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ASF1A在猪卵母细胞体外成熟过程中的作用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一部分 文献综述第10-31页
 第一章 组蛋白伴侣分子 ASF1 的研究进展第10-24页
   ·ASF1 蛋白的发现与命名第10页
   ·ASF1 蛋白的序列与结构第10-13页
   ·ASF1 的功能及生物学作用第13-24页
     ·ASF1 的组蛋白伴侣分子功能第13-14页
     ·ASF1 于复制过程中的核小体装配功能第14-16页
     ·ASF1 与细胞内的 DNA 损伤应答第16-19页
     ·ASF1 在沉默中的作用第19-21页
     ·ASF1 对组蛋白基因的抑制作用第21-22页
     ·ASF1 在核小体解聚和转录过程中的作用第22-24页
 第二章 卵母细胞成熟调控第24-31页
   ·GV 期阻滞的维持第24-27页
   ·减数分裂Ⅰ的调控第27-29页
   ·减数分裂 MⅡ期阻滞第29-30页
   ·卵母细胞的死亡第30-31页
第二部分 试验研究第31-53页
 第三章 猪卵母细胞体外成熟减数分裂核进程第31-37页
   ·材料方法第31-33页
     ·仪器设备第31-32页
     ·化学试剂第32页
     ·猪卵巢获取及卵母细胞体外培养第32页
     ·卵母细胞的地衣红染色第32页
     ·试验设计第32-33页
   ·结果第33-35页
     ·猪卵母细胞减数分裂核进程第33-34页
     ·猪卵母细胞体外成熟过程中核形态变化规律第34-35页
   ·讨论第35-36页
   ·小结第36-37页
 第四章 猪 ASF1A 基因的克隆及其真核表达载体构建第37-44页
   ·材料和方法第37-40页
     ·仪器设备第37-38页
     ·试剂耗材第38页
     ·引物的设计与合成第38页
     ·RT-PCR第38-39页
     ·ASF1A-T 载体连接第39页
     ·pASF1A-Venus 真核表达载体构建第39-40页
     ·pASF1A-Venus 转染 Hela 细胞第40页
     ·体外转录第40页
   ·实验结果第40-42页
     ·ASF1A 基因的克隆与真核表达载体的构建第40-41页
     ·pASF1A-Venus 表达载体的鉴定第41-42页
     ·体外转录产物分析第42页
   ·讨论第42-43页
   ·小结第43-44页
 第五章 ASF1A 蛋白的表达及其在猪卵母细胞体外成熟过程中的作用第44-53页
   ·材料和方法第44-46页
     ·仪器设备第44页
     ·材料试剂第44-45页
     ·猪卵巢收集和卵丘卵母细胞复合体体外培养第45页
     ·显微注射第45页
     ·免疫荧光染色第45页
     ·实时荧光定量 PCR 检测猪卵母细胞成熟各期 ASF1A 的表达第45-46页
     ·数据统计第46页
   ·结果第46-50页
     ·猪卵体外成熟不同时期 ASF1A mRNA 检测第46页
     ·猪卵母细胞体外成熟不同时期 ASF1A mRNA 的定量分析第46-47页
     ·猪卵母细胞内 ASF1A 蛋白的表达第47-48页
     ·超表达 ASF1A 对猪卵母细胞体外成熟的影响第48页
     ·干扰 ASF1A 对猪卵母细胞体外成熟的影响第48-50页
   ·讨论第50-52页
   ·小结第52-53页
结论第53页
本研究的创新点和进一步研究的课题第53-54页
参考文献第54-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页

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