| 目录 | 第1-9页 |
| 致谢 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 缩略词 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-40页 |
| 第一节 Wnt信号途径 | 第17-25页 |
| ·Wnt信号途径概况 | 第17-19页 |
| ·Wnt基因和蛋白 | 第19页 |
| ·Wnt的受体 | 第19-20页 |
| ·Wnt信号转导途径 | 第20-22页 |
| ·非经典Wnt信号途径 | 第20-21页 |
| ·经典Wnt信号途径 | 第21-22页 |
| ·细胞质β-catenin的破坏复合体 | 第22-25页 |
| ·Wnt信号靶基因和反馈回路 | 第25页 |
| 第二节 进化中的Wnt信号 | 第25-30页 |
| ·无脊椎动物和果蝇发育 | 第25-26页 |
| ·爪蟾中的发展 | 第26页 |
| ·哺乳动物中的发育 | 第26-30页 |
| ·在人类疾病中的Wnt信号 | 第27-28页 |
| ·癌症Wnt信号 | 第28-30页 |
| 第三节 作用于经典Wnt途径的tankyrases治疗癌症的新靶点 | 第30-38页 |
| ·通过tankyrases抑制Wnt信号途径的广泛性 | 第32-33页 |
| ·结合Tankyrases稳定Axin的作用与抑制剂晶体结构有关 | 第33-35页 |
| ·Tankyrases耦合Axin调节Wnt信号途径与RNF146泛素化途径有关 | 第35-36页 |
| ·Tankyrases通过稳定Axin抑制经典Wnt信号途径 | 第36-38页 |
| 第四节 本研究的目的及意义 | 第38-40页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第38页 |
| ·主要研究内容 | 第38-40页 |
| 第二章 化合物migrazole调节Wnt/β-catenin途径信号转导的分子机制的研究 | 第40-55页 |
| ·材料与方法 | 第40-44页 |
| ·细胞培养 | 第40-41页 |
| ·生产条件培养基Wnt3a | 第41页 |
| ·Topflash和Lumier检测分析测定 | 第41-42页 |
| ·siRNA实验 | 第42-43页 |
| ·免疫印迹 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-53页 |
| ·在HEK293T细胞中,化合物migrazole抑制了Wnt3a相关的Topflash活性以及Wnt引起的β-catenin的稳定性 | 第44-48页 |
| ·化合物migrazole对于BMP以及其他信号途径的影响 | 第48-52页 |
| ·化合物migrazole在一些细胞中不能抑制Wnt信号途径相关的Topflash活性 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·化合物migrazole在Wnt信号途径中作用位点的模型 | 第53-54页 |
| ·化合物migrazole对于其他信号途径的作用推测 | 第54页 |
| ·小结与展望 | 第54-55页 |
| 第三章 化合物M110或21H7抑制Wnt/β-catenin途径信号转导的分子机制 | 第55-91页 |
| ·材料与方法 | 第55-57页 |
| ·细胞培养 | 第55页 |
| ·生产条件培养基Wnt3a | 第55页 |
| ·Topflash和Lumier检测分析测定 | 第55页 |
| ·免疫印迹 | 第55-56页 |
| ·反转录及实时定量QPCR分析 | 第56页 |
| ·化合物来源 | 第56-57页 |
| ·SRB生长抑制分析 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-86页 |
| ·关于筛选化合物21H7和M110的介绍 | 第57-59页 |
| ·在MDA-MB-231细胞中,化合物21H7或M110抑制了Wnt相关的Topflash活性 | 第59-62页 |
| ·在HEK293T细胞中, siPIM酶能抑制Wnt相关的Topflash活性 | 第62-67页 |
| ·在MDA-MB-231细胞中,PIM不能激活Wnt相关的Topflash活性 | 第67-71页 |
| ·在MDA-MB-231细胞中,化合物21H7或者M110可以引起hypoxia缺氧诱导因子途径中HIF1α及其目标基因VEGF和Glutl的表达 | 第71-74页 |
| ·化合物21H7/M110在Wnt信号途径中作用位点区域位于GSK3β以下 | 第74-76页 |
| ·化合物21H7和M110都可以作为铁离子螯合剂在Wnt信号途径中起作用 | 第76-78页 |
| ·化合物21H7或M110和铁离子螯合剂结合的作用是否会在Wnt信号途径中改变Axin水平 | 第78-83页 |
| ·其他铁离子螯合剂化合物在Wnt信号途径中也起作用 | 第83-84页 |
| ·SRB实验分析化合物21H7或M110对于细胞生长的抑制作用 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| ·在MDA-MB-231细胞中,化合物21H7和M110都可以引起hypoxia缺氧诱导因子途径中HIF1α表达及Wnt信号途径中与铁离子螯合剂有关的新作用位点模型设想 | 第86-88页 |
| ·化合物21H7或M110作为铁离子螯合剂的作用应用 | 第88-89页 |
| ·小结与展望 | 第89-91页 |
| 第四章 化合物XAV939在MDA-MB-231细胞中抑制Wnt/β-catenin途径信号转导的分子机制 | 第91-109页 |
| ·材料与方法 | 第91-94页 |
| ·细胞培养 | 第91页 |
| ·生产条件培养基Wnt3a | 第91页 |
| ·Topflash和Lumier检测分析测定 | 第91-92页 |
| ·免疫印迹 | 第92页 |
| ·siRNA实验 | 第92页 |
| ·反转录及实时定量QPCR分析 | 第92-93页 |
| ·SRB生长抑制分析 | 第93页 |
| ·克隆的形成和增殖实验 | 第93页 |
| ·细胞迁移实验 | 第93-94页 |
| ·结果与分析 | 第94-106页 |
| ·化合物XAV939的背景介绍 | 第94-95页 |
| ·在乳腺癌细胞中,化合物XAV939刺激增加了Axin的水平 | 第95-98页 |
| ·在乳腺癌细胞中,化合物XAV939抑制了Wnt信号转导 | 第98-101页 |
| ·在MDA-MB-231细胞中,化合物XAV939抑制了Wnt3a诱导的细胞迁移现象 | 第101-103页 |
| ·在MDA-MB-231细胞中,化合物XAV939抑制了细胞生长 | 第103-106页 |
| ·讨论 | 第106-108页 |
| ·小结与展望 | 第108-109页 |
| 第五章 小结、创新点与研究展望 | 第109-112页 |
| ·小结 | 第109页 |
| ·创新点 | 第109-110页 |
| ·研究展望 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-122页 |
| 个人简历及攻读博士学位期间取得的科研成果 | 第122-123页 |
| 附录 | 第123-133页 |
