 |
2.2.4 多克隆抗体的制备 | 第19-20页 |
2.2.5 间接ELISA测定抗体效价 | 第20页 |
2.2.6 VP0多抗血清特异性检测 | 第20-21页 |
2.2.7 VP0多抗血清的纯化 | 第21页 |
2.3 实验结果 | 第21-24页 |
2.3.1 pET30a-VP0载体的鉴定 | 第21-22页 |
2.3.2 VP0蛋白的鉴定及纯化 | 第22-23页 |
2.3.3 多克隆抗体的鉴定 | 第23-24页 |
2.4 小结与讨论 | 第24-26页 |
第3章 表达鸭肝炎病毒VP0蛋白重组鸭瘟病毒的构建 | 第26-37页 |
3.1 实验材料 | 第26页 |
3.1.1 菌株、质粒及细胞 | 第26页 |
3.1.2 主要试剂和培养基 | 第26页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
3.2 实验方法 | 第26-32页 |
3.2.1 重组F粘粒的构建 | 第26-28页 |
3.2.2 电转化感受态的制备 | 第28页 |
3.2.3 电转化连接产物 | 第28页 |
3.2.4 鸡胚成纤维细胞的制作 | 第28-29页 |
3.2.5 F粘粒的提取及酶切后纯化 | 第29-30页 |
3.2.6 rDEV-VP0重组病毒的拯救 | 第30页 |
3.2.7 重组病毒的鉴定 | 第30-31页 |
3.2.8 重组病毒的遗传稳定性 | 第31-32页 |
3.2.9 重组病毒生长曲线的测定 | 第32页 |
3.3 结果 | 第32-35页 |
3.3.1 2-UL41-VP0重组载体鉴定 | 第32页 |
3.3.2 重组病毒鉴定结果 | 第32-34页 |
3.3.3 遗传稳定性检测 | 第34页 |
3.3.4 生长曲线测定结果 | 第34-35页 |
3.4 小结与讨论 | 第35-37页 |
3.4.1 疱疹病毒作为重组病毒载体的研究进展 | 第35页 |
3.4.2 重组病毒的鉴定 | 第35-37页 |
第4章 表达鸭肝炎病毒VP0蛋白重组鸭瘟病毒在雏鸭体内的免疫学特性研究 | 第37-45页 |
4.1 材料和方法 | 第37-39页 |
4.1.1 细胞、疫苗及动物 | 第37页 |
4.1.2 实验动物分组 | 第37页 |
4.1.3 免疫攻毒实验 | 第37页 |
4.1.4 中和实验的测定 | 第37-38页 |
4.1.5 组织病毒基因组的提取 | 第38-39页 |
4.1.6 荧光定量PCR检测 | 第39页 |
4.2 结果 | 第39-44页 |
4.2.1 免疫攻毒实验结果 | 第39-40页 |
4.2.2 中和试验结果 | 第40-41页 |
4.2.3 荧光定量检测结果 | 第41-44页 |
4.3 小结与讨论 | 第44-45页 |
第5章 全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第52-53页 |