中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
1. 树突状细胞(Dendritic cells, DCs)研究进展 | 第11-17页 |
·树突状细胞的来源和扩增 | 第11-12页 |
·树突状细胞的生物学特征 | 第12-13页 |
·DC 在免疫应答中的作用 | 第13-14页 |
·DC 抗肿瘤免疫机制 | 第14-15页 |
·DCs 靶向给药系统的研究进展 | 第15-17页 |
2. BAK 基因的研究进展 | 第17-19页 |
·Bak 基因的结构和表达 | 第17-18页 |
·BAK 基因的功能和作用机制 | 第18-19页 |
3. RNA 干扰(RNA interference, RNAi)的研究进展 | 第19-23页 |
·RNAi 的原理与特点 | 第19-20页 |
·RNAi 沉默树突状细胞 Bak 基因的应用 | 第20-21页 |
·siRNA 的载体 | 第21-23页 |
4. 本文研究的意义和目的 | 第23-26页 |
第二章 DEC-205 修饰的泊洛沙姆壳聚糖聚合物的合成 | 第26-36页 |
1. 实验材料和仪器 | 第26-27页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·实验仪器 | 第27页 |
2. 实验方法 | 第27-30页 |
·壳聚糖的纯化 | 第27页 |
·合成步骤 | 第27-29页 |
·化学结构表征 | 第29页 |
·热重分析(TGA)[74] | 第29页 |
·临界胶束浓度(CMC)的测定 | 第29-30页 |
·粒径和 Zeta 电位的测定 | 第30页 |
3. 实验结果与讨论 | 第30-35页 |
·原料及合成产物的表征 | 第30-32页 |
·热重分析结果(TGA) | 第32页 |
·聚合物溶液的临界胶束浓度(CMC) | 第32-34页 |
·聚合物胶束的粒径和 Zeta 电位 | 第34-35页 |
4. 本章小结 | 第35-36页 |
第三章 负载 siRNA 纳米胶束的制备及制剂学评价 | 第36-45页 |
1. 实验材料和仪器 | 第36-37页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·实验仪器 | 第37页 |
2. 溶液配制 | 第37页 |
3. 实验方法 | 第37-39页 |
·FAM-siRNA 标准曲线的绘制 | 第37页 |
·纳米胶束的制备与粒径分布的测定 | 第37-38页 |
·纳米胶束的形态表征 | 第38页 |
·包封率的测定 | 第38页 |
·负载 siRNA 纳米胶束的制备和解络实验[82] | 第38页 |
·siRNA 的血清稳定性实验[82] | 第38-39页 |
4. 实验结果与讨论 | 第39-43页 |
·FAM-siRNA 的标准曲线 | 第39页 |
·纳米胶束的制备与粒径分布的测定 | 第39-41页 |
·siRNA 的血清稳定性 | 第41-43页 |
5. 本章小结 | 第43-45页 |
第四章 树突状细胞对纳米胶束的摄取 | 第45-72页 |
1. 实验材料和仪器 | 第46-47页 |
·材料 | 第46-47页 |
·仪器 | 第47页 |
·实验动物 | 第47页 |
2. 溶液的配置 | 第47-48页 |
3. 实验方法 | 第48-55页 |
·小鼠髓系树突状细胞(DCs)的分离、培养和鉴定 | 第48-49页 |
·细胞毒性实验 | 第49-50页 |
·细胞摄取实验 | 第50页 |
·原子力显微镜观察纳米胶束的细胞摄取[85] | 第50-51页 |
·细胞摄取机理研究[86] | 第51页 |
·荧光显微镜观察 siRNA 内涵体逃逸实验 | 第51页 |
·Western Blot 检测 Bak 蛋白表达 | 第51-53页 |
·荧光定量 Real-Time PCR 检测 Bak 基因 mRNA 的表达[87] | 第53-55页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第55页 |
4. 实验结果 | 第55-70页 |
·DCs 的形态学观察 | 第55-57页 |
·DCs 的表型鉴定 | 第57页 |
·细胞毒性实验 | 第57-59页 |
·细胞摄取实验 | 第59-61页 |
·原子力显微镜观察纳米胶束的细胞摄取 | 第61页 |
·DCs 对纳米胶束的摄取机理研究 | 第61-63页 |
·荧光显微镜观察 siRNA 内涵体逃逸 | 第63-64页 |
·Western Blot 测定 Bak 蛋白的表达 | 第64-65页 |
·实时荧光定量 PCR 测定 Bak 基因 mRNA 的表达 | 第65-68页 |
·流式细胞仪检测 DCs 细胞凋亡 | 第68-70页 |
5. 本章小结 | 第70-72页 |
全文结论和展望 | 第72-74页 |
1. 全文结论 | 第72-73页 |
2. 展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
攻读硕士学位期间公开发表的论文 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |