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哈尔滨市鸡饲料中DON和ZEA的调查及其对鸡脾淋巴细胞毒性的影响

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-19页
   ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的毒性作用研究进展第13-15页
     ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮在国内外污染状况第13页
     ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的免疫毒性研究进展第13-14页
     ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的细胞毒性研究进展第14页
     ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的其它毒害作用第14页
     ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮与氧化应激第14-15页
   ·DNA甲基化与疾病研究进展第15-17页
     ·DNA甲基化与去甲基化第15-16页
     ·DNA甲基化与疾病第16-17页
   ·炎症损伤与免疫性疾病第17-18页
   ·研究目的与意义第18-19页
2 材料与方法第19-25页
   ·主要仪器与试剂第19-20页
     ·主要仪器第19页
     ·主要试剂第19-20页
   ·检测饲料中DON和ZEA的含量第20页
   ·淋巴细胞的提取与处理第20页
   ·检测基因组DNA总甲基化水平第20-21页
     ·DNA样品处理和色谱条件第20-21页
     ·绘制标准曲线第21页
     ·测定回收率与精密度第21页
     ·检测DNA甲基化水平第21页
   ·DNMTs和MBD2 mRNA的检测第21-23页
     ·引物设计与合成第21页
     ·鸡脾淋巴细胞总RNA的抽提第21-22页
     ·反转录反应第22页
     ·实时定量PCR扩增第22-23页
   ·炎症相关因子COX-2、NF-κB、TNF-α和iNOS mRNA的检测第23-24页
     ·引物的设计与合成第23页
     ·鸡脾淋巴细胞总RNA的抽提第23页
     ·反转录反应第23页
     ·实时定量PCR扩增第23-24页
   ·检测抗氧化指标第24页
   ·检测蛋白质羰基含量第24页
   ·数据分析第24-25页
3 结果与分析第25-38页
   ·饲料中DON和ZEA含量的检测结果第25-26页
   ·HPLC检测DNA总甲基化水平结果第26-29页
     ·淋巴细胞DNA提取结果第26-27页
     ·标准曲线的结果第27页
     ·回收率与精密度结果第27-28页
     ·样品色谱图第28页
     ·DON和ZEA单一及联合对DNA甲基化水平影响的检测结果第28-29页
   ·实时PCR检测方法的建立第29-30页
   ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2mRNA表达影响的检测结果第30-33页
     ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞DNMT1 mRNA表达影响的检测结果第30-31页
     ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞DNMT3A mRNA表达影响的检测结果第31-32页
     ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞DNMT3B mRNA表达影响的检测结果第32页
     ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞MBD2 mRNA表达影响的检测结果第32-33页
   ·脾脏淋巴细胞抗氧化功能的检测结果第33-34页
     ·脾淋巴细胞SOD活性的检测结果第33页
     ·脾淋巴细胞GSH-Px活性的检测结果第33-34页
     ·脾淋巴细胞MDA含量的检测结果第34页
   ·脾脏淋巴细胞羰基含量的检测结果第34-35页
   ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞COX-2、NF-κB、TNF-α、iNOS mRNA表达影响的检测结果第35-38页
     ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞COX-2 mRNA表达影响的检测结果第35-36页
     ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞NF-κB mRNA表达影响的检测结果第36页
     ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞TNF-α mRNA表达影响的检测结果第36-37页
     ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞iNOS mRNA表达影响的检测结果第37-38页
4 讨论第38-46页
   ·饲料中DON和ZEA毒素检测含量的分析第38-39页
   ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞DNA总甲基化水平的影响第39页
   ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、MBD2基因表达水平的影响第39-41页
   ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞抗氧化功能的影响第41-42页
   ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾脏淋巴细胞蛋白质羰基含量的影响第42-43页
   ·DON和ZEA单一及联合对鸡脾淋巴细胞COX-2、NF-κB、TNF-α和iNOS mRNA表达的影响第43-46页
5 结论第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-59页
附录第59-62页
攻读硕士期间发表的学术论文第62页

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