| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第10-11页 |
| ·国内外研究进展 | 第11-18页 |
| ·精氨酸营养概述 | 第11-12页 |
| ·精氨酸的生化代谢途径 | 第11页 |
| ·精氨酸可调控细胞的生长 | 第11-12页 |
| ·精氨酸具有免疫调节作用 | 第12页 |
| ·乳腺内乳蛋白的合成及氨基酸代谢 | 第12-14页 |
| ·乳蛋白的组成 | 第12-13页 |
| ·乳蛋白的合成 | 第13页 |
| ·反刍动物乳腺内氨基酸的代谢 | 第13-14页 |
| ·氨基酸对乳蛋白合成的调控 | 第14-17页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞体外培养及其应用 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18-20页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的体外培养 | 第18页 |
| ·精氨酸对酪蛋白合成的影响 | 第18页 |
| ·精氨酸对乳腺上皮细胞生长的影响 | 第18-19页 |
| ·精氨酸对乳腺上皮细胞内酪蛋白合成以及信号转导相关基因表达的影响 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 奶牛乳腺上皮细胞的体外培养 | 第21-31页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-26页 |
| ·乳腺组织的采集 | 第21-22页 |
| ·乳腺上皮细胞的分离培养 | 第22-23页 |
| ·乳腺上皮细胞的冻存 | 第23页 |
| ·乳腺上皮细胞的复苏 | 第23页 |
| ·乳腺上皮细胞生长曲线的绘制 | 第23-24页 |
| ·乳腺上皮细胞的免疫组织化学鉴定 | 第24页 |
| ·乳腺上皮细胞的分子生物学鉴定 | 第24-26页 |
| ·RNA的提取 | 第25页 |
| ·RT-PCR检测四种酪蛋白基因的表达 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-29页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的分离培养及形态学观察 | 第26-27页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的生长曲线的绘制 | 第27-28页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的免疫组化鉴定 | 第28-29页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的分子生物学鉴定 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·乳腺上皮细胞形态学观察 | 第29页 |
| ·乳腺上皮细胞的生长特征 | 第29-30页 |
| ·乳腺上皮细胞的免疫组化鉴定 | 第30页 |
| ·乳腺上皮细胞的分子生物学鉴定 | 第30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第三章 精氨酸对乳腺上皮细胞内酪蛋白合成的影响 | 第31-38页 |
| ·试验材料 | 第31-32页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·试验方法 | 第32-34页 |
| ·无精氨酸的DMEM/F12培养基的配制 | 第32-33页 |
| ·试验设计 | 第33页 |
| ·乳腺上皮细胞总蛋白的提取 | 第33-34页 |
| ·乳腺上皮细胞内α_S-、β-酪蛋白合成量的测定 | 第34页 |
| ·统计学分析 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第四章 精氨酸对乳腺上皮细胞生长及增殖的影响 | 第38-44页 |
| ·试验材料 | 第38-39页 |
| ·仪器设备 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-40页 |
| ·试验设计 | 第39页 |
| ·台盼蓝染色计数法绘制细胞生长曲线 | 第39页 |
| ·MTT法检测细胞增殖 | 第39页 |
| ·统计学分析 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-42页 |
| ·不同精氨酸处理组的细胞生长情况 | 第40页 |
| ·不同Arg水平对乳腺上皮细胞增殖活性的影响 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·不同精氨酸处理组的细胞生长情况 | 第42-43页 |
| ·不同Arg水平对乳腺上皮细胞增殖活性的影响 | 第43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第五章 精氨酸对乳腺上皮细胞内酪蛋白合成以及信号转导相关基因表达的影响 | 第44-61页 |
| ·试验材料 | 第44-45页 |
| ·仪器设备 | 第44-45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·试验方法 | 第45-47页 |
| ·试验设计 | 第45页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第45页 |
| ·反转录反应 | 第45-46页 |
| ·Real-Time PCR反应 | 第46-47页 |
| ·统计学分析 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-59页 |
| ·各基因的Real-Time PCR的标准曲线、扩增曲线与熔解曲线 | 第47-54页 |
| ·Arg对编码乳蛋白合成相关基因表达的影响 | 第54-56页 |
| ·Arg对乳腺细胞中信号转导相关基因表达的影响 | 第56-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·Arg对编码乳蛋白合成相关基因表达的影响 | 第59页 |
| ·Arg对乳腺细胞中信号转导相关基因表达的影响 | 第59页 |
| ·小结 | 第59-61页 |
| 第六章 全文总体讨论与结论 | 第61-65页 |
| ·全文讨论 | 第61-62页 |
| ·全文结论 | 第62-63页 |
| ·研究的创新点 | 第63-64页 |
| ·有待进一步研究的问题 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第72-73页 |
