| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-22页 |
| ·喜树概况 | 第8页 |
| ·喜树碱的发现简史及其主要理化性质 | 第8-9页 |
| ·代谢途径 | 第9-12页 |
| ·喜树碱代谢过程中相关酶基因的表达和调控研究进展 | 第12-15页 |
| ·色氨酸合成酶 | 第12-13页 |
| ·色氨酸脱羧酶(TDC) | 第13页 |
| ·3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A 还原酶(HMGR) | 第13-14页 |
| ·异胡豆苷合成酶(STR) | 第14页 |
| ·次番木鳖苷合成酶(SLS) | 第14-15页 |
| ·相关技术概况 | 第15-18页 |
| ·TAIL-PCR 技术 | 第15-16页 |
| ·TAIL-PCR 技术的局限性 | 第16-18页 |
| ·利用接头的染色体步移技术 | 第18页 |
| ·生物信息学概述 | 第18-21页 |
| ·核酸序列分析 | 第19-20页 |
| ·蛋白质序列分析 | 第20-21页 |
| ·研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-42页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第22页 |
| ·质粒与菌株 | 第22页 |
| ·引物的设计及合成 | 第22-23页 |
| ·实验所需常用溶液、试剂及培养基的配制 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-42页 |
| ·喜树总DNA 的提取及检测 | 第24-26页 |
| ·喜树SLS 候选基因(sls-like gene) 片段的PCR 扩增 | 第26页 |
| ·喜树SLS 候选基因(sls-like gene)片段3′端和5′端的第一次染色体步移 | 第26-29页 |
| ·喜树SLS 候选基因(sls-like gene) 片段5′端的第二次染色体步移 | 第29-31页 |
| ·喜树SLS 候选基因(sls-like gene)全长DNA 的PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·喜树SLS 候选基因(sls-like gene)全长DNA 的测序 | 第32页 |
| ·喜树总RNA 的提取及检测 | 第32-34页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第34-35页 |
| ·喜树SLS 候选基因的全长cDNA 的扩增 | 第35-36页 |
| ·目的片段的回收及纯化 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·目的片段的连接及转化 | 第37-39页 |
| ·喜树sls-like 基因cDNA 全长的测序 | 第39-40页 |
| ·喜树sls-like 基因的全长cDNA 序列的生物信息学分析 | 第40-42页 |
| 第3章 结果 | 第42-75页 |
| ·喜树SLS 候选基因(sls-like gene) DNA 全长的获得 | 第42-48页 |
| ·喜树基因组DNA 的提取 | 第42页 |
| ·喜树SLS 候选基因(sls-like gene) 片段的PCR 扩增 | 第42-44页 |
| ·喜树SLS 候选基因3′端和5′端的第一次染色体步移 | 第44-45页 |
| ·喜树SLS 候选基因5′端的第二次染色体步移 | 第45-47页 |
| ·喜树SLS 候选基因(sls-like gene) 片段的拼接 | 第47页 |
| ·喜树SLS 候选基因DNA 全长测序结果 | 第47-48页 |
| ·用RT-PCR 扩增喜树SLS 候选基因的cDNA | 第48-52页 |
| ·喜树RNA 的提取 | 第48页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第48-49页 |
| ·喜树SLS 候选基因的cDNA 全长的扩增 | 第49-50页 |
| ·目的片段的连接转化与重组质粒的筛选鉴定 | 第50-52页 |
| ·喜树sls-like 基因的全长cDNA 序列的生物信息学分析 | 第52-75页 |
| ·开放阅读框(ORF)分析 | 第52-53页 |
| ·相似性和同源性分析 | 第53-56页 |
| ·一级结构分析 | 第56-61页 |
| ·二级结构和功能分析 | 第61-72页 |
| ·信号肽预测 | 第61-63页 |
| ·疏水性分析 | 第63-64页 |
| ·跨膜区分析 | 第64-65页 |
| ·蛋白质二硫键的分析 | 第65-66页 |
| ·磷酸化位点分析 | 第66页 |
| ·功能位点分析 | 第66-68页 |
| ·亚细胞定位 | 第68-69页 |
| ·功能结构域分析 | 第69-70页 |
| ·二级结构预测 | 第70-72页 |
| ·三级结构分析 | 第72-73页 |
| ·进化树构建及分析 | 第73-75页 |
| 第4章 讨论 | 第75-77页 |
| 第5章 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录1 | 第86-90页 |
| 附录2 | 第90-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
