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西伯利亚鲟Tbx2亚家族基因的克隆和表达分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
引言第9-13页
第一章 鲟鱼 Tbx2 亚家族基因 cDNA 片段克隆第13-20页
   ·材料与方法第13-16页
     ·鲟鱼胚胎的收集与分期第13页
     ·鲟鱼胚胎 RNA 的提取第13-14页
     ·c DNA 的制备第14页
     ·引物设计,PCR第14页
     ·cDNA 目的片段的纯化第14-15页
     ·T载体连接与转化第15页
     ·同源比对分析与系统进化树构建第15-16页
   ·实验结果第16-19页
     ·西伯利亚鲟与其它物种 Tbx2 亚家族成员的同源比对第16-18页
     ·西伯利亚鲟 Tbx2 亚家族成员系统进化树构建第18-19页
   ·讨论第19-20页
第二章 西伯利亚鲟 Tbx3 基因 cDNA 全长克隆及其生物信息学分析第20-26页
   ·材料与方法第20-21页
     ·cDNA 全长克隆第20页
     ·生物信息学分析第20-21页
   ·实验结果第21-25页
     ·西伯利亚鲟 Tbx3 基因全长 cDNA 序列分析第21-22页
     ·AbTbx3DNA 结合域(T - domain )的二级和三级结构分析第22-25页
   ·讨论第25-26页
第三章 西伯利亚鲟 Tbx2 亚家族成员的相对表达量分析第26-33页
   ·材料与方法第26-27页
     ·成鱼各组织的解剖第26页
     ·鲟鱼胚胎各时期和成鱼各组织 RNA 的提取第26页
     ·cDNA 的制备第26页
     ·实时定量 PCR 基因特性引物设计第26-27页
     ·SYBRGreen 荧光实时定量 PCR第27页
   ·实验结果第27-30页
     ·西伯利亚鲟 Tbx2 亚家族成员在不同胚胎发育时期的表达模式第27-28页
     ·西伯利亚鲟 Tbx2 亚家族成员在成体各组织或器官中的表达模式第28-30页
   ·讨论第30-33页
第四章 AbTbx3 基因在西伯利亚鲟胚胎中的时空表达第33-38页
   ·材料与方法第33-35页
     ·AbTbx3 基因反义 RNA 探针合成第33-34页
       ·质粒提取第33页
       ·酶切位点筛选第33页
       ·质粒酶切第33页
       ·酶切产物回收第33-34页
       ·反义 RNA 探针合成第34页
     ·反义 RNA 探针纯化第34页
     ·整体原位杂交第34-35页
   ·实验结果第35-37页
   ·讨论第37-38页
小结第38-39页
参考文献第39-43页
附录第43-44页
致谢第44页

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