| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-38页 |
| 1 花生产业现状及发展前景 | 第12-13页 |
| ·国际花生产业发展现状 | 第12页 |
| ·我国花生产业发展现状与产业优势 | 第12-13页 |
| ·我国花生产业发展存在的问题及发展方向 | 第13页 |
| 2 植物油脂含量调控研究进展 | 第13-18页 |
| ·乙酰辅酶A羧化酶 | 第14-15页 |
| ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) | 第15-18页 |
| 3 植物脂肪酸合成相关酶类及编码基因研究进展 | 第18-31页 |
| ·脂肪酸的分类和功能 | 第18-21页 |
| ·饱和脂肪酸合成相关酶类及其编码基因研究进展 | 第21-23页 |
| ·脂肪酸去饱和酶及编码基因研究进展 | 第23-29页 |
| ·脂肪酸延长酶及其编码基因研究进展 | 第29-31页 |
| 4 脂肪酸代谢的遗传调控及基因工程研究 | 第31-34页 |
| ·脂肪酸链长度的遗传代谢调控及基因工程研究 | 第31-32页 |
| ·脂肪酸饱和度的遗传代谢调控及基因工程研究 | 第32页 |
| ·脂肪酸含量的遗传代谢调控及基因工程研究 | 第32-33页 |
| ·新不饱脂肪酸与其基因工程研究 | 第33-34页 |
| 5 cDNA文库的构建 | 第34-37页 |
| ·Oligo-capping法 | 第34-35页 |
| ·CAPture法 | 第35页 |
| ·SMART法 | 第35-36页 |
| ·Cap-trapper法 | 第36页 |
| ·CapSelect法 | 第36页 |
| ·Cap-jumping法 | 第36-37页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| 第二章 花生幼苗全长cDNA文库的构建 | 第38-50页 |
| 摘要 | 第38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-44页 |
| ·试验材料 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-48页 |
| ·花生幼苗总RNA的提取和mRNA的分离 | 第44-45页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第45页 |
| ·Sfi Ⅰ酶切及分级分离 | 第45-46页 |
| ·文库质量检测 | 第46页 |
| ·cDNA文库序列分析 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 花生PEPC基因家族的克隆与表达分析 | 第50-72页 |
| 摘要 | 第50-51页 |
| 1 试验材料 | 第51-52页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·菌株与主要试剂 | 第51页 |
| ·PCR引物 | 第51-52页 |
| 2 试验方法 | 第52-57页 |
| ·基因克隆 | 第52-55页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第55-57页 |
| ·生物信息学分析 | 第57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-69页 |
| ·花生PEPC基因家族的克隆与序列分析 | 第57-61页 |
| ·AhPEPC编码蛋白的功能位点与结构功能域的预测 | 第61-63页 |
| ·AhPEPCs蛋白质三级结构预测 | 第63页 |
| ·PEPC蛋白的系统进化树 | 第63-65页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第65-69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| 第四章 花生KAS Ⅱ基因的克隆及表达分析 | 第72-84页 |
| 摘要 | 第72-73页 |
| 1 试验材料 | 第73页 |
| 2 试验方法 | 第73-75页 |
| ·总RNA的提取及cDNA的合成 | 第73页 |
| ·KASⅡ基因5’、3’-引物设计与PCR扩增、克隆与测序 | 第73-74页 |
| ·KASⅡ基因完整编码区的获得及序列分析 | 第74页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第74-75页 |
| 3 结果分析 | 第75-82页 |
| ·KASⅡ基因的测序结果与序列的同源性分析 | 第75页 |
| ·编码氨基酸序列同源性分析与系统进化分析 | 第75-76页 |
| ·编码蛋白质的基本物理化学性质预测 | 第76页 |
| ·编码蛋白质的功能位点与结构域预测 | 第76-79页 |
| ·蛋白质结构预测 | 第79-80页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第80-82页 |
| 4 讨论 | 第82-84页 |
| 第五章 花生SAD基因的克隆及表达分析 | 第84-96页 |
| 摘要 | 第84-85页 |
| 1 试验材料 | 第85页 |
| 2 试验方法 | 第85-86页 |
| ·总RNA的提取及cDNA的合成 | 第85页 |
| ·SAD基因完整编码区的引物设计与PCR扩增、克隆与测序 | 第85页 |
| ·包含SAD基因完整编码区序列的分析 | 第85页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第85-86页 |
| 3 结果分析 | 第86-93页 |
| ·SAD基因的测序结果与序列的同源性分析 | 第86-88页 |
| ·编码蛋白质的基本物理化学性质预测 | 第88页 |
| ·编码蛋白质的功能位点与结构域分析 | 第88页 |
| ·蛋白质结构预测 | 第88-89页 |
| ·系统进化分析 | 第89-90页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第90-93页 |
| 4 讨论 | 第93-96页 |
| 第六章 花生FAD2B基因与高油酸性状的关系 | 第96-106页 |
| 摘要 | 第96-97页 |
| 1 试验材料 | 第97-98页 |
| ·植物材料 | 第97页 |
| ·菌株与主要试剂 | 第97页 |
| ·PCR引物 | 第97-98页 |
| 2 试验方法 | 第98-99页 |
| ·基因克隆 | 第98页 |
| ·生物信息学分析 | 第98页 |
| ·酿酒酵母表达载体的构建 | 第98页 |
| ·醋酸锂法转化酵母 | 第98-99页 |
| ·酵母酿酒酵母工程菌的转化及阳性克隆的鉴定 | 第99页 |
| ·酵母工程菌的表达及产物制备 | 第99页 |
| ·酵母工程菌脂肪酸的气相色谱(GC)分析 | 第99页 |
| 3 结果与分析 | 第99-103页 |
| ·高油酸花生△12脂肪酸脱氢酶基因的克隆及序列分析 | 第99-101页 |
| ·花生△12-脂肪酸脱氢酶基因的表达特性 | 第101页 |
| ·表达载体的构建及阳性克隆的鉴定 | 第101-102页 |
| ·花生△12脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达及产物分析 | 第102-103页 |
| 4 讨论 | 第103-106页 |
| 全文结论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-124页 |
| 攻读博士期间发表的研究论文 | 第124-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
