摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-31页 |
第一章 组蛋白伴侣分子 ASF1 的研究进展 | 第10-24页 |
·ASF1 蛋白的发现与命名 | 第10页 |
·ASF1 蛋白的序列与结构 | 第10-13页 |
·ASF1 的功能及生物学作用 | 第13-24页 |
·ASF1 的组蛋白伴侣分子功能 | 第13-14页 |
·ASF1 于复制过程中的核小体装配功能 | 第14-16页 |
·ASF1 与细胞内的 DNA 损伤应答 | 第16-19页 |
·ASF1 在沉默中的作用 | 第19-21页 |
·ASF1 对组蛋白基因的抑制作用 | 第21-22页 |
·ASF1 在核小体解聚和转录过程中的作用 | 第22-24页 |
第二章 卵母细胞成熟调控 | 第24-31页 |
·GV 期阻滞的维持 | 第24-27页 |
·减数分裂Ⅰ的调控 | 第27-29页 |
·减数分裂 MⅡ期阻滞 | 第29-30页 |
·卵母细胞的死亡 | 第30-31页 |
第二部分 试验研究 | 第31-53页 |
第三章 猪卵母细胞体外成熟减数分裂核进程 | 第31-37页 |
·材料方法 | 第31-33页 |
·仪器设备 | 第31-32页 |
·化学试剂 | 第32页 |
·猪卵巢获取及卵母细胞体外培养 | 第32页 |
·卵母细胞的地衣红染色 | 第32页 |
·试验设计 | 第32-33页 |
·结果 | 第33-35页 |
·猪卵母细胞减数分裂核进程 | 第33-34页 |
·猪卵母细胞体外成熟过程中核形态变化规律 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
·小结 | 第36-37页 |
第四章 猪 ASF1A 基因的克隆及其真核表达载体构建 | 第37-44页 |
·材料和方法 | 第37-40页 |
·仪器设备 | 第37-38页 |
·试剂耗材 | 第38页 |
·引物的设计与合成 | 第38页 |
·RT-PCR | 第38-39页 |
·ASF1A-T 载体连接 | 第39页 |
·pASF1A-Venus 真核表达载体构建 | 第39-40页 |
·pASF1A-Venus 转染 Hela 细胞 | 第40页 |
·体外转录 | 第40页 |
·实验结果 | 第40-42页 |
·ASF1A 基因的克隆与真核表达载体的构建 | 第40-41页 |
·pASF1A-Venus 表达载体的鉴定 | 第41-42页 |
·体外转录产物分析 | 第42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第五章 ASF1A 蛋白的表达及其在猪卵母细胞体外成熟过程中的作用 | 第44-53页 |
·材料和方法 | 第44-46页 |
·仪器设备 | 第44页 |
·材料试剂 | 第44-45页 |
·猪卵巢收集和卵丘卵母细胞复合体体外培养 | 第45页 |
·显微注射 | 第45页 |
·免疫荧光染色 | 第45页 |
·实时荧光定量 PCR 检测猪卵母细胞成熟各期 ASF1A 的表达 | 第45-46页 |
·数据统计 | 第46页 |
·结果 | 第46-50页 |
·猪卵体外成熟不同时期 ASF1A mRNA 检测 | 第46页 |
·猪卵母细胞体外成熟不同时期 ASF1A mRNA 的定量分析 | 第46-47页 |
·猪卵母细胞内 ASF1A 蛋白的表达 | 第47-48页 |
·超表达 ASF1A 对猪卵母细胞体外成熟的影响 | 第48页 |
·干扰 ASF1A 对猪卵母细胞体外成熟的影响 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53页 |
本研究的创新点和进一步研究的课题 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68页 |