摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 肿瘤的靶向基因-病毒治疗 | 第11-34页 |
·肿瘤的基因治疗 | 第11-17页 |
·肿瘤的溶瘤病毒治疗 | 第17-23页 |
·肿瘤治疗新概念:基因-病毒治疗 | 第23-26页 |
·XAF1:一个新发现的抑癌基因 | 第26-29页 |
·不依赖于CASPASE 的程序性细胞死亡 | 第29-34页 |
第二章 溶瘤腺病毒携带XAF1 基因通过不依赖于CASPASE 的凋亡特异性地杀伤肿瘤细胞 | 第34-69页 |
前言 | 第34-36页 |
·实验材料与方法 | 第36-47页 |
·菌株、细胞及试剂 | 第36-37页 |
·质粒 | 第37-40页 |
·同源重组法构建腺病毒ZD55-Gene | 第40-41页 |
·病毒的空斑纯化、大量制备与滴度测定 | 第41-42页 |
·抽提病毒DNA(QIAamp DNA Blood Mini Kit) | 第42-43页 |
·病毒复制能力分析 | 第43页 |
·免疫荧光 | 第43页 |
·Annexin V 检测细胞凋亡 | 第43页 |
·Western blot | 第43-44页 |
·细胞存活率和CPE(细胞病变效应)实验 | 第44-45页 |
·流式细胞术检测亚二倍体峰 | 第45页 |
·制备核抽提液 | 第45页 |
·动物实验 | 第45-46页 |
·原位凋亡检测 | 第46-47页 |
·统计学处理 | 第47页 |
·研究结果 | 第47-69页 |
·重组腺病毒ZD55-XAF1 的构建和鉴定 | 第47-51页 |
·ZD55-XAF1 可诱导强大的细胞毒效应 | 第51-54页 |
·ZD55-XAF1 通过不依赖于caspase 的凋亡来杀伤肿瘤细胞 | 第54-58页 |
·过表达XAF1 不能诱导XIAP 的入核 | 第58-61页 |
·自噬不参与ZD55-XAF1诱导的细胞死亡 | 第61-62页 |
·ZD55-XAF1 对荷瘤小鼠的肿瘤生长抑制 | 第62-64页 |
·ZD55-XAF1 联合ZD55-TRAIL 的双基因-病毒治疗 | 第64-69页 |
第三章 XAF1 抗癌机制的相关研究 | 第69-85页 |
前言 | 第69-70页 |
·实验材料与方法 | 第70-77页 |
·菌株 | 第70-71页 |
·酵母双杂交系统和cDNA 文库 | 第71页 |
·质粒、质粒构建和引物 | 第71页 |
·溶液和培养基 | 第71-73页 |
·酵母的转化 | 第73页 |
·用酵母双杂交系统筛选人胸腺cDNA 文库 | 第73-74页 |
·酵母转化子β-半乳糖苷酶的活力测定 | 第74页 |
·酵母质粒的抽提 | 第74页 |
·电穿孔大肠杆菌的制备 | 第74-75页 |
·RT-PCR | 第75-76页 |
·293 细胞转染 | 第76-77页 |
·免疫荧光 | 第77页 |
·免疫共沉淀 | 第77页 |
·实验结果 | 第77-83页 |
·诱饵质粒pGBKT7-XAF1 | 第77-78页 |
·以XAF1 蛋白为诱饵在人胸腺cDNA 文库中获得了阳性cDNA 克隆 | 第78-81页 |
·PCNA 功能的初步研究 | 第81-83页 |
·讨论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-97页 |
致谢 | 第97-99页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第99-100页 |