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间充质干细胞与shRNA联合治疗肝损伤的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第1章 前言第12-23页
   ·HBV概述第12-16页
     ·HBV形态结构第12-13页
     ·HBV基因结构特点第13-14页
     ·HBV侵入人体的机制第14-15页
     ·病毒性肝炎的发病机理及肝损伤的形成第15-16页
   ·RNA干扰概述第16-17页
   ·MSCs概述第17-19页
   ·动物模型第19-21页
   ·本文的立体依据第21-23页
第2章 材料与方法第23-37页
   ·实验材料与常规试剂第23-26页
     ·HBV基因靶点的选择及质粒的构建第23-24页
     ·抗体第24页
     ·常规试剂的配制方法第24-26页
   ·仪器和设备第26-27页
   ·方法与相关试剂第27-37页
     ·大肠杆菌(DH5α)感受态的制备第27-28页
     ·细胞培养及转染第28-29页
     ·免疫印迹法第29页
     ·ELISA法第29页
     ·MSCs向成骨细胞分化第29-30页
     ·MSCs向肝细胞分化第30-31页
     ·茜素红染色第31页
     ·RT-PCR第31-33页
     ·肝糖原检测第33页
     ·尿素含量检测第33-34页
     ·尾静脉高压注射法建立急性乙型肝炎小鼠模型第34页
     ·CCl_4肝损伤小鼠模型的建立第34-35页
     ·乙肝病毒肝脏纤维化小鼠模型第35页
     ·小鼠脾内移植MSCs第35页
     ·AST、ALT含量的测定第35-36页
     ·天狼星红染色第36-37页
第3章 结果与讨论第37-64页
   ·shRNA表达载体体外抑制HBV复制及表达第37-43页
     ·质粒的构建第37-38页
     ·shRNA抑制HBsAg与HBeAg的表达第38-40页
     ·shRNA对HBV mRNA的降解作用第40-41页
     ·小结第41-43页
   ·shRNA表达载体体内抑制HBV复制及表达第43-48页
     ·尾静脉高压注射法注射结果第43-44页
     ·shRNA抑制HBsAg与HBeAg的表达第44-46页
     ·shRNA表达载体在体内降解HBsAg mRNA第46-47页
     ·天狼星红染色第47-48页
     ·小结第48页
   ·MSCs向成骨细胞分化第48-50页
     ·茜素红染色第49-50页
     ·小结第50页
   ·MSCs向成肝细胞分化第50-55页
     ·细胞形态变化第51页
     ·分化过程中肝特异性蛋白的表达第51-53页
     ·肝功能检测第53-54页
     ·小结第54-55页
   ·MSCs与shRNA联合治疗乙肝病毒肝脏纤维化小鼠第55-64页
     ·shRNA抑制HBsAg与HBeAg的表达第56-58页
     ·肝重/体重第58-59页
     ·ALT、AST含量检测第59-60页
     ·天狼星红染色第60-61页
     ·小结第61-64页
讨论第64-66页
结论第66-67页
参考文献第67-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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