| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 图名目录 | 第11-12页 |
| 表名目录 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-26页 |
| ·禽流感病毒概述 | 第13-17页 |
| ·禽流感病毒的发现及流行 | 第13页 |
| ·禽流感病毒的分类及命名 | 第13-14页 |
| ·禽流感病毒的结构和功能 | 第14-16页 |
| ·H5N1亚型禽流感病毒的特征和危害 | 第16-17页 |
| ·禽流感疫苗的研究进展 | 第17-24页 |
| ·免疫机制和研究策略 | 第17-18页 |
| ·疫苗的使用和研究现状 | 第18-19页 |
| ·免疫途径 | 第19页 |
| ·免疫佐剂 | 第19-21页 |
| ·CD40-CD40L共刺激途径 | 第21-24页 |
| ·本研究的目的 | 第24-26页 |
| 第二章 pcDNA3.1(+)-CD40真核表达载体的构建,转染验证及大量制备 | 第26-52页 |
| ·引言 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第27-31页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·载体和感受态细胞 | 第27页 |
| ·主要试剂盒 | 第27-28页 |
| ·工具酶 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要实验耗材 | 第29页 |
| ·常用溶液配制 | 第29-30页 |
| ·主要实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-44页 |
| ·提取小鼠RNA | 第31-32页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
| ·引物设计及PCR扩增反应 | 第33-34页 |
| ·PCR产物回收 | 第34-35页 |
| ·胶回收所得产物连接至pGEM-T easy载体 | 第35页 |
| ·连接产物转化 | 第35页 |
| ·阳性克隆的鉴定及测序 | 第35-36页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第36-40页 |
| ·细胞转染实验 | 第40-44页 |
| ·实验结果 | 第44-49页 |
| ·CD40基因片断PCR扩增结果 | 第44页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第44-46页 |
| ·pcDNA3.1(+)-CD40质粒与pcDNA3.1(+)-HA质粒的测序 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR检验pcDNA3.1(+)-CD40与pcDNA3.1(+)-HA在BHK细胞中的转录 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·抗原基因的选择 | 第49页 |
| ·真核表达载体的选择 | 第49-50页 |
| ·基因佐剂的选择 | 第50页 |
| ·实验过程的优化 | 第50-52页 |
| 第三章 pcDNA3.1(+)-CD40、卡介菌多糖核酸、胸腺五肽对核酸疫苗免疫效价的影响 | 第52-62页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·实验材料 | 第52-54页 |
| ·实验动物 | 第52-53页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第53页 |
| ·免疫材料 | 第53页 |
| ·酶联免疫吸附检测(ELISA)所需溶液 | 第53-54页 |
| ·淋巴细胞分离及培养用液 | 第54页 |
| ·主要仪器和设备 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-57页 |
| ·实验动物分组和免疫 | 第54-55页 |
| ·ELISA检测小鼠血清中的抗体 | 第55-56页 |
| ·小鼠脾脏分离T淋巴细胞增殖试验 | 第56-57页 |
| ·结果 | 第57-58页 |
| ·ELISA检测小鼠血清中的抗体 | 第57-58页 |
| ·小鼠脾脏T淋巴细胞增殖实验 | 第58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·不同免疫组合激发的体液免疫应答 | 第58-60页 |
| ·细胞免疫应答水平的检测 | 第60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| ·不足和展望 | 第61-62页 |
| ·不足 | 第61页 |
| ·展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录一 缩略词 | 第69-70页 |
| 附录二 测序结果 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
