摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-21页 |
1 植物抗旱育种 | 第9-14页 |
·常规育种 | 第9-10页 |
·转基因育种 | 第10-14页 |
2 水稻干旱相关基因 | 第14-20页 |
·功能基因 | 第15-16页 |
·蛋白激酶基因 | 第16-17页 |
·转录因子 | 第17-19页 |
·AP2转录因子 | 第17-18页 |
·BZIP转录因子 | 第18页 |
·Zinc finger转录因子 | 第18页 |
·MYB转录因子 | 第18页 |
·NAC转录因子 | 第18-19页 |
·渗透调节物质合成酶基因 | 第19-20页 |
3 研究目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 利用OsSINAT5基因创制转基因抗旱水稻新品系 | 第21-34页 |
1 材料与方法 | 第21-29页 |
·实验材料 | 第21-24页 |
·植物材料及生长条件 | 第21页 |
·菌株和载体 | 第21页 |
·试剂与试剂盒 | 第21-22页 |
·引物 | 第22页 |
·培养基 | 第22-24页 |
·实验方法 | 第24-29页 |
·质粒的制备 | 第24-26页 |
·感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
·质粒的转化 | 第25页 |
·质粒的提取(碱裂解法) | 第25-26页 |
·农杆菌介导的籼稻遗传转化 | 第26-27页 |
·DNA的提取(CTAB提取法) | 第27页 |
·总RNA的提取(Trizol提取法) | 第27-28页 |
·cDNA合成 | 第28页 |
·PCR分析 | 第28-29页 |
·转基因植株干旱处理 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-33页 |
·pANDA-OsSINAT5-RNAi载体的鉴定 | 第29页 |
·农杆菌介导的OsSINAT5-RNAi遗传转化 | 第29-30页 |
·潮霉素水溶液筛选OsSINAT5-RNAi转基因植株 | 第30页 |
·OsSINAT5-RNAi T_1代转基因植株的PCR分析 | 第30-31页 |
·OsSINAT5-RNAi T_2代转基因水稻的分析 | 第31-33页 |
·OsSINAT5-RNAi T_2代转基因植株的抗旱性分析 | 第31-32页 |
·OsSINAT5-RNAi T_2代转基因植株的基因型分析 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
第三章 OsSINAT5基因抗旱机制初步研究 | 第34-38页 |
1 材料与方法 | 第34-35页 |
·实验材料与试剂 | 第34-35页 |
·植物材料 | 第34页 |
·试剂与试剂盒 | 第34页 |
·引物 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35页 |
·ABA敏感度分析 | 第35页 |
·转基因植株干旱处理 | 第35页 |
·总RNA的提取及cDNA合成 | 第35页 |
·Real-time PCR分析 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-37页 |
·OsSINAT5-RNAi转基因植株体内ABA调控的抗旱途径分析 | 第35-36页 |
·OsSINAT5-RNAi转基因植株体内抗氧化途径相关基因表达分析 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-38页 |
第四章 总结与讨论 | 第38-40页 |
1 总结 | 第38页 |
2 讨论 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-48页 |
附录1:培养基母液配方 | 第48-51页 |
1 N6-B5培养基母液 | 第48页 |
2 DL3培养基母液 | 第48-49页 |
3 L3培养基母液 | 第49-50页 |
4 AA培养基母液 | 第50-51页 |
附录2:PANDA载体图谱 | 第51-53页 |
附录3:PANDA-OsSINAT5-RNAi测序结果 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-56页 |
作者简介 | 第56页 |