致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1. 文献综述 | 第8-23页 |
·植物丁香假单胞菌所致病害在我国的发生概况 | 第8-9页 |
·植物病原细菌的致病机制 | 第9-14页 |
·植物病原细菌的生化致病因子 | 第9-11页 |
·植物病原细菌的胞壁降解酶 | 第9-10页 |
·植物病原细菌毒素 | 第10页 |
·植物病原细菌的激素 | 第10-11页 |
·植物病原细菌的胞外多糖(EPS) | 第11页 |
·植物病原细菌的分子致病性 | 第11-14页 |
·植物病原细菌的致病性基因 | 第11-12页 |
·植物病原细菌的TTSS | 第12-13页 |
·植物病原细菌的分子致病性的调控机制 | 第13-14页 |
·植物病原细菌hrp 基因的研究现状 | 第14-18页 |
·Hrp 基因的分布与结构 | 第14页 |
·Hrp 基因的表达与功能 | 第14-18页 |
·Hrp 基因的表达和调控 | 第14-15页 |
·Hrp 基因与无毒基因的表达 | 第15-16页 |
·Hrp 基因与harpin 蛋白的编码 | 第16-17页 |
·Hrp 基因与效应蛋白的分泌表达 | 第17-18页 |
·突变体策略在基因功能研究中的应用 | 第18-23页 |
·突变体在病原-寄主互作研究中的重要性 | 第18-21页 |
·物理诱变 | 第19页 |
·化学诱变 | 第19页 |
·转座子诱变 | 第19-20页 |
·T-DNA 插入突变 | 第20页 |
·同源重组 | 第20-21页 |
·报告基因在突变体构建中的应用与egfp 标记策略 | 第21-23页 |
2. 引言 | 第23-24页 |
3. 材料与方法 | 第24-35页 |
·供试材料 | 第24-25页 |
·供试菌株及质粒 | 第24页 |
·主要试剂及工具酶 | 第24页 |
·供试试剂盒 | 第24页 |
·缓冲溶液 | 第24-25页 |
·试验方法 | 第25-35页 |
·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种靶标基因片段的扩增 | 第25-31页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种hrpA 与hrpZ 上下游片段及egfp 基因的PCR 扩增 | 第26-28页 |
·目的片段第一次重组PCR 扩增 | 第28-29页 |
·目的片段第二次重组PCR 扩增 | 第29-30页 |
·重组目的大片段的T/A 克隆 | 第30页 |
·E.coli Jm109 化学感受态的制备(CaCl_2 法) | 第30页 |
·重组质粒转化Jm109 | 第30-31页 |
·重组质粒DNA 的提取及鉴定 | 第31页 |
·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种egfp 标记突变体的构建及筛选 | 第31-35页 |
·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种egfp 标记突变体的构建策略 | 第31-32页 |
·丁香假单胞菌番茄致病变种及烟草致病变种的双亲接合试验及突变体的筛选鉴定 | 第32-34页 |
·egfp 标记突变体致病性及过敏性测定 | 第34-35页 |
4. 结果与分析 | 第35-45页 |
·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种靶标基因片段的重组 | 第35-39页 |
·hrpA 基因和hrpZ 基因靶标目的片段的扩增及纯化 | 第35-36页 |
·目的片段第一次重组PCR 扩增及纯化 | 第36-37页 |
·目的片段第二次重组PCR 扩增及纯化 | 第37-39页 |
·目的片段的T/A 克隆及验证 | 第39-40页 |
·目的片段与自杀型质粒pKSM1 的酶切连接及验证 | 第40-42页 |
·丁香假单胞菌番茄致病变种及烟草致病变种突变体的鉴定 | 第42-45页 |
5. 结论与讨论 | 第45-48页 |
·结论 | 第45页 |
·讨论 | 第45-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
ABSTRACT | 第54-55页 |