中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-27页 |
·褐飞虱对水稻的危害 | 第11-12页 |
·RNAi的定义及其发展史 | 第12-16页 |
·RNAi的发展史 | 第12-13页 |
·RNAi的作用机制 | 第13-14页 |
·RNAi在昆虫中的定义 | 第14-16页 |
·RNAi过程中的重要因子 | 第16-18页 |
·siRNA与DICER | 第16-17页 |
·RISC | 第17-18页 |
·昆虫RNAi过程吸收机制的各组分 | 第18-21页 |
·SID-1 | 第18-20页 |
·清道夫受体 | 第20页 |
·Vacuolar H~+ ATPase | 第20页 |
·RSD-3 | 第20页 |
·依赖RNA的RNA多聚酶(RdRp) | 第20-21页 |
·半翅目中摄取dsRNA的方式及RNAi的应用 | 第21-26页 |
·微滴注射 | 第23-24页 |
·人工饲料喂养 | 第24页 |
·转基因植物喂养 | 第24-25页 |
·运用RNAi控制半翅目害虫 | 第25-26页 |
·研究的目的和意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-40页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·水稻材料 | 第27页 |
·供试昆虫 | 第27页 |
·菌株、载体与候选基因 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-40页 |
·体外转录形成dsRNA | 第28-29页 |
·dsRNA体外喂食褐飞虱 | 第29-30页 |
·褐飞虱RNA的抽提及反转录 | 第30-31页 |
·Real-time PCR相对表达量检测 | 第31页 |
·干涉载体的构建 | 第31-32页 |
·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第32页 |
·T_0代转基因植株阳性检测 | 第32页 |
·T_0代转基因植株的拷贝数检测 | 第32-34页 |
·T_0代转基因单拷贝植株的表达量检测 | 第34页 |
·单拷贝转基因T_1代家系的纯合单株筛选 | 第34页 |
·转基因苗喂食褐飞虱 | 第34-35页 |
·转基因单拷贝植株的Northern blotting检测 | 第35-40页 |
3 结果与分析 | 第40-55页 |
·dsRNA的体外合成 | 第40-42页 |
·体外喂食dsRNA后褐飞虱的死亡率统计 | 第42-44页 |
·体外喂食dsRNA后褐飞虱体内相关目的基因的表达量分析 | 第44-46页 |
·干涉载体的构建和遗传转化 | 第46页 |
·T_0代转基因植株的阳性检测 | 第46页 |
·T_0代转基因植株的拷贝数检测 | 第46-50页 |
·T_0代转基因单拷贝植株的表达量检测 | 第50页 |
·单拷贝转基因T_1代家系的纯合单株筛选 | 第50-51页 |
·转基因幼苗喂食后褐飞虱体内相关目的基因的相对表达量检测 | 第51-54页 |
·转基因单拷贝植株的Northern blotting检测 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
·关于dsRNA体外喂食褐飞虱 | 第55-56页 |
·关于转基因植株介导褐飞虱RNAi | 第56-57页 |
·体外喂食实验中褐飞虱虫源的选择 | 第57-58页 |
5 展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
附录1 农杆菌介导的遗传转化培养基配方 | 第68-72页 |
附录2 个人简历 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |