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红色砂梨花青苷生物合成相关基因分离及表达研究

致谢第1-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-12页
缩略语表第12-14页
目录第14-18页
第一章 文献综述第18-42页
   ·果实花青苷的组成第18-22页
     ·花青苷的结构和种类第18-19页
     ·花青苷的合成和分布第19-20页
     ·花青苷的颜色和稳定性第20-21页
     ·花青苷的作用第21-22页
   ·花青苷生物合成途径研究进展第22-34页
     ·花青苷合成途径中的结构基因编码的相关酶第23-30页
       ·苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)第23-24页
       ·查尔酮合成酶(Chalcone Synthase,CHS)第24-26页
       ·查尔酮异构酶(Chalcone isomerase,CHI)第26页
       ·黄烷酮 3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase,F3H)第26-27页
       ·类黄烷酮 3’-羟化酶(flavanone 3’-hydroxylase,F3’H)第27-28页
       ·二氢黄酮醇-4-还原酶(Dihydroflavonol 4-reductase,DFR)第28-29页
       ·花青苷合成酶(Anthocyanin synthase,ANS)第29页
       ·类黄酮 3-O-糖基转移酶(UDP flavonoid UFGT)第29-30页
     ·花青苷合成相关转录因子第30-34页
       ·MYB第31-32页
       ·bHLH第32-33页
       ·WD40第33页
       ·转录因子协同调控第33-34页
   ·环境因素对花青苷合成的影响第34-36页
     ·光照对花青苷合成的影响第34-35页
     ·温度对花青苷合成的影响第35页
     ·其它因素对花青苷合成的影响第35-36页
   ·果实花青苷合成的调控措施第36-38页
     ·套袋处理影响果实花青苷合成的影响第36-37页
     ·其它处理影响果实花青苷合成的影响第37-38页
   ·红色梨与花青苷代谢研究进展第38-39页
   ·立题意义及研究内容第39-42页
第二章 红色砂梨花青苷生物合成相关结构基因和转录因子的分离与序列分析第42-53页
   ·材料与方法第42-46页
     ·引物设计第42-43页
     ·红色砂梨果皮总RNA的提取第43页
     ·逆转录和RT-PCR第43页
     ·基因克隆和测序第43-44页
     ·Race扩增全长第44-45页
       ·3’RACE扩增第44页
       ·5’RACE扩增第44-45页
       ·全长序列的获得第45页
     ·序列分析第45-46页
   ·结果和分析第46-51页
     ·红色砂梨花青苷合成途径中结构基因和Actin基因的分离第46页
     ·3’RACE结果和分析第46-47页
     ·5’RACE结果和分析第47页
     ·红色砂梨花青苷合成途径中结构基因序列分析第47-50页
       ·PpCHS1、PpCHI1、PpF3H1和PpANS1四个结构基因全长序列比对及系统进化分析第47-49页
       ·PpPAL1、PpDFR1和PpUFGT1三个结构基因部分序列比对及系统树分析第49-50页
     ·红色砂梨花青苷合成相关的转录因子分离和序列分析第50-51页
   ·讨论第51-53页
第三章 红色砂梨花青苷合成相关基因在不同器官及套袋处理果中的表达模式第53-70页
   ·材料和方法第53-57页
     ·试验材料第53-54页
     ·试验方法第54-57页
       ·总RNA提取第54页
       ·cDNA合成第54页
       ·引物设计第54-55页
       ·引物检测第55-56页
       ·实时定量PCR第56页
       ·统计分析第56页
       ·花青苷含量的测定第56-57页
   ·结果与分析第57-66页
     ·不同器官中花青苷含量和相关基因表达分析第57-59页
     ·结构基因在‘美人酥’去袋后的表达分析第59-61页
     ·去袋后‘美人酥’不同果面花青苷含量和相关基因的表达变化分析第61-64页
       ·不同果面花青苷含量变化第61-63页
       ·不同果面花青苷合成相关基因的表达变化第63-64页
     ·转录因子在‘美人酥’去袋着色过程中表达分析第64-66页
       ·PpMYB1在‘美人酥’去袋着色过程中表达分析第64-65页
       ·PpMYB10在‘美人酥’去袋着色过程中表达分析第65-66页
   ·讨论第66-70页
第四章 红色砂梨花青苷合成相关结构基因家族成员分离及在‘云红梨1号’去袋着色过程中的表达分析第70-92页
   ·材料和方法第71-73页
     ·试验材料第71页
     ·方法第71-73页
       ·RNA提取第71页
       ·DNase Ⅰ处理第71页
       ·逆转录第71页
       ·引物设计第71-72页
       ·RACE扩增第72页
       ·序列分析第72页
       ·定量引物设计第72-73页
       ·实时定量PCR分析第73页
       ·统计分析第73页
   ·结果与分析第73-88页
     ·结构基因家族成员分离与序列分析第73-82页
       ·PpPAL2分离与序列分析第73-74页
       ·PpCHSs分离与序列分析第74-78页
       ·PpCHIs分离与序列分析第78-79页
       ·PpDFR2分离与序列分析第79-80页
       ·PpUFGTs分离与序列分析第80-82页
     ·结构基因家族成员在‘云红梨1号’去袋着色过程中的表达分析第82-88页
       ·PpPALs在去袋着色过程中的表达分析第82页
       ·PpCHSs在去袋着色过程中的表达分析第82-84页
       ·PpCHIs在去袋着色过程中的表达分析第84-85页
       ·PpF3H1在去袋着色过程中的表达分析第85-86页
       ·PpDFRs在去袋着色过程中的表达分析第86页
       ·PpANS1在去袋着色过程中的表达分析第86-87页
       ·PpUFGs在去袋着色过程中的表达分析第87-88页
   ·讨论第88-92页
第五章 不同生态条件对‘满天红’果实品质及相关基因表达分析第92-111页
   ·材料和方法第92-96页
     ·试验材料第92-93页
     ·试验方法第93-96页
       ·温湿度记录第93页
       ·单果重测定第93页
       ·色差测定第93-94页
       ·果实硬度测定第94页
       ·可溶性固形物(TSS)测定第94页
       ·可溶性糖和淀粉的测定第94-95页
       ·花青苷的提取与测定第95页
       ·叶绿素和类胡萝卜素的提取与测定第95页
       ·总RNA提取第95页
       ·cDNA合成第95-96页
       ·引物设计第96页
       ·引物检测第96页
       ·实时定量PCR第96页
       ·统计分析第96页
   ·结果与分析第96-108页
     ·两个生态区气候条件差异第96-99页
     ·去袋后单果重和硬度变化第99页
     ·去袋后果面色泽变化第99-101页
     ·去袋后可溶性固形物(TSS)含量的变化第101页
     ·去袋后可溶性糖和淀粉含量的变化第101-102页
     ·去袋后花青苷含量的变化第102-103页
     ·去袋后叶绿素和类胡萝卜素含量的变化第103-105页
     ·花青苷合成结构基因的表达分析第105-107页
     ·花青苷合成转录因子的表达分析第107-108页
   ·讨论第108-111页
第六章 结论与展望第111-113页
参考文献第113-132页
作者简历及在学期间所取得的科研成果第132-134页

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