| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-25页 |
| 1 阿茨海默症、乙酰胆碱酯酶及其抑制剂的简介 | 第10-12页 |
| ·阿茨海默症 | 第10-11页 |
| ·乙酰胆碱酯酶 | 第11页 |
| ·乙酰胆碱酯酶抑制剂 | 第11-12页 |
| 2 乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选研究进展及存在的问题 | 第12-17页 |
| ·基于比色法的 Ellman' s 法 | 第12-14页 |
| ·薄层色谱生物自显影法 | 第14页 |
| ·荧光显色法 | 第14-15页 |
| ·液相色谱及液相色谱质谱联用技术 | 第15-17页 |
| ·高效液相色谱法 | 第15页 |
| ·超高效液相色谱法 | 第15-16页 |
| ·高效液相色谱-质谱法 | 第16-17页 |
| 3 基于色谱及质谱联用技术的天然药物中靶酶 - 乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选方法研究概述 | 第17-18页 |
| 4 靶酶固定化载体、方法及应用概述 | 第18-23页 |
| ·靶酶固定化载体 | 第18-20页 |
| ·无机载体 | 第19页 |
| ·高分子载体 | 第19-20页 |
| ·天然高分子载体材料 | 第19-20页 |
| ·合成高分子材料 | 第20页 |
| ·磁性载体材料 | 第20页 |
| ·靶酶固定化方法 | 第20-22页 |
| ·交联法 | 第20页 |
| ·表面担载法 | 第20-21页 |
| ·共价键结合法 | 第21页 |
| ·离子结合法 | 第21页 |
| ·物理吸附法 | 第21页 |
| ·包埋法 | 第21-22页 |
| ·固定化靶酶的应用 | 第22-23页 |
| ·固定化靶酶在制药上的应用 | 第22页 |
| ·固定化靶酶在食品中的应用 | 第22页 |
| ·固定化靶酶在化工中的应用 | 第22-23页 |
| ·固定化靶酶在环境中的应用 | 第23页 |
| ·固定化靶酶在生物传感器中的应用 | 第23页 |
| 5 本论文的创新点及研究意义 | 第23-25页 |
| ·本研究的创新点 | 第23-24页 |
| ·科学意义 | 第24-25页 |
| 第二章 基于固定化酶的乙酰胆碱酯酶抑制剂体外筛选模型研究 | 第25-38页 |
| 1 实验部分 | 第26-31页 |
| ·仪器与试剂 | 第26页 |
| ·样品溶液的配置和制备 | 第26-27页 |
| ·固定化 AC hE 的制备 | 第27页 |
| ·固定化酶 ACh E I s 筛选模型实验方法 | 第27-28页 |
| ·固定化 ACh E 的用量优化 | 第28页 |
| ·底物的浓度优化 | 第28页 |
| ·样品溶剂的选择 | 第28页 |
| ·固定化酶 AChEIs筛选模型的验证 | 第28页 |
| ·筛选模型技术参数评价 | 第28-30页 |
| ·信号本底比 | 第28-29页 |
| ·信号窗或特异信号 | 第29页 |
| ·信噪比 | 第29页 |
| ·信号本底变异系数 | 第29页 |
| ·Z ＇因子 | 第29-30页 |
| ·固定化 AC hE 的重复利用 | 第30页 |
| ·固定化酶筛选模型实际应用 | 第30-31页 |
| ·天然药物粗提物溶液的制备 | 第30页 |
| ·固定化AChE筛选模型特异性验证 | 第30页 |
| ·固定化AChE筛选模型的灵敏度考察 | 第30-31页 |
| 2 结果讨论 | 第31-37页 |
| ·固定化与游离态 AChE活力比较 | 第31页 |
| ·固定化酶筛选模型实验条件优化 | 第31-33页 |
| ·固定化AChEIs筛选模型的验证 | 第33-34页 |
| ·筛选模型技术参数评价分析 | 第34页 |
| ·固定化酶重复使用次数考察 | 第34-35页 |
| ·固定化酶筛选模型实际应用 | 第35-37页 |
| ·天然产物粗提物对固定化 AC hE 抑制活性比较 | 第35-36页 |
| ·固定化酶筛选模型特异性验证 | 第36-37页 |
| ·固定化酶筛选模型的灵敏度 | 第37页 |
| 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 基于固定化靶酶采用液质联用技术筛选乙酰胆碱酯酶抑制剂方法研究 | 第38-51页 |
| 1.实验部分 | 第38-40页 |
| ·主要仪器、试剂与原料 | 第38-39页 |
| ·标准溶液的配制 | 第39页 |
| ·天然药物粗提物溶液的制备 | 第39页 |
| ·LC-ESI-Trap/MS筛选AChEIs方法的建立 | 第39-40页 |
| ·LC-ESI-Trap/MS 液相色谱、质谱工作条件 | 第39页 |
| ·酶抑制剂吸附洗脱 | 第39-40页 |
| 2 结果讨论 | 第40-50页 |
| ·LC-ESI-Trap/MS筛选AChEIs方法的建立 | 第40-45页 |
| ·色谱、质谱分析条件的优化 | 第40-44页 |
| ·标准曲线的绘制及检出限 | 第44-45页 |
| ·方法的精密度 | 第45页 |
| ·毒扁豆碱和他克林在固定化AChE上洗脱方法的优化 | 第45-48页 |
| ·洗脱剂的优化 | 第45-46页 |
| ·孵育时间的优化 | 第46-47页 |
| ·孵育温度优化 | 第47页 |
| ·振荡与否 | 第47-48页 |
| ·LC-ESI-Trap/MS筛选方法实际应用 | 第48-50页 |
| ·LC-ESI-Trap/MS筛选方法特异性验证 | 第48-50页 |
| ·LC-ESI-Trap/MS筛选方法灵敏度考察 | 第50页 |
| 本章小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 缩略语注释 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
