中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-25页 |
·小麦转基因技术研究现状 | 第11-16页 |
·不依赖于原生质体的转化方法 | 第12-15页 |
·基因枪法 | 第12-13页 |
·农杆菌介导法 | 第13-14页 |
·花粉管通道法 | 第14页 |
·低能离子束介导法 | 第14-15页 |
·依赖于原生质体的转化方法 | 第15-16页 |
·PEG 法 | 第15页 |
·电激法 | 第15页 |
·脂质体转化法 | 第15-16页 |
·小麦品质改良转基因现状 | 第16-19页 |
·小麦籽粒硬度转基因 | 第16-17页 |
·小麦面粉白度转基因 | 第17页 |
·小麦淀粉品质转基因 | 第17-18页 |
·小麦营养品质转基因 | 第18页 |
·小麦烘烤品质转基因 | 第18-19页 |
·存在的问题及前景展望 | 第19-20页 |
·小麦转基因技术的发展还不够成熟 | 第19页 |
·小麦转基因育种的功能基因还非常有限 | 第19页 |
·转基因小麦的生物安全性仍是研究重点 | 第19-20页 |
·转基因育种是分子育种的主要途径之一 | 第20页 |
·转基因方法的展望 | 第20页 |
·小麦多酚氧化酶(PPO)和 RNAi 载体 | 第20-24页 |
·多酚氧化酶 | 第20-22页 |
·多酚氧化酶的种类、分布及对品质的影响 | 第20-21页 |
·多酚氧化酶的遗传及分子生物学研究 | 第21页 |
·多酚氧化酶的提取与活性测定 | 第21-22页 |
·RNAi 载体 | 第22-24页 |
·RNAi 原理 | 第22-23页 |
·RNAi 载体构建以及相关载体的利用 | 第23-24页 |
·本研究的研究背景、研究意义和技术路线 | 第24-25页 |
·背景和意义 | 第24-25页 |
·技术路线 | 第25页 |
2 试验材料与方法 | 第25-33页 |
·试验材料、试剂与仪器 | 第25-26页 |
·材料 | 第25-26页 |
·试剂 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·试验方法 | 第26-33页 |
·小麦成熟胚再生培养体系的优化 | 第26-27页 |
·基因枪转化方法 | 第27-28页 |
·转化载体的制备及纯化 | 第27页 |
·金粉制备及子弹包裹 | 第27页 |
·基因枪的轰击 | 第27-28页 |
·培养基的制备 | 第28页 |
·农杆菌转化方法 | 第28-29页 |
·pROK2-ppo-RNAi 农杆菌表达载体的构建和转化 | 第28-29页 |
·转基因植株的检测及筛选 | 第29-33页 |
·转基因植株叶片总 DNA 提取——CTAB 改良法 | 第29页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第29-30页 |
·转基因小麦籽粒总 RNA 提取及半定量 RT-PCR | 第30-31页 |
·转基因小麦籽粒 PPO 同工酶的提取 | 第31-32页 |
·转基因小麦籽粒的 PPO 同工酶的非变性不连续 PAGE 胶电泳 | 第32页 |
·转基因小麦籽粒 PPO 同工酶的活性测定 | 第32-33页 |
·转基因后代植株的农艺性状调查 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-46页 |
·优良转基因受体基因型的筛选及小麦成熟胚再生培养体系的优化 | 第33-36页 |
·基因型和诱导培养基对小麦成熟胚出愈率的影响 | 第33-34页 |
·基因型和诱导培养基对小麦成熟胚直接发芽率的影响 | 第34页 |
·基因型和诱导培养基对小麦成熟胚愈伤组织质量的影响 | 第34-35页 |
·基因型和分化培养基对小麦成熟胚离体培养的影响 | 第35页 |
·基因型和生根培养基对小麦成熟胚离体培养的影响 | 第35-36页 |
·基因枪转化愈伤 | 第36页 |
·农杆菌转化愈伤 | 第36-38页 |
·转基因后代的检测及筛选 | 第38-44页 |
·转基因植株总 DNA 的提取 | 第38页 |
·转基因植株的 intron PCR 检测 | 第38-39页 |
·T0转基因植株的 intron PCR 检测 | 第38页 |
·T1代转基因植株的 intron PCR 检测 | 第38-39页 |
·T3代转基因植株的 intron PCR 检测 | 第39页 |
·转基因植株的 bar 基因 PCR 检测 | 第39-40页 |
·T1代转基因植株的 bar 基因 PCR 检测 | 第39-40页 |
·T3代转基因植株的 bar 基因 PCR 检测 | 第40页 |
·转基因小麦籽粒的半定量 RT-PCR (Semi-Quantitative RT-PCR)检测 | 第40-42页 |
·转基因小麦籽粒的 PPO 同工酶的非变性不连续 PAGE | 第42页 |
·转基因小麦籽粒 PPO 同工酶的活性测定 | 第42-44页 |
·农艺性状调查结果 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
·小麦成熟胚体系优化分析 | 第46-47页 |
·转基因植株的获得方法 | 第47-48页 |
·转基因对后代植株农艺性状的影响 | 第48页 |
5 结论 | 第48-50页 |
·小麦成熟胚体系优化 | 第48-49页 |
·转基因植株的获得和检测筛选 | 第49页 |
·转基因后代的农艺性状 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
发表论文情况 | 第56页 |