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蛋白质的毛细管阵列液相色谱分离及相互作用新方法研究

目录第1-9页
摘要第9-12页
Abstract第12-16页
第一章 文献综述第16-56页
   ·引言第16-17页
   ·整体柱的进展及应用第17-27页
     ·整体柱的类型及制备第18-23页
       ·有机聚合物整体柱第18-19页
       ·硅胶基质整体柱第19-21页
       ·颗粒固定化整体柱第21-23页
       ·分子印迹整体柱第23页
     ·整体柱在微分离分析领域的应用第23-27页
       ·整体柱在毛细管电色谱领域的应用第23页
       ·整体柱在蛋白质组学领域的应用第23-27页
   ·多维液相色谱在蛋白质组学研究中的进展第27-32页
     ·多维液相色谱理论基础及在蛋白质组学中的应用第27-30页
     ·阵列式液相色谱的应用进展第30-32页
   ·蛋白质相互作用研究技术进展第32-40页
     ·基于分子生物学的研究方法第32-35页
       ·酵母双杂交第32-33页
       ·免疫共沉淀第33-34页
       ·化学交联第34页
       ·串联亲和纯化第34-35页
     ·基于生物物理学的研究方法第35-37页
       ·荧光共振能量转移第35-36页
       ·生物发光共振能量转移第36-37页
       ·表面等离子体共振第37页
     ·蛋白质相互作用研究方法的新进展第37-40页
       ·蛋白片段互补第37页
       ·双分子荧光互补第37-38页
       ·减量式定量免疫沉淀第38-39页
       ·蛋白质芯片第39-40页
   ·本论文选题目的与意义第40-42页
   ·参考文献第42-56页
第二章 新型蛋白质捕集柱的制备及对蛋白质的在线捕集第56-76页
   ·引言第56-58页
   ·实验部分第58-61页
     ·材料和试剂第58-59页
     ·样品制备第59页
     ·蛋白质捕集柱的制备第59页
     ·在线捕集-毛细管反相液相色谱系统的搭建第59-61页
   ·结果和讨论第61-70页
     ·蛋白质捕集柱的制备第61-62页
     ·蛋白质捕集柱的通透性与机械强度第62-64页
     ·C8捕集柱对标准蛋白的捕集第64-68页
       ·样品上样流速的影响第65页
       ·蛋白质捕集柱的负载量第65-66页
       ·蛋白质捕集柱的富集因子第66-67页
       ·盐效应对蛋白质捕集的影响第67-68页
       ·回收率和重现性第68页
     ·捕集与分离鼠肝组织第68-70页
   ·本章小结第70-71页
   ·参考文献第71-76页
第三章 多维阵列毛细管液相色谱平台的建立及对蛋白质的高通量分析第76-110页
   ·引言第76-79页
   ·实验部分第79-82页
     ·试剂与材料第79页
     ·样品制备第79页
     ·色谱柱的装填和蛋白质捕集柱的制备第79-80页
     ·阵列式两维液相色谱系统的构建第80-81页
     ·革巴上酶解第81-82页
     ·质谱鉴定和数据检索第82页
   ·结果和讨论第82-101页
     ·单通道毛细管两维液相色谱的工作原理第82-86页
     ·两维毛细管液相色谱柱的制备第86-92页
       ·毛细管液相色谱柱装填装置匀浆罐的设计第86-87页
       ·强阴离子交换色谱柱的制备及评价第87-89页
       ·毛细管反相液相色谱填料的筛选第89-92页
       ·毛细管反相液相色谱柱的制备第92页
     ·毛细管阵列液相色谱/串级质谱平台的构建第92-93页
     ·色谱柱及管路的连接第93-95页
     ·阵列式毛细管反相液相色谱柱的重现性第95-98页
     ·靶上酶解第98-99页
     ·对鼠肝蛋白的分离鉴定第99-101页
   ·本章小结第101-106页
   ·参考文献第106-110页
第四章 蛋白质相互作用新方法研究第110-122页
   ·引言第110-112页
   ·实验部分第112-115页
     ·材料和试剂第112页
     ·氨基磁球的合成与蛋白的固定第112-113页
     ·蛋白的固相荧光衍生第113-114页
       ·固相衍生反应器的制备第113页
       ·蛋白的固相荧光衍生第113-114页
       ·过量荧光衍生试剂的去除第114页
     ·蛋白的孵育和洗脱第114页
     ·荧光显微镜检测第114-115页
   ·结果和讨论第115-119页
       ·蛋白质的固定第115-116页
       ·三种材料对蛋白固定率的比较第115页
       ·氨基材料用量对蛋白固定率的考察第115-116页
     ·GST与其抗体的相互作用考察第116-117页
     ·HSA与血浆中其它馏分的相互作用考察第117-119页
       ·HSA的反相色谱分离第117页
       ·血浆的反相色谱分离第117-118页
       ·馏分的固相荧光标记第118页
       ·HSA与血浆中其它馏分相互作用考察第118-119页
   ·本章小结第119-120页
   ·参考文献第120-122页
第五章 无标记定量蛋白质组学法分析鼠肝蛋白第122-132页
   ·引言第122-123页
   ·实验部分第123-125页
     ·材料和试剂第123页
     ·样品制备第123-124页
       ·正常及高脂鼠肝样品的提取第123-124页
       ·还原烷基化及溶液酶解第124页
       ·脱盐柱除盐第124页
       ·样品真空离心干燥第124页
     ·两维纳升级液相色谱-电喷雾离子化-串级质谱分析肽段第124-125页
     ·质谱数据分析第125页
   ·结果和讨论第125-126页
     ·正常及高脂大鼠临床特征比较第125-126页
     ·鼠肝组织蛋白的鉴定第126页
     ·比较正常及高脂鼠肝中的差异蛋白第126页
   ·本章小结第126-129页
   ·参考文献第129-132页
附录第132-134页
致谢第134-135页

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