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丁香假单胞菌番茄致病变种和烟草致病变种egfp标记突变体的构建

致谢第1-7页
摘要第7-8页
1. 文献综述第8-23页
   ·植物丁香假单胞菌所致病害在我国的发生概况第8-9页
   ·植物病原细菌的致病机制第9-14页
     ·植物病原细菌的生化致病因子第9-11页
       ·植物病原细菌的胞壁降解酶第9-10页
       ·植物病原细菌毒素第10页
       ·植物病原细菌的激素第10-11页
       ·植物病原细菌的胞外多糖(EPS)第11页
     ·植物病原细菌的分子致病性第11-14页
       ·植物病原细菌的致病性基因第11-12页
       ·植物病原细菌的TTSS第12-13页
       ·植物病原细菌的分子致病性的调控机制第13-14页
   ·植物病原细菌hrp 基因的研究现状第14-18页
     ·Hrp 基因的分布与结构第14页
     ·Hrp 基因的表达与功能第14-18页
       ·Hrp 基因的表达和调控第14-15页
       ·Hrp 基因与无毒基因的表达第15-16页
       ·Hrp 基因与harpin 蛋白的编码第16-17页
       ·Hrp 基因与效应蛋白的分泌表达第17-18页
   ·突变体策略在基因功能研究中的应用第18-23页
     ·突变体在病原-寄主互作研究中的重要性第18-21页
       ·物理诱变第19页
       ·化学诱变第19页
       ·转座子诱变第19-20页
       ·T-DNA 插入突变第20页
       ·同源重组第20-21页
     ·报告基因在突变体构建中的应用与egfp 标记策略第21-23页
2. 引言第23-24页
3. 材料与方法第24-35页
   ·供试材料第24-25页
     ·供试菌株及质粒第24页
     ·主要试剂及工具酶第24页
     ·供试试剂盒第24页
     ·缓冲溶液第24-25页
   ·试验方法第25-35页
     ·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种靶标基因片段的扩增第25-31页
       ·引物设计第25-26页
       ·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种hrpA 与hrpZ 上下游片段及egfp 基因的PCR 扩增第26-28页
       ·目的片段第一次重组PCR 扩增第28-29页
       ·目的片段第二次重组PCR 扩增第29-30页
       ·重组目的大片段的T/A 克隆第30页
       ·E.coli Jm109 化学感受态的制备(CaCl_2 法)第30页
       ·重组质粒转化Jm109第30-31页
       ·重组质粒DNA 的提取及鉴定第31页
     ·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种egfp 标记突变体的构建及筛选第31-35页
       ·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种egfp 标记突变体的构建策略第31-32页
       ·丁香假单胞菌番茄致病变种及烟草致病变种的双亲接合试验及突变体的筛选鉴定第32-34页
       ·egfp 标记突变体致病性及过敏性测定第34-35页
4. 结果与分析第35-45页
   ·丁香假单胞菌番茄致病变种与烟草致病变种靶标基因片段的重组第35-39页
     ·hrpA 基因和hrpZ 基因靶标目的片段的扩增及纯化第35-36页
     ·目的片段第一次重组PCR 扩增及纯化第36-37页
     ·目的片段第二次重组PCR 扩增及纯化第37-39页
   ·目的片段的T/A 克隆及验证第39-40页
   ·目的片段与自杀型质粒pKSM1 的酶切连接及验证第40-42页
   ·丁香假单胞菌番茄致病变种及烟草致病变种突变体的鉴定第42-45页
5. 结论与讨论第45-48页
   ·结论第45页
   ·讨论第45-48页
参考文献第48-54页
ABSTRACT第54-55页

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