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葛根素特异性敲除技术方法及应用研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-14页
附录:缩略词及中英文对照表第14-16页
上篇 文献综述第16-41页
 综述一 葛根素抗炎作用研究进展第16-24页
  1 一般抗炎第16页
  2 葛根素对免疫细胞的调节作用第16-17页
  3 葛根素对热休克蛋白的影响第17-18页
  4 葛根素对粘附分子表达的调节第18-19页
  5 葛根素对肿瘤坏死因子及白介素的影响第19页
  6 葛根素对核因子-κB的调节作用第19-20页
  7 葛根素对PI3K/AKT信号通路的影响第20页
  8 葛根素对TLR4/NF-κB信号通路的调节作用第20-21页
  9 葛根素对ERK1/2信号通路的作用第21页
  参考文献第21-24页
 综述二 中药及复方药效物质基础研究模式概述第24-41页
  1 基于“还原论”的研究模式第24-33页
   ·基于正向追踪活性成分研究方式的药效物质基础研究第24-33页
   ·基于组分删除和敲入法技术的中药及复方药效物质基础研究第33页
  2 基于“整体观”的研究模式第33-35页
   ·组学技术和系统生物学第33-35页
   ·整合化学物质组学的整体系统生物学第35页
   ·天然组合化学库和多靶点作用机制第35页
  3 基于计算机虚拟筛选的研究模式第35-36页
  4 结语第36页
  参考文献第36-41页
下篇 实验研究第41-105页
 前言第41-44页
 第一章 葛根素单克隆抗体的制备第44-64页
  1 材料第44-49页
   ·实验动物第44页
   ·细胞株第44页
   ·主要试剂第44-45页
   ·主要溶液及配制第45-49页
   ·主要仪器第49页
  2 实验方法第49-55页
   ·葛根素人工抗原的合成与鉴定第49-50页
   ·免疫及效价竞争检测第50页
   ·葛根素单克隆抗体细胞株的制备第50-52页
   ·腹水制备第52页
   ·抗体纯化第52-55页
  3 实验结果第55-61页
   ·半抗原合成第55-57页
   ·免疫及血清效价第57页
   ·葛根素单克隆抗体及特异性第57-58页
   ·腹水制备及抗体纯化第58-61页
  4 讨论第61页
  参考文献第61-64页
 第二章 葛根素酶联免疫吸附法的建立第64-76页
  1 材料第64-66页
   ·主要试剂第64页
   ·主要溶液配制第64-65页
   ·主要仪器第65-66页
  2 实验方法第66-68页
   ·最佳包被原浓度确定第66页
   ·最佳一抗工作浓度的确定第66页
   ·间接ELISA法的建立第66页
   ·间接竞争ELISA第66-67页
   ·竞争抑制曲线的建立第67页
   ·准确性第67页
   ·重复性及重现性第67页
   ·加样回收率第67-68页
   ·中成药中葛根素含量的ELISA法测定第68页
   ·葛根素ELISA法与HPLC法的相关性研究第68页
  3 结果第68-73页
   ·葛根素间接竞争ELISA法的建立第68-69页
   ·标准曲线的建立第69-70页
   ·准确性、重复性、重现性第70页
   ·加样回收率第70-71页
   ·药品中葛根素含量的测定第71-72页
   ·生物药品中葛根素含量的测定第72页
   ·葛根素ELISA法与HPLC法的相关性第72-73页
  4 讨论第73页
  参考文献第73-76页
 第三章 葛根素免疫亲和层析敲除法的建立第76-93页
  1 材料第76-77页
   ·主要试剂第76页
   ·主要仪器第76页
   ·主要溶液配制第76-77页
  2 实验方法第77-84页
   ·免疫亲和层析柱的制备第77-78页
   ·葛根素免疫亲和层析敲除法的建立第78-79页
   ·免疫亲和层析柱使用条件的优化第79-81页
   ·免疫亲和层析柱性能评价方法第81-82页
   ·免疫亲和柱的性能鉴定第82-83页
   ·葛根素免疫亲和层析敲除法的HPLC指纹图谱评价第83-84页
  3 实验结果第84-91页
   ·免疫亲和层析柱的性能评价方法的建立第84-86页
   ·免疫亲和柱的使用条件的优化第86-89页
   ·免疫亲和柱的性能鉴定第89-90页
   ·敲除及洗脱样品HPLC指纹图谱的建立第90-91页
  4 讨论第91页
  参考文献第91-93页
 第四章 敲除法探讨葛根素在葛根抗炎药效中的作用第93-100页
  1 材料第93页
   ·主要试剂第93页
   ·细胞株第93页
   ·主要仪器第93页
  2 实验方法第93-94页
   ·细胞培养第93页
   ·样品制备第93页
   ·分组给药第93页
   ·硝酸还原酶法检测NO含量第93-94页
  3 结果第94-96页
   ·Pue-ext、Pue、KO-Pue对人脐静脉内皮细胞NO分泌的影响第94-96页
  4 讨论第96-97页
  参考文献第97-100页
 第五章 葛根素单克隆抗体的标记第100-105页
  1 材料第100-101页
   ·细胞株第100页
   ·主要试剂第100页
   ·主要仪器第100页
   ·主要溶液配制第100-101页
  2 实验方法第101-103页
   ·细胞培养第101-103页
   ·分组与给药第103页
   ·荧光标记第103页
  3 结果与讨论第103-105页
小结第105-106页
致谢第106-107页
简历第107-108页

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