酶法合成脱氧核苷酸及其类似物
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-25页 |
| ·核苷酸及其类似物简介 | 第9-10页 |
| ·核苷酸 | 第9页 |
| ·核苷酸类似物 | 第9-10页 |
| ·核苷酸及其类似物生产 | 第10-15页 |
| ·核酸降解法生产核苷酸 | 第10-11页 |
| ·发酵法生产核苷酸 | 第11页 |
| ·化学合成法生产核苷酸 | 第11-12页 |
| ·生物酶法合成核苷酸 | 第12-15页 |
| ·本课题实验思路简介 | 第15-25页 |
| ·脱氧核苷转移酶 | 第15-17页 |
| ·核苷磷酸化酶 | 第17页 |
| ·脱氧核苷激酶 | 第17-19页 |
| ·乙酸激酶 | 第19-20页 |
| ·GTP再生循环及意义 | 第20-22页 |
| ·合成路径介绍 | 第22-23页 |
| ·研究意义及步骤 | 第23-25页 |
| 第二章 重组菌构建 | 第25-35页 |
| ·材料与方法 | 第25-28页 |
| ·化学试剂及仪器 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-34页 |
| ·单基因重组菌的构建 | 第28-31页 |
| ·dCKase与ACKase串联重组菌的构建 | 第31-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 重组菌诱导表达及活性检测 | 第35-44页 |
| ·材料与方法 | 第35-38页 |
| ·试剂及器材 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-43页 |
| ·七种重组菌蛋白表达及SDS-PAGE分析 | 第38-41页 |
| ·七种重组菌蛋白酶比活力分析 | 第41-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 脱氧核苷酸及其类似物合成 | 第44-57页 |
| ·材料与方法 | 第44-46页 |
| ·试剂及仪器 | 第44-45页 |
| ·合成方法 | 第45-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-56页 |
| ·不同dCKase加入量对核苷酸产率的影响 | 第46-50页 |
| ·不同磷酸供体对核苷酸合成产率的影响 | 第50-52页 |
| ·不同GTP加入量对最终转化率的影响 | 第52-53页 |
| ·不同ACP对脱氧核苷酸产率的影响 | 第53-54页 |
| ·不同胸苷加入量对脱氧核苷酸产率的影响 | 第54-55页 |
| ·不同Mg~(2+)加入量对脱氧核苷酸产率的影响 | 第55页 |
| ·串联与非串联比较 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第五章 核苷酸及阿糖核苷酸合成 | 第57-64页 |
| ·材料与方法 | 第57-58页 |
| ·试剂及仪器 | 第57页 |
| ·合成方法 | 第57-58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-63页 |
| ·不同底物浓度对核苷酸产率的影响 | 第58-60页 |
| ·不同磷酸供体对核苷酸合成产率的影响 | 第60-61页 |
| ·不同GTP加入量对最终转化率的影响 | 第61页 |
| ·不同ACP对脱氧核苷酸产率的影响 | 第61-62页 |
| ·串联与非串联比较 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第六章 结论与展望 | 第64-67页 |
| ·结论 | 第64-65页 |
| ·展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
