| 中文摘要 | 第1-16页 |
| ABSTRACT | 第16-23页 |
| 符号说明 | 第23-25页 |
| 第一部分 聚L-谷氨酸/壳聚糖材料在脂肪组织工程应用的实验研究 | 第25-62页 |
| 前言 | 第25-29页 |
| 材料 | 第29-32页 |
| 方法 | 第32-41页 |
| 一、人脂肪干细胞体外成脂分化潜能的研究 | 第32-34页 |
| 1. ADSCs的分离与培养 | 第32页 |
| 2. 流式细胞术检测ADSCs分化群表面抗体的表达 | 第32-33页 |
| 3. ADSCs成骨、成脂、成软骨三向分化性能的鉴定 | 第33-34页 |
| 4. 油红O染色及定量 | 第34页 |
| 二、ADSCs于PLGA/CS支架材料体外成脂的研究 | 第34-40页 |
| 1. PLGA/CS支架材料的制备 | 第34-35页 |
| 2. ADSCs在PLGA/CS支架材料上的接种 | 第35页 |
| 3. ADSCs在PLGA/CS支架上的粘附与细胞外基质分泌的观测 | 第35页 |
| 4. DiL荧光标记观测ADSCs在PLGA/CS支架材料上的增殖情况 | 第35-36页 |
| 5. ADSCs在PLGA/CS支架材料上的生长曲线检测 | 第36页 |
| 6. PLGA/CS支架材料细胞毒性的检测 | 第36-37页 |
| 7. ADSCs接种于PLGA/CS支架材料后成脂分化的检测 | 第37-40页 |
| 三、ADSCs-PLGA/CS复合物体内成脂的研究 | 第40页 |
| 四、统计学分析 | 第40-41页 |
| 结果 | 第41-43页 |
| 一、人脂肪干细胞体外成脂分化潜能的研究 | 第41页 |
| 1. ADSCs分化群表面抗原的表达 | 第41页 |
| 2. ADSCs三向分化能力的检测 | 第41页 |
| 3. ADSCs体外成脂油红O染色及定量 | 第41页 |
| 二、ADSCs于PLGA/CS支架材料体外成脂的研究 | 第41-42页 |
| 1. ADSCs于PLGA/CS材料上的粘附、细胞外基质分泌及增值情况的检测 | 第41-42页 |
| 2. PLGA/CS支架材料的细胞毒性检测 | 第42页 |
| 3. ADSCs接种于PLGA/CS支架材料后的成脂分化的检测 | 第42页 |
| 三、体内脂肪形成及回植物体积的测定 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-46页 |
| 小结 | 第46-47页 |
| 附图表 | 第47-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 第二部分 聚L-谷氨酸/壳聚糖支架材料在构建胆管癌三维培养模型中应用的实验研究 | 第62-105页 |
| 第一节 TGF-β1诱导人胆管癌HCCC9810细胞发生上皮-间质转化的研究 | 第62-76页 |
| 前言 | 第62-63页 |
| 材料 | 第63-66页 |
| 方法 | 第66-72页 |
| 一、HCCC9810细胞培养及诱导 | 第66-67页 |
| 二、体外划痕试验 | 第67页 |
| 三、细胞免疫荧光染色 | 第67-68页 |
| 四、real-time PCR | 第68-70页 |
| 五、Western blot检测 | 第70-72页 |
| 六、统计学分析 | 第72页 |
| 结果 | 第72-73页 |
| 一、TGF-β1诱导HCCC9810细胞发生形态发生变化,移动能力增强 | 第72-73页 |
| 二、EMT各指标的蛋白水平和mRNA水平的变化 | 第73页 |
| 讨论 | 第73-75页 |
| 小结 | 第75-76页 |
| 第二节 聚L-谷氨酸/壳聚糖支架构建三维培养模型及对肿瘤生长及侵袭的影响 | 第76-85页 |
| 前言 | 第76-78页 |
| 材料 | 第78-79页 |
| 方法 | 第79-81页 |
| 一、HCCC9810细胞的培养 | 第79页 |
| 二、PLGA/CS支架材料的制备 | 第79页 |
| 三、HCCC9810细胞接种于PLGA/CS支架材料 | 第79页 |
| 四、HCCC9810细胞在PLGA/CS支架材料上的粘附和细胞外基质分泌的检测 | 第79-80页 |
| 五、DiL荧光标记观测HCCC9810细胞在PLGA/CS材料表面的增殖情况 | 第80页 |
| 六、DNA标记法检测HCCC9810细胞于PLGA/CS材料上的生长曲线 | 第80页 |
| 七、real-time PCR对细胞-材料复合物的EMT相关指标及TGF-β1的mRNA水平的检测 | 第80页 |
| 八、统计学分析 | 第80-81页 |
| 结果 | 第81页 |
| 一、HCCC9810细胞于PLGA/CS材料上粘附和生长增殖情况 | 第81页 |
| 二、PLGA/CS支架为基础的三维培养模型对HCCC9810细胞EMT各指标及TGF-β1表达的影响 | 第81页 |
| 讨论 | 第81-84页 |
| 小结 | 第84-85页 |
| 附图表 | 第85-94页 |
| 参考文献 | 第94-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 在读期间主要科研成果 | 第106-107页 |
| 附件1 文献综述 | 第107-125页 |
| 附件2 英文文章1 | 第125-149页 |
| 附件3 英文文章2 | 第149-174页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第174页 |
